检索结果-内蒙古大学图书馆

湖南农业科学 2012年第4期 126-129页

作者：郭少娟张中旺张永光王永录潘丽吕建亮周鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫病毒接种乳鼠、豚鼠及BHK-21细胞,获得相应的适应毒。以各组织液中的口蹄疫病毒RNA为模板,反转录并扩增VP1基因,PCR产物琼脂糖凝胶电泳,回收目的片段,测序。测序结果与核酸数据库中口蹄疫病毒VP1基因比对,并将各适应毒扩增的VP1... 详细信息

口蹄疫病毒接种乳鼠、豚鼠及BHK-21细胞,获得相应的适应毒。以各组织液中的口蹄疫病毒RNA为模板,反转录并扩增VP1基因,PCR产物琼脂糖凝胶电泳,回收目的片段,测序。测序结果与核酸数据库中口蹄疫病毒VP1基因比对,并将各适应毒扩增的VP1基因序列相互比对。结果表明:此毒为口蹄疫病毒,各适应毒间序列同源性达98%。并用口蹄疫病毒抗原进行SDS-PAGE,分别与大肠杆菌表达的口蹄疫病毒HeB株P1蛋白制备的多克隆兔抗及健康对照血清进行Western blot,对多克隆兔抗进行鉴定,并用间接ELISA测定此多克隆兔抗的效价。确定此多抗能中和FMDV结构蛋白,抗体效价>1∶800。

关键词：口蹄疫病毒结构蛋白P1 多克隆抗体

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羊传染病四季发病特点及其防制

羊传染病四季发病特点及其防制

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2012年全国养羊生产与学术研讨会

作者：张克山尚佑军逯忠新刘湘涛家畜疫病病原生物学国家重点实验室中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室

1四季羊发生传染病特点春暖花开的春季,"冬眠"的微生物开始复苏,圈养了整个冬天的羊离开羊舍出去活动,加上初春季节羊的膘情不理想,抵抗力相对较低,给羊传染病的发生和流行创造了极为便利的条件。尤其是冬季出生的羔羊,在春... 详细信息

1四季羊发生传染病特点春暖花开的春季,"冬眠"的微生物开始复苏,圈养了整个冬天的羊离开羊舍出去活动,加上初春季节羊的膘情不理想,抵抗力相对较低,给羊传染病的发生和流行创造了极为便利的条件。尤其是冬季出生的羔羊,在春季断奶时,羔羊本身抵抗力弱加上断奶应激易发生传染病。因此春季必须高度重视羊传染病,做好免疫接种、药物预防和定期消毒等工作。夏季湿热的环境为羊传染病尤其是细菌性传染病的发生、传播和流行提供了有利条件。随着大量药物的不规范使用和病原微生物的不断变异,传统观念上的羊病

关键词：发病特点传染性角膜结膜炎羊肠毒血症传染病羔羊痢疾羊传染性胸膜肺炎羊快疫

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羊传染病四季发病特点及其防制

羊传染病四季发病特点及其防制

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中国畜牧兽医学会养羊学分会2012全国养羊生产与学术研讨会议

作者：张克山尚佑军逯忠新刘湘涛家畜疫病病原生物学国家重点实验室，中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室，国家口蹄疫参考实验室，兰州 730046

本文首先阐述了一年四季羊发生传染病的特点，简要介绍了四季常见的传染病的种类，并根据不同季节的发病状态从疫苗免疫、用药方面提出了相应的防控措施。

关键词：羊传染病发病特点防控对策

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具有免疫反应性的猪瘟病毒多表位基因在大肠杆菌中的克隆表达和鉴定

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生物学杂志 2012年第5期29卷 6-10页

作者：侯相民田宏尚佑军田永强刘湘涛兰州交通大学化学与生物工程学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

将猪瘟病毒不同抗原表位基因串联构成重组基因BT21,化学合成后克隆至pMD18-T载体中,然后再将BT21串联基因片段插入原核表达载体pGEX-6P-1。经酶切和测序鉴定后,构建的重组质粒pGEX-BT21转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,表达产... 详细信息

将猪瘟病毒不同抗原表位基因串联构成重组基因BT21,化学合成后克隆至pMD18-T载体中,然后再将BT21串联基因片段插入原核表达载体pGEX-6P-1。经酶切和测序鉴定后,构建的重组质粒pGEX-BT21转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE分析,用Glutathione Sepharose 4B亲和层析法纯化目的蛋白和Western blot分析其免疫学活性。结果表明:融合蛋白GST-BT21以可溶形式表达,分子量约为33kDa,与预期大小相符,纯化的重组蛋白可被猪瘟病毒阳性血清所识别,具有良好的免疫学活性。从而为进一步研究该融合蛋白的免疫特性和功能奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒 E2结构糖蛋白多表位抗原抗原活性

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猪O型口蹄疫基因工程疫苗候选株的构建及其免疫原性分析

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畜牧兽医学报 2011年第11期42卷 1562-1569页

作者：李平花白兴文孙普李冬卢曾军包慧芳曹轶梅付元芳陈应理谢宝霞殷宏刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

近年来,O型口蹄疫病毒已演化出多种谱系。目前应用的疫苗已不能有效保护多谱系口蹄疫的流行,这给我国猪口蹄疫的防控带来了极大的困难。为了进一步发展免疫原性好、抗原谱广的猪O型口蹄疫疫苗候选株,本研究以O/HN/93现用疫苗毒株的感染... 详细信息

近年来,O型口蹄疫病毒已演化出多种谱系。目前应用的疫苗已不能有效保护多谱系口蹄疫的流行,这给我国猪口蹄疫的防控带来了极大的困难。为了进一步发展免疫原性好、抗原谱广的猪O型口蹄疫疫苗候选株,本研究以O/HN/93现用疫苗毒株的感染性克隆为骨架,构建了含VP3(58位)和VP1(43、48、137、139、140、141和142位)氨基酸改造的全长克隆。线性化的全长cDNA和T7RNA聚合酶质粒共转染BHK细胞后获得拯救病毒。RT-PCR和乳鼠致病性试验表明拯救病毒遗传稳定,具有与亲本病毒相似的致病性。用拯救的基因工程病毒灭活疫苗免疫猪28d后分别用中国谱系、泛亚谱系和缅甸98谱系猪源毒的流行毒攻击,结果均获得了完全保护(16/16)。O/HN/93灭活疫苗免疫猪能完全保护泛亚谱系和缅甸98谱系猪源病毒的攻击(16/16),但不能完全保护(12/16)中国谱系猪源病毒的攻击。结果表明基因工程病毒制备的灭活疫苗提高了对中国型猪源谱系病毒的免疫保护,拓展了抗原谱,是具有良好开发前景的疫苗候选株。

关键词：猪口蹄疫基因工程病毒构建免疫原性分析

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口蹄疫病毒非结构蛋白3AB的原核表达及应用(英文)

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生物工程学报 2011年第2期27卷 180-184页

作者：邵军军常惠芸林彤丛国正独军政高闪电中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

旨在建立一种检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的敏感、特异的ELISA方法。克隆、表达了口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因,原核表达的重组蛋白经亲和层析法纯化及Western blotting鉴定后作为包被抗原,建立检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的3AB间接... 详细信息

旨在建立一种检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的敏感、特异的ELISA方法。克隆、表达了口蹄疫病毒非结构蛋白3AB基因,原核表达的重组蛋白经亲和层析法纯化及Western blotting鉴定后作为包被抗原,建立检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的3AB间接ELISA方法,通过与商品化试剂盒3ABC-ELISA的比对试验对其进行评价。结果显示,重组蛋白3AB以包涵体形式表达;能与口蹄疫病毒感染血清发生特异性反应,而不能与疫苗免疫动物血清发生反应;在检测田间样品时,与3ABC-ELISA具有同样的特异性和敏感性(P>0.05)。因此,认为重组蛋白3AB是一种十分有用的分子标记物,能有效区分口蹄疫病毒感染动物和疫苗免疫动物。

关键词：口蹄疫病毒蛋白反转录聚合酶链反应(RT-PCR) 酶联免疫反应(ELISA)

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猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救

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中国兽医学报 2011年第2期31卷 169-173,188页

作者：杨顺利尹双辉沈小燕尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫... 详细信息

用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组。将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原。提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录。免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到衣壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA。结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子。为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础。

关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆病毒拯救

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口蹄疫病毒前导白蛋(L^(pro))功能最新研究进展

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中国人兽共患病学报 2011年第1期27卷 64-66页

作者：刘永杰张克山尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）引起的一种急性、热性,高度接触性人兽共患传染病,其临床表现为偶蹄动物口、蹄部出现水泡。口蹄疫的暴发和流行带来严重的经济损失和不良的社会影响,同时对人们身体健康带来... 详细信息

口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）引起的一种急性、热性,高度接触性人兽共患传染病,其临床表现为偶蹄动物口、蹄部出现水泡。口蹄疫的暴发和流行带来严重的经济损失和不良的社会影响,同时对人们身体健康带来严重威胁。

关键词：口蹄疫病毒世界动物卫生组织人兽共患传染病动物传染病临床表现经济损失身体健康接触性

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猪繁殖与呼吸综合征检测技术研究进展

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中国生物工程杂志 2011年第4期31卷 124-128页

作者：魏衍全田宏吴锦艳尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸综合征是导致猪繁殖障碍疾病的一种重要猪病。其致病机制和自身复制规律至今尚不完全明确,因此无法从根本上清除该病的存在,这就使得对该病的检测显得尤为重要。现从直观的临床诊断、精确的实验室诊断及鉴别诊断等方面对猪... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征是导致猪繁殖障碍疾病的一种重要猪病。其致病机制和自身复制规律至今尚不完全明确,因此无法从根本上清除该病的存在,这就使得对该病的检测显得尤为重要。现从直观的临床诊断、精确的实验室诊断及鉴别诊断等方面对猪繁殖与呼吸综合征检测技术进行了综述,其中对可以最终确诊的实验室检测技术进行了重点介绍,并对猪繁殖与呼吸综合征生物学检测技术进行了总结。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征检测技术

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兽用疫苗管理与控制的国际标准

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中国生物工程杂志 2011年第5期31卷 138-141页

作者：卢国栋张克山刘永杰尚佑军郭建宏郑海学田宏刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

兽用疫苗是兽医医学产品,需接受像医学产品相同或相似的管理和控制标准,这意味着动物疫苗必须满足复杂的要求,保障产品在预期使用条件下的质量、安全性和免疫效力。在动物医药领域中,欧盟和美国的动物疫苗管理和控制体系发展早,制度完整... 详细信息

兽用疫苗是兽医医学产品,需接受像医学产品相同或相似的管理和控制标准,这意味着动物疫苗必须满足复杂的要求,保障产品在预期使用条件下的质量、安全性和免疫效力。在动物医药领域中,欧盟和美国的动物疫苗管理和控制体系发展早,制度完整,为其他国家和地区建立良好的动物疫苗管理与控制标准提供了有价值的参考信息。另外,统一各个国家和地区的兽用疫苗管理与控制标准是加速实现全球兽用疫苗自由、快速国际贸易的重要途径。

关键词：兽用疫苗管理与控制标准欧盟与美国标准国际统一化

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