检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2011年第6期31卷 809-813页

作者：颜新敏储岳峰吴国华李健朱海霞朱彩珠张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046

利用特异性PCR方法从病山羊组织病料中分别扩增山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段,继而将扩增的特异性片段克隆、测序,并与GenBank上相应的基因序列进行比对、绘制系统进化树,进行流行病学分析。结果表明,从病... 详细信息

利用特异性PCR方法从病山羊组织病料中分别扩增山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段,继而将扩增的特异性片段克隆、测序,并与GenBank上相应的基因序列进行比对、绘制系统进化树,进行流行病学分析。结果表明,从病山羊中可同时扩增出山羊痘病毒、羊口疮病毒和山羊支原体山羊肺炎亚种特异性片段,并通过基因序列比对分析确证了PCR检测结果,首次证实我国存在山羊痘、羊口疮及山羊传染性胸膜肺炎的混合感染,为我国现阶段羊病的流行病学和有效防制措施的制定提供了参考依据。

关键词：山羊痘病毒口疮病毒羊支原体山羊肺炎亚种 PCR 混合感染

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口蹄疫病毒3D蛋白对表位多肽免疫效果调节作用的研究

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畜牧兽医学报 2011年第9期42卷 1271-1276页

作者：邵军军王景锋常惠芸柳纪省甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

为了研究口蹄疫病毒(FMDV)重组蛋白3D对病毒表位抗原的免疫调节功能,笔者克隆了Asia 1型FM-DV的3D蛋白基因,并实现了重组蛋白在***的表达及纯化。将纯化的重组蛋白3D与重组抗原按1∶2混合,并与等体积的ISA 206佐剂混合,制备免疫原(每毫... 详细信息

为了研究口蹄疫病毒(FMDV)重组蛋白3D对病毒表位抗原的免疫调节功能,笔者克隆了Asia 1型FM-DV的3D蛋白基因,并实现了重组蛋白在***的表达及纯化。将纯化的重组蛋白3D与重组抗原按1∶2混合,并与等体积的ISA 206佐剂混合,制备免疫原(每毫升含50μg3D重组蛋白和100μg重组抗原)。按每只豚鼠1mL剂量经后腿肌肉多点接种250～300g健康豚鼠5只,免疫后28d用相同剂量的免疫原进行加强免疫;分别于免疫后0、21、28和42d采血检测血清中和抗体效价,并进行淋巴细胞增殖试验。于加强免疫后14d用103的50%豚鼠感染量(GPID50)的Asia1型FMDV进行攻击,评价免疫原效力。同时,设立重组抗原/ISA 2061(每毫升含100μg重组抗原)、Asia 1型灭活疫苗(1mL)和PBS/ISA 206(1mL)作为对照。结果表明,3D重组蛋白能显著提高表位重组抗原的中和抗体水平和淋巴细胞的增殖水平(P<0.05),但与灭活疫苗组没有差别(P>0.05);PBS对照组未检测到中和抗体和淋巴细胞增殖。结果提示,重组蛋白3D可显著提高重组表位抗原的免疫潜能,是一种十分重要的免疫调节蛋白,对开发新型疫苗具有重要的意义。

关键词：口蹄疫病毒 3D蛋白免疫疫苗

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细胞免疫检测方法研究进展

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江苏农业科学 2011年第1期39卷 246-250页

作者：刘新生王永录中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

细胞免疫在机体的免疫过程中发挥着重要的作用,掌握细胞免疫的各个过程对全面了解机体免疫反应、监测抗原变异、正确理解病原体致病的分子机制、自身免疫性疾病的治疗以及疫苗的研制等都具有重要的意义。笔者从体内功能检测、体外表型... 详细信息

细胞免疫在机体的免疫过程中发挥着重要的作用,掌握细胞免疫的各个过程对全面了解机体免疫反应、监测抗原变异、正确理解病原体致病的分子机制、自身免疫性疾病的治疗以及疫苗的研制等都具有重要的意义。笔者从体内功能检测、体外表型检测、体外功能检测3个方面系统地介绍了目前在细胞免疫检测研究中常用的检测方法,并对这些方法的优缺点进行了分析比较。

关键词：细胞免疫检测方法

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反向遗传技术在猪繁殖与呼吸综合征研究中的应用

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中国农学通报 2011年第7期27卷 364-368页

作者：谷元兴王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起,严重危害全世界养猪业。PRRSV与宿主细胞的相互作用、致病机理,其基因组及蛋白质对致病性的影响等仍是未解之谜。反向遗传技术为研究PRRSV提供了技术支撑。现基于病毒拯救、疫苗研制、分子病原学诊断等方面的内容,对反向遗传技术在PRRS研究中的应用作一综述。

关键词：反向遗传技术病毒拯救 RNA病毒猪繁殖与呼吸综合征应用

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磁小体研究进展

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中国农学通报 2011年第24期27卷 8-12页

作者：高宗良谷元兴赵峰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

趋磁细菌(magnetotactic bacteria,MTB)能够在细胞内合成由生物膜包裹的纳米级磁铁矿粒子——磁小体(magetosome)。磁小体的合成过程,尤其是铁离子的反应途径及吸收转运受到严格的生物调控。磁小体完美的晶体结构使其在医学成像、磁介... 详细信息

趋磁细菌(magnetotactic bacteria,MTB)能够在细胞内合成由生物膜包裹的纳米级磁铁矿粒子——磁小体(magetosome)。磁小体的合成过程,尤其是铁离子的反应途径及吸收转运受到严格的生物调控。磁小体完美的晶体结构使其在医学成像、磁介导热疗、药物输送等众多领域都有良好的应用价值。主要综述了磁小体矿化过程中铁的反应途径和吸收转运系统,以及磁小体在各方面的应用,并对未来的研究方向做了展望。

关键词：磁小体铁反应途径吸收转运应用

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RNA编辑功能和RNA干扰

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生物技术通报 2011年第5期27卷 21-25页

作者：代鹏沈辉马军武刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

RNA编辑被认为是生命体一种新的基因加工与修饰现象,是指DNA转录成RNA后除RNA剪切外的其他加工过程,以核苷酸的删除、插入或替换等方式改变遗传信息,揭示生物进化过程中基因修饰和调控的另一个重要途径,是对中心法则的重要补充。而RNAi... 详细信息

RNA编辑被认为是生命体一种新的基因加工与修饰现象,是指DNA转录成RNA后除RNA剪切外的其他加工过程,以核苷酸的删除、插入或替换等方式改变遗传信息,揭示生物进化过程中基因修饰和调控的另一个重要途径,是对中心法则的重要补充。而RNAi是一种由dsRNA介导的,在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因表达的基因调节途径。着重介绍RNA编辑功能、RNA编辑与RNA干扰关系。

关键词： RNA编辑功能插入/删除替换 RNA干扰

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沙门菌载体重组疫苗的研究进展

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中国兽医杂志 2011年第6期47卷 54-56页

作者：马延滨高闪电丛国正常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

目前,大多数疫苗都采用皮下或肌肉注射,可以诱导有效的血清免疫,但通常无法诱导黏膜抗体（sIgA）的产生。皮下或肌肉注射导致动物产生较大的应激反应,采食量下降,影响动物生长繁殖。实际生产中的不规范免疫操作可能导致病原微生物在个... 详细信息

目前,大多数疫苗都采用皮下或肌肉注射,可以诱导有效的血清免疫,但通常无法诱导黏膜抗体（sIgA）的产生。皮下或肌肉注射导致动物产生较大的应激反应,采食量下降,影响动物生长繁殖。实际生产中的不规范免疫操作可能导致病原微生物在个体问的人为传播而引发疾病。

关键词：重组疫苗沙门菌载体肌肉注射免疫操作病原微生物应激反应生长繁殖

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Asia 1型口蹄疫病毒前导蛋白(L^(pro))亚细胞定位

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中国兽医学报 2011年第5期31卷 687-691页

作者：刘永杰张克山尚佑军杨顺利卢国栋刘湘涛吴润甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

为研究Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)前导蛋白(Lpro)亚细胞定位,利用RT-PCR方法获得L基因,将其定向克隆入pEGFP-N1真核表达载体,经PCR扩增、酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pEGFP-L。利用脂质体介导法将pEGFP-L转染B... 详细信息

为研究Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)前导蛋白(Lpro)亚细胞定位,利用RT-PCR方法获得L基因,将其定向克隆入pEGFP-N1真核表达载体,经PCR扩增、酶切鉴定及序列测定分析,将鉴定为阳性重组表达质粒命名为pEGFP-L。利用脂质体介导法将pEGFP-L转染BHK-21细胞,用荧光显微镜观察和Western blotting方法检测目的基因的表达,经碘化丙啶(PI)染色后在激光共聚焦显微镜下观察Lpro的亚细胞定位。结果表明,成功构建重组表达质粒pEGFP-L;FMDV L基因在BHK-21细胞中得到表达;Western blotting证实表达的Lpro具有反应活性;激光共聚焦显微镜观察发现Lpro在BHK-21细胞中呈弥散性分布。

关键词： Asia1型口蹄疫病毒前导蛋白亚细胞定位

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O型口蹄疫抗体金标试纸盒检测免疫动物抗体效价与攻毒保护关系

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畜牧兽医学报 2011年第9期42卷 1277-1283页

作者：祁光宇任维维智晓莹刘西兰张军王宇梁仲蒋韬中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 中农威特生物科技股份有限公司兰州730046

本研究目的在于用O型口蹄疫金标试纸条研究免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的对应关系以及免疫牛抗体消长规律。用金标试纸条检测了口蹄疫O型疫苗质量标准规定的牛、羊和猪免疫和攻毒血清抗体效价及不同免疫程序的牛血清效价。结果显示... 详细信息

本研究目的在于用O型口蹄疫金标试纸条研究免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的对应关系以及免疫牛抗体消长规律。用金标试纸条检测了口蹄疫O型疫苗质量标准规定的牛、羊和猪免疫和攻毒血清抗体效价及不同免疫程序的牛血清效价。结果显示,当牛、猪和羊免疫血清稀释≥1∶8时,试纸条是阳性结果,表示有99%的被免疫动物属于抗体水平保护范围;被检测血清稀释≤1∶2时,是阴性结果,表示被免疫动物抗体水平属于不保护范围;血清稀释1∶2～1∶8时,是阳性结果,表示有50%的被免疫动物属于抗体水平保护范围。牛在首次免疫8周后加强免疫可以获得良好的保护率和保护时间。通过本试验确定了金标试纸条检测免疫动物抗体效价与攻毒保护之间的关系及牛加强免疫最佳的时间。

关键词： O型口蹄疫金标试纸条抗体效价攻毒保护抗体消长

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重叠PCR法构建副猪嗜血杆菌外源打靶基因

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生物技术通报 2011年第7期27卷 186-190页

作者：张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到... 详细信息

利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到Hup-kan-Hdown的量最多。将此外源打靶基因的两端引入PstI和SacI酶切位点,克隆至具有迁移作用的自杀质粒pDS132,构建了可在大肠杆菌***10-λpir中稳定遗传的打靶载体,为下一步建立副猪嗜血杆菌的高效基因打靶系统奠定基础。

关键词：副猪嗜血杆菌重叠PCR 外源打靶基因

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