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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2008年第10期36卷 14-18页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程石琴逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

【目的】研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)重组亚单位疫苗的免疫保护效果。【方法】用1.0mmol/LIPTG诱导重组表达质粒pET-ApxⅠA、pET-ApxⅢA和pPRoAppOML-1,SDS-PAGE鉴定。纯化的表达产物通过Western blot分析有较好的免疫原性。将r... 详细信息

【目的】研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)重组亚单位疫苗的免疫保护效果。【方法】用1.0mmol/LIPTG诱导重组表达质粒pET-ApxⅠA、pET-ApxⅢA和pPRoAppOML-1,SDS-PAGE鉴定。纯化的表达产物通过Western blot分析有较好的免疫原性。将rApxⅠ、rApxⅢ和rOmp组合作为疫苗Ⅰ组,rApxⅠ、rApxⅢ、rOmp和灭活菌苗组合作为疫苗Ⅱ组,APP 1、3、7型菌制备的灭活疫苗作为疫苗Ⅲ组,PBSⅣ作为空白对照组,进行家兔的免疫试验。免疫共分2次,每次间隔2周。【结果】疫苗Ⅱ组的抗体水平均显著高于疫苗Ⅲ组,疫苗Ⅰ组抗体水平不如疫苗Ⅲ组,其血清效价最高滴度为1∶256。【结论】猪传染性胸膜肺炎毒力因子重组蛋白具有一定的免疫原性,为进一步研究新型亚单位疫苗奠定了基础。

关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌免疫原性基因工程苗免疫试验

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口蹄疫多表位疫苗的研究进展

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中国兽医科学 2008年第11期38卷 1009-1012页

作者：邵军军常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

概述了口蹄疫多表位疫苗研究的最新进展,并对口蹄疫合成肽疫苗、多表位疫苗、病毒样颗粒展示多表位疫苗和以自身蛋白质分子为载体的多表位疫苗的免疫原性进行了比较,旨在为研制高效、安全、多价的新型口蹄疫分子疫苗提供理论参考。

关键词：口蹄疫病毒抗原表位疫苗抗原

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羊O／P液中AsiaⅠ型口蹄疫病毒VP1基因3′端序列的分析

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中国兽医科学 2008年第7期38卷 559-562页

作者：王建东卢曾军包慧芳曹轶梅郭建宏刘湘涛何生虎杨春生刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750001

从宁夏中卫AsiaⅠ型口蹄疫疫区的无临床症状羊采集的食道咽部分泌液（OPF）中扩增得到了4个口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因3′-端483bp（VP483）片段。核苷酸和氨基酸序列比较结果表明，从4份OPF中扩增出的VP1片段，在细胞受体结合位点处的... 详细信息

从宁夏中卫AsiaⅠ型口蹄疫疫区的无临床症状羊采集的食道咽部分泌液（OPF）中扩增得到了4个口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因3′-端483bp（VP483）片段。核苷酸和氨基酸序列比较结果表明，从4份OPF中扩增出的VP1片段，在细胞受体结合位点处的关键氨基酸与目前公布的FMDVAsiaⅠ型流行毒相比均发生了改变，由RGD变成RDD。4个扩增片段的核苷酸序列与AsiaⅠ／js／WX／05株相比，同源性为96．2％～98、3％，表明与AsiaI／JS／WX／05株高度同源。蛋白结构模拟结果显示，这种改变会导致G—H环柔性减弱，这可能是AsiaⅠ／JS／WX／05FMDV适应羊体，造成持续感染后发生的一种变异。

关键词： AsiaⅠ型口蹄疫病毒羊O/P液 VPl基因序列分析

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商品疫苗对FMDVO／YNGM／97株的免疫效果评价

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中国兽医科学 2008年第10期38卷 866-870页

作者：王占伟刘力宽陈笑娟余四九王永录方玉珍潘丽蒋守田张维德杜进鑫张淑刚张中旺李正丰张昱吕建亮甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定,并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究。结果显示,该流行毒株为O型口蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.0... 详细信息

利用血清学方法对我国流行毒株O/YNGM/97进行鉴定,并对其生物学特性和免疫学特性进行了研究。结果显示,该流行毒株为O型口蹄疫病毒(FMDV),其对乳鼠和BHK21细胞的适应性比较好,致病性较强,LD50和TCID50分别为10-6.33/0.2 mL和10-4.75/0.05 mL。VP1基因序列的比较结果显示,O/YNGM/97株与国外FMDV参考毒株O/TAI/1/92的同源性为91.4%,与国内疫苗毒株OZ/93、OA/58和OY/80的同源性分别为79.2%、83.6%和78.9%。用商品疫苗OZ株、OY株口蹄疫O型灭活疫苗和牛羊口蹄疫O-Asia1型双价灭活疫苗免疫的小鼠均可产生较高的免疫抗体,并对流行毒株O/YNGM/97的攻击具有较好的保护性。说明,使用现有商品疫苗完全可以预防该毒株在我国的流行。

关键词：口蹄疫疫苗流行毒株免疫抗体 BALB/c小鼠

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FMDV整联蛋白受体β1亚基的克隆及其配体黏附区多抗的制备

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生物工程学报 2008年第5期24卷 874-880页

作者：杜平尚佑军马军武贺延玉孙晓林刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室兰州730046 甘肃农业大学研究测试中心兰州730070 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

采用RT-PCR技术从牛气管组织扩增出2400bp的β1基因,回收纯化连入PGEM-T载体,测序。用Expasy软件对β1基因的抗原性进行分析,选取胞外区334-861bp的配体结合区与6×His融合,在大肠杆菌中大规模诱导表达,并经Ni2＋亲和柱层析纯化。通... 详细信息

采用RT-PCR技术从牛气管组织扩增出2400bp的β1基因,回收纯化连入PGEM-T载体,测序。用Expasy软件对β1基因的抗原性进行分析,选取胞外区334-861bp的配体结合区与6×His融合,在大肠杆菌中大规模诱导表达,并经Ni2＋亲和柱层析纯化。通过SDS-PAGE鉴定后,应用纯化蛋白免疫新西兰家兔,获得效价在1：12800以上的多抗,Western blotting鉴定表明此抗体可特异性的与表达的融合蛋白作用。

关键词：口蹄疫病毒整联蛋白 β1亚基配体结合区多克隆抗体

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细胞内模式识别受体研究进展

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免疫学杂志 2008年第3期24卷 359-362页

作者：闫鸿斌高闪电贾万忠才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

天然免疫系统要依赖模式识别受体识别入侵的外源病原微生物,然后将其清除。哺乳动物主要具有两类微生物识别系统,一类是膜结合受体,如Toll样受体,可识别胞外微生物,然后活化细胞内信号来激发机体的免疫反应;另一类是细胞内的模式识别受... 详细信息

天然免疫系统要依赖模式识别受体识别入侵的外源病原微生物,然后将其清除。哺乳动物主要具有两类微生物识别系统,一类是膜结合受体,如Toll样受体,可识别胞外微生物,然后活化细胞内信号来激发机体的免疫反应;另一类是细胞内的模式识别受体,包括NOD样受体和具有螺旋酶结构域的抗病毒蛋白RIG-1和MDA5。这些胞浆分子可识别病原微生物、非微生物以及一些危险信号,在机体的健康与疾病中发挥着十分重要的作用。本文就细胞内天然免疫受体的种类和功能作一综述。

关键词：天然免疫胞内模式识别受体 NOD样受体 RIG-1 MDA5

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常用消毒剂对口蹄疫病毒的灭活试验

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中国消毒学杂志 2008年第2期25卷 120-122页

作者：颜新敏张强朱海霞李建吴国华中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学开放实验室兰州730046

目的研究几种常用消毒剂对口蹄疫病毒灭活效果。方法采用悬液乳鼠皮下接种培养法进行了实验室和现场灭活病毒效果检测。结果以含有效碘100 mg/L的碘酸和50 mg/L的聚维酮碘对悬液内口蹄疫病毒可达到完全灭活。以含有效氯750 mg/L的三氯... 详细信息

目的研究几种常用消毒剂对口蹄疫病毒灭活效果。方法采用悬液乳鼠皮下接种培养法进行了实验室和现场灭活病毒效果检测。结果以含有效碘100 mg/L的碘酸和50 mg/L的聚维酮碘对悬液内口蹄疫病毒可达到完全灭活。以含有效氯750 mg/L的三氯异氰脲酸和250 mg/L的复方二氯异氰脲酸能完全灭活悬液内口蹄疫病毒。以含有效氯溴750 mg/L的溴氯海因,可有效灭活口蹄疫病毒。以含过硫酸钾125 mg/L和过硫酸氢钾250mg/L也可完全灭活口蹄疫病毒。结论本试验所用的含碘消毒剂、含氯消毒剂以及两种过硫酸盐类消毒剂对口蹄疫病毒都有较好的杀灭效果,说明该病毒对常用消毒剂比较敏感。

关键词：口蹄疫病毒含碘消毒剂含氯消毒剂过硫酸盐灭活效果

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三株O型口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

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中国兽医科学 2008年第9期38卷 747-752页

作者：宋帅林彤邵军军丛国正独军政常惠芸胡永浩中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

用抗O型口蹄疫病毒(FMDV)单克隆抗体杂交瘤细胞株(4A9、4C3、9F12)制备腹水并进行纯化,经ELISA检测,单抗4A9、4C3和9F12的腹水效价分别为1∶25600、1∶102400和1∶51200,SDS-PAGE分析显示,3株纯化单抗均以IgG重链和轻链为主,其分子质量... 详细信息

用抗O型口蹄疫病毒(FMDV)单克隆抗体杂交瘤细胞株(4A9、4C3、9F12)制备腹水并进行纯化,经ELISA检测,单抗4A9、4C3和9F12的腹水效价分别为1∶25600、1∶102400和1∶51200,SDS-PAGE分析显示,3株纯化单抗均以IgG重链和轻链为主,其分子质量分别约为45ku和25ku。单抗4A9、4C3和9F12的饱和度分别为1∶40、1∶40和1∶1000,叠加试验所得增值指数分别为0.27%、13.05%、13.34%,均小于50%。Western-blotting结果显示,3株单抗均可与O型FMDV结构蛋白VP1发生特异性反应。表明,此3株单抗均识别O型FMDV VP1蛋白上的同一个抗原位点,存在干扰现象。

关键词： O型口蹄疫病毒单克隆抗体抗原位点

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羊霉形体与霉形体病

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安徽农业科学 2008年第19期36卷 8106-8108页

作者：储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

列举目前已知从绵羊和山羊上分离出的霉形体种类,并概述这些霉形体的病原性和在疾病发生过程中的作用。

关键词：霉形体霉形体病传染性无乳症山羊传染性胸膜肺炎

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多杀性巴氏杆菌的分离和PCR鉴定

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江西农业大学学报 2008年第4期30卷 702-705页

作者：贺英储岳峰赵萍高鹏程逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

从甘肃省某县一猪场病死猪剖解肺部分离,经过涂片镜检观察,为革兰氏染色为阴性的球杆菌,经过生化试验鉴定初步定为多杀性巴氏杆菌。设计1对引物进行PCR扩增、克隆之后,送往大连宝生物公司测序,测序结果运用BLAST软件比对,与多杀性巴氏... 详细信息

从甘肃省某县一猪场病死猪剖解肺部分离,经过涂片镜检观察,为革兰氏染色为阴性的球杆菌,经过生化试验鉴定初步定为多杀性巴氏杆菌。设计1对引物进行PCR扩增、克隆之后,送往大连宝生物公司测序,测序结果运用BLAST软件比对,与多杀性巴氏杆菌同源性为100%。对分离株进行药敏试验,其对青霉素、链霉素、四环素等抗生素和磺胺类药物敏感。

关键词：分离鉴定多杀性巴氏杆菌聚合酶链式反应

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