检索结果-内蒙古大学图书馆

蛋白质组学在动物医学中的应用研究进展

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动物医学进展 2011年第6期32卷 139-141页

作者：刘永杰张克山卢国栋尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

利用蛋白质组学技术研究动物疾病,能发现与疾病发生,发展和转归过程密切相关的蛋白质及其变化特征,为相关疫苗和新型药物的开发提供新的途径。论文从蛋白质组在动物病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫病及其他营养代谢病方面的研究进展进... 详细信息

利用蛋白质组学技术研究动物疾病,能发现与疾病发生,发展和转归过程密切相关的蛋白质及其变化特征,为相关疫苗和新型药物的开发提供新的途径。论文从蛋白质组在动物病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫病及其他营养代谢病方面的研究进展进行综述。

关键词：蛋白质组学动物医学应用

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梅迪-维斯纳病毒研究进展

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动物医学进展 2011年第3期32卷 104-107页

作者：张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免... 详细信息

梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免疫逃避机理及引起宿主的免疫反应,并对未来的防控研究工作进行展望。

关键词：梅迪-维斯纳病毒病原学致病机理免疫学

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猪瘟病毒复合多表位抗原基因的克隆表达及其免疫学特性

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中国兽医科学 2011年第11期41卷 1144-1149页

作者：侯相民田宏吴锦艳陈妍尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 兰州交通大学化学与生物工程学院甘肃兰州730070

为研究猪瘟病毒多表位疫苗,参照GenBank及文献中已发表的猪瘟病毒抗原表位,结合计算机分析软件进行优化和组合。将重组的多表位基因BT23人工合成克隆至pMD18-T质粒中,利用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切并回收BT23基因,将BT23基因片段亚克隆插入p... 详细信息

为研究猪瘟病毒多表位疫苗,参照GenBank及文献中已发表的猪瘟病毒抗原表位,结合计算机分析软件进行优化和组合。将重组的多表位基因BT23人工合成克隆至pMD18-T质粒中,利用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切并回收BT23基因,将BT23基因片段亚克隆插入pGEX-6P-1表达载体中,构建了猪瘟病毒复合多表位抗原基因的原核表达质粒pGEX-BT23,经酶切和测序鉴定正确后转化感受态细胞BL21(DE3),并进行了IPTG诱导表达。经SDS-PAGE分析,以终浓度为0.9mmol/L的IPTG进行诱导,8h后表达量最高,表达产物为融合蛋白,并且以包涵体形式存在,分子质量约36ku,表达产量约占菌体总蛋白的30%。Western-blot检测结果表明,表达的融合蛋白能与猪瘟病毒阳性血清发生特异性反应,说明表达产物具有良好的反应原性。免疫攻毒试验结果表明,复合多表位融合蛋白具有免疫保护作用,这为应用该融合蛋白制备猪瘟病毒免疫血清学诊断试剂和多表位疫苗的研究奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒复合多表位抗原基因融合表达活性分析

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山羊痘病毒感染绵羊的诊断及其p32基因的分子分析

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中国兽医科学 2011年第1期41卷 1-4页

作者：颜新敏吴国华李健朱海霞赵志荀崔力凡朱彩珠张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

采用细胞培养方法从发生羊痘的绵羊肺组织中分离到1株山羊痘病毒GPV/GSgulang/09,对分离株的p32基因进行了PCR-RFLP和序列比对分析。结果显示,GPV/GSgulang/09株p32基因的扩增产物被HinfⅠ酶切后出现山羊痘病毒(GPV)特征性的2条带;p32... 详细信息

采用细胞培养方法从发生羊痘的绵羊肺组织中分离到1株山羊痘病毒GPV/GSgulang/09,对分离株的p32基因进行了PCR-RFLP和序列比对分析。结果显示,GPV/GSgulang/09株p32基因的扩增产物被HinfⅠ酶切后出现山羊痘病毒(GPV)特征性的2条带;p32基因序列第166～168位缺失绵羊痘病毒(SPV)中编码天冬氨酸的3个碱基,与GenBank中其他SPV毒株的同源性为98.1%～98.3%,与GPV毒株的同源性达99.2%～99.9%,且在系统发生树上与GPV位于同一进化分支。结果表明,这是一起GPV感染绵羊的临床病例,为我国羊痘的流行病学研究提供了新的资料。

关键词：山羊痘病毒绵羊感染 p32基因

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Asia1型口蹄疫病毒含RSD受体识别位点感染性克隆的构建与病毒拯救

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畜牧兽医学报 2011年第2期42卷 210-216页

作者：李平花白兴文孙普卢曾军曹伟军谢宝霞吴润殷宏刘在新甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)具有高的突变率和很强的适应性,在环境条件变化时会迅速从准种种群中选择变异株来适应新的环境,这些变异株包括在RGD受体结合基序内部或附近氨基酸的替换。FMDV Asia1/JS/China/05株经不... 详细信息

口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)具有高的突变率和很强的适应性,在环境条件变化时会迅速从准种种群中选择变异株来适应新的环境,这些变异株包括在RGD受体结合基序内部或附近氨基酸的替换。FMDV Asia1/JS/China/05株经不同宿主传代后产生含RSD和RDD受体识别基序的变异株,为了研究含RDD受体识别基序的FMDV在受体结合位点内1个氨基酸的变化是否影响感染性病毒子的产生,作者利用已构建的含RDD受体结合位点的FMDV Asia1/JS/China/05株的全长感染性cDNA克隆为骨架,采用融合PCR方法,构建了该毒株含RSD受体位点的全长cDNA克隆pFMDV-RSD。线性化的pFMDV-RSD重组质粒和表达T7RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,56 h后可观察到典型的FMDV致细胞病变效应。对收获的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光试验、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析,结果证实该毒株细胞受体位点1个氨基酸的替换不影响活病毒的拯救。该试验为进一步研究含RSD受体结合位点FMDV的生物学特性奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒 RSD受体结合位点感染性cDNA克隆病毒拯救

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实时荧光定量PCR筛选牛源整联蛋白αv基因的siRNA片段

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动物医学进展 2011年第3期32卷 56-60页

作者：张国峰独军政常惠芸薛霜骆继怀中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

设计并合成三条针对牛口蹄疫病毒(FMDV)整联蛋白受体αv亚基基因的特异性干扰小RNA(SiRNA)片段,将其转染至本身表达整联蛋白受体αv亚基基因的MDBK细胞。分别在转染后36 h和48 h收集细胞,提取细胞总RNA并反转录为cDNA。应用SYBR Green... 详细信息

设计并合成三条针对牛口蹄疫病毒(FMDV)整联蛋白受体αv亚基基因的特异性干扰小RNA(SiRNA)片段,将其转染至本身表达整联蛋白受体αv亚基基因的MDBK细胞。分别在转染后36 h和48 h收集细胞,提取细胞总RNA并反转录为cDNA。应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR的方法检测3个siRNA片段的干扰效果,筛选出对整联蛋白αv基因具有高效干扰效果的小RNA片段。为建立抗口蹄疫病毒牛新品种培育的RNA干扰转基因技术平台奠定了基础。

关键词：实时荧光定量PCR 整联蛋白 RNA干扰 SYBR GreenⅠ

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口蹄疫病毒免疫逃避机制研究进展

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畜牧与兽医 2011年第7期43卷 96-99页

作者：马延滨高闪电丛国正常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种剧烈的接触传染性疾病。病毒可以进化出不同的方法逃避机体免疫系统的清除,处于一种潜在感染状态,这种现象叫做免疫逃避。免疫逃避可以阻断机体的先天性免疫应答以及获得性免疫应答,这主要是通过诱导免疫细... 详细信息

口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种剧烈的接触传染性疾病。病毒可以进化出不同的方法逃避机体免疫系统的清除,处于一种潜在感染状态,这种现象叫做免疫逃避。免疫逃避可以阻断机体的先天性免疫应答以及获得性免疫应答,这主要是通过诱导免疫细胞凋亡、抑制免疫效应分子功能、抑制抗原呈递实现的。全面深入地研究口蹄疫发病及免疫机制将有助于高保护力疫苗的研制,同时为口蹄疫的生物疗法提供可能。

关键词： FMDV 免疫抑制细胞凋亡免疫逃避

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猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入介体的研究进展

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中国兽医科学 2011年第3期41卷 325-330页

作者：张奕强刘文倩刘永生王印张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物医学院四川雅安625014

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)侵入宿主细胞的途径,介绍了PRRSV的细胞嗜性和其侵入的介体(硫酸乙酰肝素、唾液酸黏附素和CD163等),以及它在病毒侵入宿主细胞时所表现的生物学功能,提出了PRRSV入侵猪肺泡巨噬细胞的一般途径。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒受体硫酸乙酰肝素唾液酸黏附素 CD163

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重叠PCR法构建副猪嗜血杆菌外源打靶基因

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生物技术通报 2011年第7期27卷 186-190页

作者：张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到... 详细信息

利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到Hup-kan-Hdown的量最多。将此外源打靶基因的两端引入PstI和SacI酶切位点,克隆至具有迁移作用的自杀质粒pDS132,构建了可在大肠杆菌***10-λpir中稳定遗传的打靶载体,为下一步建立副猪嗜血杆菌的高效基因打靶系统奠定基础。

关键词：副猪嗜血杆菌重叠PCR 外源打靶基因

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山羊传染性胸膜肺炎病原的检测

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湖北农业科学 2011年第2期50卷 340-341页

作者：赵萍郭晗储岳峰贺英高鹏程张念章逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

湖北某地羊场发生严重呼吸道疾病,经初步诊断为疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)。将患病山羊肺组织提取基因组DNA,以此为模板根据OIE推荐的PCR-REA方法和Mccp-specificPCR方法进行检测,结果这两种方法都得到了预期的片段。说明送检山羊肺... 详细信息

湖北某地羊场发生严重呼吸道疾病,经初步诊断为疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)。将患病山羊肺组织提取基因组DNA,以此为模板根据OIE推荐的PCR-REA方法和Mccp-specificPCR方法进行检测,结果这两种方法都得到了预期的片段。说明送检山羊肺组织中存在山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp),也证实了国内Mccp的流行。

关键词：山羊传染性胸膜肺炎山羊支原体山羊肺炎亚种 PCR

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