检索结果-内蒙古大学图书馆

2008年中国微生物学会学术年会

作者：杨彬兰喜殷相平李学瑞李宝玉方玉萍柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

用RT-PCR法获得了针对口蹄疫病毒(FMDV)基因组5’非编码区内包含病毒复制起始元件的基因片段ASCN及其VP1结构蛋白基因,将其分别克隆至双顺反子表达载体pIRES中,构建成了双表达质粒pASCN-IR-VP1,经酶切、PCR及DNA测序分析表明ASCN及VP1...

用RT-PCR法获得了针对口蹄疫病毒(FMDV)基因组5’非编码区内包含病毒复制起始元件的基因片段ASCN及其VP1结构蛋白基因,将其分别克隆至双顺反子表达载体pIRES中,构建成了双表达质粒pASCN-IR-VP1,经酶切、PCR及DNA测序分析表明ASCN及VP1基因已正确地插入到pIRES中,编码序列及插入方向均正确。用脂质体介导法将双效表达质粒导入BHK-21细胞后,经RT-PCR、实时荧光定量PCR检测表明双效表达质粒中的ASCN在细胞中得到了有效转录,

关键词：

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狂犬病毒核蛋白在家蚕杆状病毒中的高效表达及其在小白鼠的免疫研究

狂犬病毒核蛋白在家蚕杆状病毒中的高效表达及其在小白鼠的免疫研...

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中国农学会高新技术农业应用专业委员会2009年学术研讨会

作者：殷相平易咏竹李志勇李江涛张韵张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将狂犬病毒(rabies virus，RV)核蛋白基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-N，pVL-N与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有RV核蛋白基因的重组病毒rBmNPV... 详细信息

将狂犬病毒(rabies virus，RV)核蛋白基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-N，pVL-N与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有RV核蛋白基因的重组病毒rBmNPV(N)。将获得的重组病毒rBmNPV(N)感染家蚕蚕蛹，双抗体夹心ELISA法检测证明，目的基因在蚕蛹中获得较高水平表达，用蚕蛹表达产物作抗原制备疫苗免疫Ba1b／c小白鼠，免疫动物均产生了特异性抗体，免疫后30 d用狂犬病毒CVS攻毒株攻击，获得了50％的保护。

关键词：狂犬病核蛋白家蚕杆状病毒载体基因克隆疫苗免疫特异性抗体

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组腺病毒的构建及特性研究

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甘肃农业大学学报 2008年第1期43卷 1-6页

作者：马友记赵兴绪黄连清李发弟程小磊柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 中农威特生物科学技术股份有限公司甘肃兰州730046

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEas... 详细信息

将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已得到表达.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 重组腺病毒同源重组

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ASFV解旋酶D1133L蛋白表达和抗体检测方法的建立及初步应用

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江西农业学报 2021年第6期33卷 1-6页

作者：侯景申超超张大俊杨博史喜绢张婷杨泽晓张克山郑海学李丹党文刘湘涛四川农业大学动物医学院四川成都611130 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室/国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

为了建立快速检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的血清学方法,本研究原核表达了ASFV的D1133L重组蛋白,并以其为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种快速检测ASFV的间接ELISA方法,并采用该方法检测了ASFV感染猪后D1133... 详细信息

为了建立快速检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的血清学方法,本研究原核表达了ASFV的D1133L重组蛋白,并以其为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种快速检测ASFV的间接ELISA方法,并采用该方法检测了ASFV感染猪后D1133L的抗体应答情况。结果显示:成功表达纯化了D1133L蛋白,以此为抗原建立了ELISA抗体检测方法,该方法特异性高,灵敏性强,其检测结果与市售试剂盒检测结果的符合率达100%。家猪在感染ASFV后,针对D1133L的抗体在第5天可被检测到,在第7天抗体水平达到顶峰。

关键词： ASFV 解旋酶 D1133L 抗体检测应用

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猪源冠状病毒TGEV中国分离株纤突蛋白生物信息学分析

猪源冠状病毒TGEV中国分离株纤突蛋白生物信息学分析

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：李建强柳纪省兰喜程杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070

以猪源冠状病毒TGEV纤突蛋白基因序列为基础，利用生物软件对TGEV中国分离株纤突蛋白进行N-糖基化位点、跨膜螺旋、进化树、二级结构及抗原位点的预测和分析。结果显示所有TGEV毒株可分为3个基因型，4株中国分离株分别归属于以上3个基... 详细信息

以猪源冠状病毒TGEV纤突蛋白基因序列为基础，利用生物软件对TGEV中国分离株纤突蛋白进行N-糖基化位点、跨膜螺旋、进化树、二级结构及抗原位点的预测和分析。结果显示所有TGEV毒株可分为3个基因型，4株中国分离株分别归属于以上3个基因型，属于Ⅰ型的中国株TSX在跨膜螺旋的氨基酸及二级结构上与其他中国株有明显的差异，而同属于Ⅲ型中国毒株SC-Y和TH-98在跨膜螺旋的氨基酸及二级结构上非常接近，而所有中国分离株抗原表位没有明显差别，表明TGEV在中国没有显著的变异。

关键词：猪源冠状病毒猪传染性胃肠炎纤突蛋白基因序列生物信息学

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鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的稳定性及SPF雏鸡免疫试验

鸡源鹦鹉热衣原体MOMP基因重组腺病毒的稳定性及SPF雏鸡免疫试验

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中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第一届中国兽医临床大会

作者：周继章邱昌庆张小英蔺国珍曹小安张琳程淑敏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开发实验室，甘肃兰州 730046 兰州市动物检疫站，甘肃兰州 730050

禽衣原体病是由嗜性鹦鹉热衣原体感染禽类而引起的一种疾病。鹦鹉热衣原体感染大部分宠物鸟、家禽(包括火鸡、鸭、鹅、鸡以及相关的家养品种)和野鸟。在家禽中，大爆发也经常发生在火鸡场和鸭场，并且导致人的感染。目前国内外尚无商业... 详细信息

禽衣原体病是由嗜性鹦鹉热衣原体感染禽类而引起的一种疾病。鹦鹉热衣原体感染大部分宠物鸟、家禽(包括火鸡、鸭、鹅、鸡以及相关的家养品种)和野鸟。在家禽中，大爆发也经常发生在火鸡场和鸭场，并且导致人的感染。目前国内外尚无商业化疫苗预防禽衣原体病，而化药防治本病存在成本高、食品安全隐患等系列问题。因此，为了控制本病，保护人类健康，促进养禽业的发展，研究和开发高效、低廉的疫苗势在必行。本研究是将重组腺病毒质粒在HEK293细胞中连续传代21代，并用PCR法检测目的基因;结果表明重组腺病毒质粒在HEK293细胞中连续传代后，仍然用PCR检测能检测出目的基因，并且目的基因的氨基酸序列没有发生改变，说明目的基因能够在重组腺病毒活载体体中稳定传代。

关键词：鹦鹉热衣原体感染重组腺病毒稳定性免疫试验家禽禽衣原体病

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微生物添加剂的研究进展

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中国饲料添加剂 2010年第5期 12-14页

作者：祁光宇王宇李娟中农威特生物科技股份有限公司甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室／农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 山东省化工研究院济南250014

微生物添加剂作为无毒、无污染生物制品类饲料添加剂，在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等方面有着其它抗生素类添加剂不可替代的作用，而且随着对其作用机理研究的深入，应用效果的进... 详细信息

微生物添加剂作为无毒、无污染生物制品类饲料添加剂，在调节动物机体微生态平衡、预防疾病、提高饲料转化率、促进动物健康和保护生态环境等方面有着其它抗生素类添加剂不可替代的作用，而且随着对其作用机理研究的深入，应用效果的进一步凸显，应用也越来越广泛。本文对微生物添加剂的概念、种类、国内外研究和应用概况及应用前景进行了综述。

关键词：微生物添加剂概念种类应用前景

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一株H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白基因的克隆及分子特征

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浙江农业科学 2009年第3期50卷 600-603页

作者：易华山侯顺利独军政胡永浩常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 兰州军区疾病预防控制中心甘肃兰州730020

采用RT-PCR方法对H9N2亚型禽流感病毒Ck/GS/2/99株非结构蛋白NS基因进行了扩增,将其克隆到pGEM-T easy载体后进行序列测定与分析。结果表明,该株病毒NS基因开放阅读框(ORF)由890个碱基组成,编码272个氨基酸。经同源性与系统发生树分析表... 详细信息

采用RT-PCR方法对H9N2亚型禽流感病毒Ck/GS/2/99株非结构蛋白NS基因进行了扩增,将其克隆到pGEM-T easy载体后进行序列测定与分析。结果表明,该株病毒NS基因开放阅读框(ORF)由890个碱基组成,编码272个氨基酸。经同源性与系统发生树分析表明,该毒株NS基因都与Ck/NX/4/99株的核苷酸和氨基酸同源性在99%以上,与Ck/HB/31/00、Ck/SD/6/96和Sw/HK/10/98关系密切。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 A/Ckicken/Gansu/2/99 非结构蛋白序列分析

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H9N2亚型禽流感病毒PA基因的克隆与序列分析

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甘肃农业大学学报 2007年第3期42卷 12-16页

作者：易华山侯顺利胡永浩独军政刘萍王光华高闪电常惠芸甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 兰州军区疾病预防控制中心甘肃兰州730020 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

对甘肃H9N2亚型的A/Chicken/GanSu/2/99(A/CK/GS/2/99)株PA基因进行了克隆、测序及分子进化分析.结果表明:该病毒PA基因开放阅读框由2 151个碱基组成,编码716个氨基酸;其与A/Quail/HongKong/NT28/99(H9N2)株和A/Duck/HongKong/Y280/97(H9N2)株的核苷酸同源性分别为98.4%和98.5%,氨基酸同源性分别为98.7%和98.7%;与A/HongKong/156/97(H5N1)和A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)的核苷酸同源性分别为89.0%和87.8%,氨基酸同源性分别为为93.9%和94.3%.

关键词：禽流感病毒(H9N2株) PA基因克隆序列分析

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A型口蹄疫病毒P1基因与GFP基因的重组逆转录病毒载体构建

A型口蹄疫病毒P1基因与GFP基因的重组逆转录病毒载体构建

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：刘艳红安芳兰刘俊林李炯刘相涛尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重开放实验室(甘肃兰州 730046) 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重开放实验室 (甘肃兰州 730046) 甘肃农业大学动物科学技术学院(甘肃兰州 730070) 甘肃农业大学动物科学技术学院 (甘肃兰州 730070)

根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物，以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板，用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体pBABE-puro上。经PCR、酶切及... 详细信息

根据逆转录病毒表达载体pBABA-puro的特点及多克隆酶切位点要求设计引物，以A型FMDV XJ-99的Pl2X基因和GFP基因的阳性克隆质粒为模板，用PCR方法扩增各基因片段。酶切后分步定向亚克隆至逆转录病毒表达载体pBABE-puro上。经PCR、酶切及测序鉴定表明，获得了含CFP的A型FMDV衣壳蛋基因的重组逆转录病毒表达载体，对今后用逆转录病毒载体包装系统进行FMDV的目的基因转移和表达研究，更快速筛选单克隆阳性靶细胞奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒衣壳蛋白基因重组逆转录病毒表达载体

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