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羊口疮病毒的研究进展

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中国动物检疫 2008年第11期25卷 51-53页

作者：颜新敏张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

羊口疮（orf）病毒又称传染性脓疮（ecthyma contagiosum）病毒．属于痘病毒科副痘病毒属．能引起反刍动物和人发病．在我国西部地区流行比较广泛．是家畜疫病防控中重要的一种病原。

关键词：痘病毒羊口疮传染性脓疮家畜疫病西部地区反刍动物病原防控

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绵羊肺炎支原体间接ELISA检测方法的建立及应用

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福建农林大学学报（自然科学版） 2008年第5期37卷 510-513页

作者：赵萍储岳峰高鹏程贺英赵海燕逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

利用绵羊肺炎支原体标准株Y98制备抗原,经超声破碎后作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法用于检测绵羊肺炎支原体血清抗体.经方正滴定确定了抗原包被质量浓度为2.5μ***-1,血清样品稀释倍数为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物最佳... 详细信息

利用绵羊肺炎支原体标准株Y98制备抗原,经超声破碎后作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法用于检测绵羊肺炎支原体血清抗体.经方正滴定确定了抗原包被质量浓度为2.5μ***-1,血清样品稀释倍数为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释倍数为1∶40000,抗原抗体最佳结合时间为1 h.试验结果确定的判定标准为:样品D490 nm(P)与标准阴性血清D490 nm(N)之比,即P/N≥3.0为阳性,P/N≤2.5为阴性,介于二者之间的为可疑.试验证明该方法具有良好的稳定性、重复性和特异性,并且与间接血凝试验相比较其敏感性高于后者.

关键词：绵羊肺炎支原体间接ELISA 检测

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病毒多表位疫苗研究进展

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畜牧与兽医 2008年第10期40卷 102-106页

作者：张昱王永录中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

病毒多表位疫苗是利用免疫学和基因工程技术筛选出病毒的抗原表位,同时结合计算机技术对表位进行优化,将同一病毒的不同细胞表位或者不同亚型病毒的细胞表位串联表达而制成的新型疫苗。由于病毒多表位疫苗在安全性、稳定性以及免疫效力... 详细信息

病毒多表位疫苗是利用免疫学和基因工程技术筛选出病毒的抗原表位,同时结合计算机技术对表位进行优化,将同一病毒的不同细胞表位或者不同亚型病毒的细胞表位串联表达而制成的新型疫苗。由于病毒多表位疫苗在安全性、稳定性以及免疫效力等诸多方面的优势,已成为当前病毒疫苗研究的热点。本文从病毒抗原表位的确定方法、不同表位疫苗以及病毒多表位疫苗的免疫途径和安全性等几方面对病毒多表位疫苗作一综述。

关键词：抗原表位病毒多表位疫苗免疫途径安全性

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丝状支原体山羊亚种抗体间接血凝检测方法的建立及应用

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畜牧与兽医 2007年第10期39卷 64-66页

作者：储岳峰逯忠新赵萍高鹏程贺英石琴中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

将丝状支原体山羊亚种PG3株经超声波破碎处理后的产物致敏经戊二醛和鞣酸处理过的绵羊红细胞,建立了检测丝状支原体山羊亚种抗体的间接血凝试验方法。抗原致敏红细胞的最佳浓度是100～125μg/mL,超免血清抗体效价达1:512～1:1024。免疫... 详细信息

将丝状支原体山羊亚种PG3株经超声波破碎处理后的产物致敏经戊二醛和鞣酸处理过的绵羊红细胞,建立了检测丝状支原体山羊亚种抗体的间接血凝试验方法。抗原致敏红细胞的最佳浓度是100～125μg/mL,超免血清抗体效价达1:512～1:1024。免疫山羊2周后血清抗体检出率为83.3%,对羊布氏杆菌、绵羊肺炎支原体阳性血清检测均为阴性,敏感性明显高于琼脂扩散试验。对628份田间血清进行检测,阳性率为44.9%。结果表明,该法敏感性较高、特异性强和重复性好,可用于山羊传染性胸膜肺炎免疫抗体水平的监测和流行病学调查。

关键词：丝状支原体山羊亚种间接血凝试验抗体检测

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宿主Arf6通过阻止口蹄疫病毒入侵发挥抗病毒作用

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中国兽医科学 2020年第10期50卷 1207-1214页

作者：李国丽史喜绢张大俊徐国伟刘原子申超超张克山郑海学刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

本实验室前期i TRAQ技术研究发现母猪初乳中Arf6表达量显著高于常乳,现有文献报道Arf6在病原感染中扮演重要角色。为研究宿主Arf6在口蹄疫病毒(FMDV)感染中的作用,本研究构建Arf6真核表达质粒,应用Arf6抑制剂,利用RT-qPCR和Western-blo... 详细信息

本实验室前期i TRAQ技术研究发现母猪初乳中Arf6表达量显著高于常乳,现有文献报道Arf6在病原感染中扮演重要角色。为研究宿主Arf6在口蹄疫病毒(FMDV)感染中的作用,本研究构建Arf6真核表达质粒,应用Arf6抑制剂,利用RT-qPCR和Western-blot技术检测FMDV和Arf6的相互调控作用;构建Arf6系列突变体,评估Arf6调控FMDV复制的功能区或者功能位点;利用间接免疫荧光技术(IFA)分析Arf6对FMDV入侵的影响。结果表明,FMDV感染PK-15细胞后,内源性Arf6表达水平显著上调;过表达Arf6抑制FMDV在PK-15细胞中的复制;抑制Arf6能促进FMDV复制;Arf6(155-176 aa)不是Arf6抑制FMDV侵入的关键区域,第48位氨基酸是Arf6抑制FMDV入侵的关键位点。IFA结果显示,Arf6在细胞膜水平阻止了FMDV的入侵。结果表明,宿主Arf6在FMDV入侵层面发挥了抗病毒作用,本研究结果为揭示FMDV和宿主蛋白相互调控作用提供了理论依据。

关键词： Arf6 口蹄疫病毒病毒入侵抗病毒作用

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PRRSV兰州分离株ORF3和ORF5基因的克隆与序列分析及其杆状病毒表达载体的构建

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中国兽医科学 2009年第3期39卷 189-195页

作者：赵娜田宏吴锦艳祁燕蓉满自萍尚佑军何生虎刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 宁夏大学农学院宁夏银川750021

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）中国代表株CH-1a的基因组序列，设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物，利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株（Lanzhou株）的ORF3和ORF5基因，并对其进行序列测定，同时与已发表的1... 详细信息

根据GenBank中猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）中国代表株CH-1a的基因组序列，设计包含完整ORF3、ORF5基因序列的2对特异引物，利用RT-PCR技术扩增PRRSV兰州分离株（Lanzhou株）的ORF3和ORF5基因，并对其进行序列测定，同时与已发表的13株PRRSV进行同源性比较。将扩增的PRRSV Lanzhou株ORF3、ORF5基因分别克隆到杆状病毒表达载体pFastBacHTA上，将经酶切及测序鉴定的阳性重组质粒pFastBacHTA-ORF3、pFastBacHTA-ORF5分别转化到DH10Bac感受态细胞。结果显示，ORF3、ORF5基因长度分别为765bp、603bp，发现核苷酸的同源性分别为88.0％—99.2％、87.3％—99.0％，获得了重组转座子rBacmid-ORF3、rBacmid-ORF5。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 ORF3基因 ORF5基因克隆杆状病毒表达载体

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福建省部分地区副猪嗜血杆菌病的流行病学调查

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贵州农业科学 2010年第2期38卷 130-131页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

为了解副猪嗜血杆菌病在福建省的流行情况,通过间接血凝检测方法对福建省部分猪场猪副猪嗜血杆菌病的流行情况进行了调查,结果表明,福建部分地区猪副猪嗜血杆菌病的阳性率为6.5%,其中母猪阳性率偏高,为8.75%。

关键词：副猪嗜血杆菌病流行病学福建

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复合PCR鉴定胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌方法的建立及初步应用

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江西农业大学学报 2010年第1期32卷 123-127页

作者：贺英赵萍储岳峰高鹏程张建军逯忠新中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立胸膜肺炎放线杆菌(App)、多杀性巴氏杆菌(PM)复合PCR诊断方法,利用1次PCR反应,即可同时扩增App的342bp和PM的457bp的特... 详细信息

在已经建立的胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件和引物的筛选,成功地建立胸膜肺炎放线杆菌(App)、多杀性巴氏杆菌(PM)复合PCR诊断方法,利用1次PCR反应,即可同时扩增App的342bp和PM的457bp的特异性片段。检测灵敏度分别达9.7pgDNA/1.4×103OCFU和16pgDNA/2.3×103OCFU,用建立的方法检测临床分离的23株可疑菌株,App阳性8株,PM阳性2株,与其它鉴定方法检测结果相符,表明该方法的建立能够对这2种疾病进行临床鉴别诊断。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌多杀性巴氏杆菌复合PCR 应用

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阿瑞吡坦在体外对PAMs内非洲猪瘟病毒复制的抑制作用

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中国兽医科学 2022年第10期52卷 1207-1214页

作者：崔卉梅史喜绢张大俊杨行杨博杨金柯郝雨陈玲玲闫文倩刘湘涛郑海学张克山中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

阿瑞吡坦具有抗肿瘤和抗HIV-1活性。为了探究与非洲猪瘟病毒(ASFV)D1133L亲和力较高的阿瑞吡坦是否具有抗ASFV作用,利用MTT方法测定阿瑞吡坦对PAMs细胞的毒性,然后将荧光蛋白重组ASFV感染PAMs细胞后观察荧光变化和TCID_(50)、同时用RT-q... 详细信息

阿瑞吡坦具有抗肿瘤和抗HIV-1活性。为了探究与非洲猪瘟病毒(ASFV)D1133L亲和力较高的阿瑞吡坦是否具有抗ASFV作用,利用MTT方法测定阿瑞吡坦对PAMs细胞的毒性,然后将荧光蛋白重组ASFV感染PAMs细胞后观察荧光变化和TCID_(50)、同时用RT-qPCR和Western-blot分析阿瑞吡坦对ASFV复制及D1133L、P30和P72转录和翻译的影响。结果表明,当DMSO处理PAMs时,细胞存活率未达到100%,对PAMs细胞具有一定毒性;当浓度为20和40μmol/L的阿瑞吡坦处理PAMs后,PAMs细胞存活率均接近100%,当浓度为80μmol/L的阿瑞吡坦处理PAMs时,细胞存活率达到70%以上:当阿瑞吡坦处理感染荧光蛋白重组ASFV的PAMs细胞后,ASFV的荧光值、基因组拷贝数和TCID_(50)被显著降低,ASFV D1133L、P30和P72转录和翻译被显著抑制。结论:阿瑞吡坦在体外对PAMs细胞的毒性较小,通过靶向ASFV编码的D1133L蛋白显著抑制ASFV的体外复制,对ASFVP30和P72的转录和翻译也具有抑制作用。

关键词：非洲猪瘟阿瑞吡坦抗病毒药物抑制作用

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β-防御素研究进展

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安徽农业科学 2009年第8期37卷 3561-3563页

作者：王猛马艳平刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

β-防御素在黏膜上皮细胞广泛表达,在先天免疫系统中扮演重要角色。因具有独特的抗菌机制和广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性。极难产生抗药性而日益受到人们的关注。就β-防御素的分子特征、生物学活性、抗菌机理、基因重组表达,目前科... 详细信息

β-防御素在黏膜上皮细胞广泛表达,在先天免疫系统中扮演重要角色。因具有独特的抗菌机制和广谱抗细菌、抗真菌、抗病毒活性。极难产生抗药性而日益受到人们的关注。就β-防御素的分子特征、生物学活性、抗菌机理、基因重组表达,目前科研中存在的问题及其应用前景做了综述,为临床医学提供参考。

关键词： β-防御素生物学活性抗菌机理重组表达应用

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