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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：韩晓荣柳纪省杨彬中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。虽然传统疫苗已被广泛应用，但是免疫效果均不理想。随着分子生物学的迅速发展，反义核酸技术已成为基因治疗的一种重要方法，在口蹄疫的防治中有良好的前景。

关键词：反义核酸口蹄疫疫苗

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FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析

FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：李志勇易咏竹殷相平张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将口蹄疫病毒(FMDV)Asia/JQ株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重... 详细信息

将口蹄疫病毒(FMDV)Asia/JQ株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重组病毒Bm(P12A3c)。通过免疫荧光技术及双抗体夹心ELISA法证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫，通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后28天进行病毒攻击保护试验，获得了4/5的完全保护。

关键词：家蚕杆状病毒载体疫苗口蹄疫病毒免疫荧光重组病毒

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青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查

引用

现代农业科技 2010年第2期 325-325,327页

作者：韩赟郭晗逯忠新青海省乌兰县畜牧兽医工作站青海乌兰811700 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室

为了解丝状支原体山羊亚种在青海地区的流行状况,利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007～2009年采自青海各地区的1 200份山羊血清进行检测。结果显示:不同地区山羊血清的阳性率从5.0%～21.0%不等,平均阳性率为16.1%... 详细信息

为了解丝状支原体山羊亚种在青海地区的流行状况,利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007～2009年采自青海各地区的1 200份山羊血清进行检测。结果显示:不同地区山羊血清的阳性率从5.0%～21.0%不等,平均阳性率为16.1%。从季节上看,冬春季节发病率要高于夏秋季节。青海地区的丝状支原体山羊亚种的感染率偏高,应该加强对由丝状支原体山羊亚种的防控。

关键词：丝状支原体山羊亚种抗体检测血清学调查青海地区

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A型口蹄疫病毒空衣壳抗原的表达及其产物免疫原性分析

A型口蹄疫病毒空衣壳抗原的表达及其产物免疫原性分析

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：李志勇易咏竹殷相平张韵刘明张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室，兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081

蹄疫病毒A/WH株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重组病毒rBm(P12A...

蹄疫病毒A/WH株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重组病毒rBm(P12A3C)。将获得的重组病毒rBm(P12A3C)感染家蚕蚕蛹，通过双抗体夹心ELISA法证明目的基因在蚕体中获得极高水平表达。用蚕表达产物作抗原制备成疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后21天用同源强毒攻击，其PD50值达到4.33PD50/头份。

关键词：

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三株猪2型圆环病毒甘肃分离株的全基因组序列分析

引用

甘肃农业大学学报 2007年第3期42卷 1-6页

作者：马友记柳纪省李志勇殷相平杨彬李发弟张利中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070

根据GenBank中发表的猪2型圆环病毒（PCV2）全基因组序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法对来自甘肃不同猪场的3份病料中的PCV2进行基因的扩增、克隆和测序,得到全基因组长度为1 768 bp的PCV2Ww株（登录号DQ322701）以及全基因组长度为1... 详细信息

根据GenBank中发表的猪2型圆环病毒（PCV2）全基因组序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法对来自甘肃不同猪场的3份病料中的PCV2进行基因的扩增、克隆和测序,得到全基因组长度为1 768 bp的PCV2Ww株（登录号DQ322701）以及全基因组长度为1 767 bp的PCV2 LZ株和TS株（登录号DQ363860和DQ355153）.应用DNAstar软件序列分析可得,3个分离株全基因组与国内外参考毒株核苷酸序列同源性在94.8%~99.4%,3个分离株之间的核苷酸序列同源性为96.4%~99.4%;PCV2分离株与PCV1分离株核苷酸序列同源性为69.0%~70.0%;ORF1和ORF2所编码的氨基酸序列与国内外PCV2毒株比较,同源性也很高,分别为99.0%~99.4%和92.7%~98.7%.进化树分析表明,PCV2分离毒株在进化上存在地域上的相关性.

关键词：猪2型圆环病毒基因组 ORF1 ORF2 序列分析

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AsiaⅠ型口蹄疫病毒全长开放阅读框的表达及其产物免疫原性分析

AsiaⅠ型口蹄疫病毒全长开放阅读框的表达及其产物免疫原性分析

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm... 详细信息

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm-ORF。通过免疫荧光技术证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫，通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后21天进行病毒攻击保护试验，获得了2/4的完全保护。

关键词：家蚕杆状病毒载体免疫原性疫苗口蹄疫病毒

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口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因重组杆状病毒的构建与表达

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甘肃农业大学学报 2007年第4期42卷 5-10页

作者：马江涛卢曾军曹轶梅郭慧琛郭建宏祝秀梅刘在新杨孝朴甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州7300761 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用SalI和NcoI双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状... 详细信息

通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用SalI和NcoI双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.

关键词：口蹄疫病毒 3ABC基因杆状病毒 Sf9细胞

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猪链球菌病与诊断技术研究进展

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江西农业学报 2009年第5期21卷 121-123,127页

作者：丁小龙丁耀忠程芳珍张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 中农威特股份有限公司甘肃兰州730046

猪链球菌病是由多种致病性链球菌感染引起的一种人畜共患传染病,综述了猪链球菌病的感染因子及其诊断技术的研究进展。

关键词：猪链球菌病诊断技术基因芯片

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狂犬病病毒分子生物学研究进展

狂犬病病毒分子生物学研究进展

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：殷相平李志勇李学瑞李宝玉杨彬兰喜柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046

从病毒基因组及其编码的蛋白、致病机理等方面系统综述了狂犬病病毒分子生物学方面的研究进展，为该病的早期诊断、有效预防和控制提供理论基础。

关键词：狂犬病病毒基因组蛋白致病机理分子生物学

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青海地区丝状支原体山羊亚种的流行病学调查

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甘肃畜牧兽医 2010年第2期40卷 24-25页

作者：韩赟郭晗逯忠新青海乌兰县畜牧兽医工作站青海乌兰811700 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室

为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况，试验利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示，平均阳性率为16．08％。不同地区山羊血清的阳性率从... 详细信息

为弄清楚丝状支原体山羊亚种在青海省地区的流行状况，试验利用丝状支原体山羊亚种抗体检测正向间接血凝试剂盒对2007至2009年采自青海各地区的1200份山羊血清进行了检测。结果显示，平均阳性率为16．08％。不同地区山羊血清的阳性率从5％～20．9％不等。从季节上看，冬春季节发病率要高于夏秋季节。结果提示青海地区的丝状支原体山羊亚种的感染率偏高，应该加强对丝状支原体山羊亚种的防控。

关键词：丝状支原体山羊亚种抗体检测血清学调查青海省

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