检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2007年第11期28卷 71-74页

作者：颜新敏张强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学开放实验室甘肃兰州730046

负链RAN病毒的反向遗传系统建立以后,非节段负链RNA病毒作为疫苗载体的研究取得了重要进展。文章从病毒载体的构建策略、插入基因在载体中的位置、插入片段的大小、数量以及外源基因的表达对载体的毒性作用进行了综述;对外源糖蛋白整合... 详细信息

负链RAN病毒的反向遗传系统建立以后,非节段负链RNA病毒作为疫苗载体的研究取得了重要进展。文章从病毒载体的构建策略、插入基因在载体中的位置、插入片段的大小、数量以及外源基因的表达对载体的毒性作用进行了综述;对外源糖蛋白整合到病毒粒子上对载体的影响,通过不同的方法和途径来提高载体疫苗的免疫效果方面进行阐述。

关键词：非节段负链RNA病毒病毒疫苗载体

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病毒受体及其研究方法进展

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生物技术通讯 2007年第5期18卷 856-858页

作者：独军政常惠芸高闪电才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

病毒性感染具有宿主种属特异性和组织嗜性,这主要由病毒受体决定。受体是介导病毒入侵的决定因素,研究病毒受体对了解病毒与细胞的相互作用至关重要。近年来,研究受体的方法除了传统的病毒覆盖蛋白结合法、单克隆抗体法、免疫共沉淀、... 详细信息

病毒性感染具有宿主种属特异性和组织嗜性,这主要由病毒受体决定。受体是介导病毒入侵的决定因素,研究病毒受体对了解病毒与细胞的相互作用至关重要。近年来,研究受体的方法除了传统的病毒覆盖蛋白结合法、单克隆抗体法、免疫共沉淀、亲和层析等外,出现了许多如噬菌体表面展示技术、酵母双杂交技术、cDNA文库等分子生物学新方法。简要综述了病毒受体及其研究方法的相关进展。

关键词：病毒细胞受体研究方法

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口蹄疫病毒对牦牛持续性感染的分析

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浙江农业科学 2007年第4期48卷 468-471页

作者：周建华丛国正王光华高闪电常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

利用口蹄疫病毒株Akesu/58感染牦牛来建立口蹄疫病毒持续性感染动物模型。连续饲养12个月,每月采集牦牛血液并利用酶联免疫吸附试验检测中和抗体的效价和3ABC非结构蛋白的OD值。3ABC非结构蛋白OD值的数据统计采用SPSS11.5软件包中的Curv... 详细信息

利用口蹄疫病毒株Akesu/58感染牦牛来建立口蹄疫病毒持续性感染动物模型。连续饲养12个月,每月采集牦牛血液并利用酶联免疫吸附试验检测中和抗体的效价和3ABC非结构蛋白的OD值。3ABC非结构蛋白OD值的数据统计采用SPSS11.5软件包中的Curve Estimation进行曲线回归。利用体外细胞实验来检测口蹄疫病毒毒力的变化情况。结果显示,口蹄疫病毒的毒力是逐渐下降的,中和抗体和3ABC的含量均呈下降趋势,并且可人为地划分两个阶段。由于口蹄疫病毒凭借VP1蛋白、L和3C蛋白酶对牦牛的致病性,在第一个阶段内,体液免疫被认为是牦牛机体抗击FMDV感染的主要形式;在第二阶段,细胞免疫被认为是机体抗击FMDV感染的主要形式。

关键词：口蹄疫病毒持续性感染体液免疫细胞免疫

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抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性分析

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中国兽医科学 2007年第3期37卷 227-231页

作者：林彤杜惠芬吴海波邵军军独军政丛国正常惠芸甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃省医学科学院医学生物技术中心甘肃兰州730050 浙江省医学科学院生物工程研究所浙江杭州310013 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

用灭活O型口蹄疫病毒为抗原免疫BALB/c小鼠4次后,取致敏的脾B淋巴细胞和SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,在HAT选择培养基中培养2周,经间接ELISA法筛选,最终获得了3株抗O型FMDV的阳性杂交瘤细胞株,命名为2F1、2G7和6H4。血清学试验证明该Mc... 详细信息

用灭活O型口蹄疫病毒为抗原免疫BALB/c小鼠4次后,取致敏的脾B淋巴细胞和SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,在HAT选择培养基中培养2周,经间接ELISA法筛选,最终获得了3株抗O型FMDV的阳性杂交瘤细胞株,命名为2F1、2G7和6H4。血清学试验证明该McAbs能与FMDV抗原结合,具有高度特异性。

关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体生物学特性

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口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白αvβ6的分子特征

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浙江农业科学 2007年第5期48卷 596-600页

作者：高闪电独军政常惠芸从国正邵军军林彤周建华王光华谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

为研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染中的作用,本实验从FMDV试验感染康复猪的舌皮和肺组织中克隆到了整联蛋白αv和β6亚基的基因并将新基因β6登录到GenBank中,登录号为EF432729。猪整联蛋白β6亚基基因的编码区含有2 367个核苷酸,编... 详细信息

为研究整联蛋白αvβ6在口蹄疫病毒感染中的作用,本实验从FMDV试验感染康复猪的舌皮和肺组织中克隆到了整联蛋白αv和β6亚基的基因并将新基因β6登录到GenBank中,登录号为EF432729。猪整联蛋白β6亚基基因的编码区含有2 367个核苷酸,编码788个氨基酸残基,其信号肽由26个氨基酸组成,胞外域由681个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由52个氨基酸组成。β6亚基含有9个潜在的糖基化位点,3个氨基葡聚糖结合位点,1个依赖于cGMP的蛋白激酶磷酸化位点,10个蛋白激酶C磷酸化位点,2个表皮生长因子相似结构域和2个半胱氨酸丰富区。生物学软件分析发现β6亚基和αv亚基都有头部、茎部和胞浆域组成,且二亚基形成了比较复杂的三级结构,是其发挥生物学功能的结构基础。本实验为进一步深入研究FMDV嗜性、与宿主细胞的相互作用、病毒的侵入机制等问题奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒受体猪整联蛋白αvβ6 分子特征

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口蹄疫病毒3C蛋白酶的结构及功能研究进展

口蹄疫病毒3C蛋白酶的结构及功能研究进展

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：杨彬兰喜殷相平李学瑞李宝玉方玉萍柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州 730046

口蹄疫病毒能引起牛、羊等偶蹄动物发生高度接触性的传染病口蹄疫，该病常常影响着全球畜牧业的发展。 FMDV是小RNA病毒科口蹄疫病毒属的成员，口蹄疫病毒为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约8.5kb，基因组分为5'非编码区、3&#... 详细信息

口蹄疫病毒能引起牛、羊等偶蹄动物发生高度接触性的传染病口蹄疫，该病常常影响着全球畜牧业的发展。 FMDV是小RNA病毒科口蹄疫病毒属的成员，口蹄疫病毒为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约8.5kb，基因组分为5'非编码区、3'非编码区和一个开放阅读框(ORF)。基因组的中部是一大的开放阅读框，编码一多聚蛋白，多聚蛋白在翻译的同时，经二级裂解后，形成3种病毒结构蛋白(VP0，VP3，VP1)和8种非结构蛋白(L，2A，2B，2C，3A，3B，3C和3D)。其中3C全长639nt，编码213个氨基酸。3C蛋白酶是小RNA病毒的共同裂解酶，在多聚蛋白成熟过程中起着极为重要的作用，且在抗病毒药物打靶方面具有一定研究价值。因此，对3C蛋白酶的结构及功能研究进展进行综述很有必要。

关键词：蛋白酶口蹄疫病毒多聚蛋白

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基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展

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动物医学进展 2007年第B08期28卷 37-40页

作者：王建东郭建宏杨春生刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室宁夏动物防疫站宁夏银川750001

口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别... 详细信息

口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求。建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别各血清型口蹄疫和其他水泡性疾病是非常必要的。口蹄疫病毒基因芯片包括155个寡核苷酸探针,总长35bp～45bp,设计在VP3-VP1-2A区,既有共有的病毒型别,也包含特异的血清型别。这项技术的优点是能在单一的芯片上检测多元病原体。

关键词：口蹄疫病毒基因芯片检测

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猪源冠状病毒ORF3和ORF7的克隆及特性分析

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甘肃农业大学学报 2007年第6期42卷 1-7页

作者：李建强柳纪省程杰兰喜胡永浩吴润殷相平李宝玉中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

参照GenBank中Purdue株全序列对TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)TS株的ORF3和ORF7各设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增分别获得了1 487 bp和516 bp大小的两个片段,与预期结果大小相符.TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3a核苷酸... 详细信息

参照GenBank中Purdue株全序列对TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)TS株的ORF3和ORF7各设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增分别获得了1 487 bp和516 bp大小的两个片段,与预期结果大小相符.TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3a核苷酸序列同源性分别为99.1%、93.0%、95.9%、94.4%,相应的氨基酸同源性分别为97.3%、87.8%、93.2%、91.8%,TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3b核苷酸序列同源性分别为99.5%、98.5%、97.0%、97.8%,相应氨基酸的同源性分别为98.4%、96.3%、94.3%、95.8%,而TS株与PRCVIA1894株的ORF3b核苷酸和氨基酸同源性分别为96.6%和93.9%.TS株ORF7没有发生缺失且和其他毒株有很高的同源性.结果表明:TGEV非结构蛋白高变区在ORF3a第192个碱基至终止密码子之间,TGEV和PRCV在编码ORF3b氨基酸的数量和RNA酶结合位点上有一定的差异.

关键词：猪源冠状病毒传染性胃肠炎病毒 ORF3 ORF7 克隆

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FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析

FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

作者：李志勇易咏竹殷相平张志芳柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州 730046 中国农业科学院生物技术研究所北京 100081

将口蹄疫病毒(FMDV)Asia/JQ株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重... 详细信息

将口蹄疫病毒(FMDV)Asia/JQ株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重组病毒Bm(P12A3c)。通过免疫荧光技术及双抗体夹心ELISA法证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫，通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后28天进行病毒攻击保护试验，获得了4/5的完全保护。

关键词：家蚕杆状病毒载体疫苗口蹄疫病毒免疫荧光重组病毒

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AsiaⅠ型口蹄疫病毒全长开放阅读框的表达及其产物免疫原性分析

AsiaⅠ型口蹄疫病毒全长开放阅读框的表达及其产物免疫原性分析

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2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm... 详细信息

将Asia Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)全长6.9Kb的ORF克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF。pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BaePAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病Bm-ORF。通过免疫荧光技术证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫，通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后21天进行病毒攻击保护试验，获得了2/4的完全保护。

关键词：家蚕杆状病毒载体免疫原性疫苗口蹄疫病毒

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