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中国动物传染病学报 2014年第1期22卷 73-79页

作者：张萌白兴文李平花范朋举包慧芳孙普卢曾军曹轶梅刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)编码的前导蛋白,不仅是一个重要的蛋白酶,而且对于病毒来说是一个重要的毒力因子,其能够作用于宿主细胞的特异性蛋白,抵抗宿主细胞所产生的抗病毒效应。本文章简述了口蹄疫病毒前导蛋白... 详细信息

口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)编码的前导蛋白,不仅是一个重要的蛋白酶,而且对于病毒来说是一个重要的毒力因子,其能够作用于宿主细胞的特异性蛋白,抵抗宿主细胞所产生的抗病毒效应。本文章简述了口蹄疫病毒前导蛋白酶的基本特性,例如前导蛋白的基因结构与病毒复制的关系,前导蛋白酶活性的具体特点,以及前导蛋白影响病毒毒力的分子机制。

关键词：口蹄疫病毒前导蛋白先天性免疫

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马属动物梨形虫病的PCR鉴别诊断方法研究

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中国动物检疫 2014年第5期31卷 74-77页

作者：龚真莉刘光远中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

本研究基于对马属动物梨形虫病18s rRNA基因序列的分析,建立了一种PCR检测方法。该方法可通过两步PCR反应同步检测马的两种梨形虫病(马泰勒虫和驽巴贝斯虫),具有省时和敏感性较高的特点。通过实验分别评估了此方法的特异性和敏感性,并... 详细信息

本研究基于对马属动物梨形虫病18s rRNA基因序列的分析,建立了一种PCR检测方法。该方法可通过两步PCR反应同步检测马的两种梨形虫病(马泰勒虫和驽巴贝斯虫),具有省时和敏感性较高的特点。通过实验分别评估了此方法的特异性和敏感性,并对20份田间血样进行检测。试验结果表明该方法具有较高的特异性和敏感性。对田间样品的阳性检测率明显高于普通的显微镜观察法。说明此方法具有较好的可行性,可以尝试在基层实验室推广。

关键词：马属动物梨形虫病 PCR 诊断方法

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羊传染性脓疱病毒逃避宿主免疫应答的机制

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中国草食动物科学 2014年第S1期34卷 11-13页

作者：张克山刘永杰成伟伟尚佑军逯忠新刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

天然免疫又称为非特异性免疫、固有免疫是机体与生俱来的抵抗体外病原体侵袭、清除体内抗原性异物的第一道屏障[1]。细胞天然免疫是机体天然免疫的关键组成部分,随着人们对巨噬细胞、NK细胞及树突状细胞(DCs)等天然免疫细胞的深入研究,... 详细信息

天然免疫又称为非特异性免疫、固有免疫是机体与生俱来的抵抗体外病原体侵袭、清除体内抗原性异物的第一道屏障[1]。细胞天然免疫是机体天然免疫的关键组成部分,随着人们对巨噬细胞、NK细胞及树突状细胞(DCs)等天然免疫细胞的深入研究,加上天然免疫具有即时性且缺乏记忆的特点,天然免疫得到越来越广泛的重视和深入的研究。

关键词：羊传染性脓疱宿主免疫应答固有免疫抗原性非特异性免疫关键组成凋亡蛋白免疫原性体液免疫反

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羊传染性脓疱病毒逃避宿主免疫应答的机制

羊传染性脓疱病毒逃避宿主免疫应答的机制

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2014年全国养羊生产与学术研讨会

作者：张克山刘永杰成伟伟尚佑军逯忠新刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室

关键词：羊传染性脓疱病毒口疮病毒天然免疫应答宿主免疫应答

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PolyI:C和R848对口蹄疫疫苗免疫效力的增强作用研究

PolyI:C和R848对口蹄疫疫苗免疫效力的增强作用研究

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：李冬白兴文谢宝霞刘在新周春雪陈应理孙普卢曾军曹轶梅付元芳包慧芳李平花中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

将2种Toll样受体激动剂PolyI:C和R848,与口蹄疫灭活抗原混合后,再与矿物油佐剂乳化,并免疫猪,经猪的口蹄疫免疫攻毒试验,PD50明显提高,说明这2种激动剂可增强口蹄疫疫苗的免疫效力.

关键词：猪传染病口蹄疫疫苗 Toll样受体激动剂免疫效力

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口蹄疫分子标记疫苗研究报告

口蹄疫分子标记疫苗研究报告

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：刘在新陈应理谢宝霞曹轶梅王永录罗建勋刘湘涛张永光谢庆阁卢曾军李平花白兴文殷宏李冬孙普包慧芳付元芳中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫是严重危害中国畜牧业发展的重大动物疫病,疫苗免疫和精准区分免疫和自然感染动物,筛查并淘汰染毒家畜,是预防和控制口蹄疫的关键措施,也是中国口蹄疫防控的主要策略.针对目前广泛使用的传统口蹄疫灭活疫苗,因纯化不完全,免疫后,... 详细信息

口蹄疫是严重危害中国畜牧业发展的重大动物疫病,疫苗免疫和精准区分免疫和自然感染动物,筛查并淘汰染毒家畜,是预防和控制口蹄疫的关键措施,也是中国口蹄疫防控的主要策略.针对目前广泛使用的传统口蹄疫灭活疫苗,因纯化不完全,免疫后,以检测病毒非结构蛋白抗体为金标准的鉴别技术,难以精准区别免疫和感染动物,既使使用先进的纯化技术,也不能完全清除与灭活病毒大小相同的非结构蛋白复合物,多次免疫后,仍能检测到病毒非结构蛋白抗体,给精准区别免疫动物和感染动物带来了困难,严重阻碍口蹄疫流行病学监测和疫源净化,已成为全球口蹄疫控制计划实施的技术障碍,引起了世界动物卫生组织和口蹄疫控制机构的关注.鉴于此,能精准区别免疫动物和感染动物的标记疫苗成为了研究热点.采用反向遗传学技术,构建带有口蹄疫病毒非结构蛋白优势表位缺失的标记病毒,是研制口蹄疫标记疫苗的最优途径.

关键词：口蹄疫疫苗研制分子标记表位缺失反向遗传学

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痘病毒F10L基因的克隆及生物信息学分析

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西北民族大学学报（自然科学版） 2014年第4期35卷 69-74页

作者：赵银龙吴国华吴健朱海霞颜新敏赵志荀李健吴娜张强穆晓峰西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730124 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实室甘肃兰州730046 吉林农业大学吉林长春130033

将古浪山羊痘病毒的基因组DNA提取出来,并设计引物进行PCR扩增,克隆F10L基因的DNA序列.为了分析山羊痘病毒F10蛋白的分子特征,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息... 详细信息

将古浪山羊痘病毒的基因组DNA提取出来,并设计引物进行PCR扩增,克隆F10L基因的DNA序列.为了分析山羊痘病毒F10蛋白的分子特征,将PCR产物连接到p GEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对F10L基因序列进行预测分析.结果显示,F10L基因序列由1 335个核苷酸组成的开放阅读框,编码444个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值53.01 ku,理论等电点为7.14.该蛋白的二级结构中,α螺旋占12.44%,β折叠占15.73%,其余71.83%为无规则卷曲.多序列比对分析显示,不同羊痘病毒分离株F10L序列高度保守,一致性在97%以上.此研究结果为进一步研究F10蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础.

关键词：痘病毒 F10L 基因克隆生物信息学分析

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中草药红茶菌的制备及其体内抗口蹄疫病毒活性

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安徽农业科学 2014年第18期42卷 5892-5894,5908页

作者：符乃方吴俊才符启俊吕律何继军李开绵叶剑秋蒋盛军蒋小强邱红辉高李泽何萍谢峥嵘陈吉雄中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南儋州571737 中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 海南东方市畜牧局动物疾病预防控制中心海南东方570100

[目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒... 详细信息

[目的]研究中草药红茶菌在动物体内对口蹄疫病毒复制的抑制作用。[方法]选取健康猪20头,喷雾和口服中草药红茶菌3 d后,进行O型口蹄疫毒株(猪O型O/China/99株鼠毒)攻毒试验;攻毒后,继续对猪群进行喷雾和口服给药,观察中草药红茶菌对攻毒猪的保护作用及体内抗口蹄疫病毒的作用。[结果]攻毒结果显示,低剂量给药猪3/5保护,中剂量给药猪1/5保护,高剂量给药猪0/5保护;在低剂量给药条件下,攻毒保护效果优于中剂量和高剂量;从攻毒后的第1天到第7天,陆续从试验猪全血中检测到口蹄疫病毒,其中中草药红茶菌高浓度预防组猪的口蹄疫病毒的复制水平最高,中剂量组较低,低剂量组复制水平最低。[结论]给药合适剂量的中草药红茶菌对猪体内的口蹄疫病毒具有一定的抑制作用。

关键词：中草药红茶菌制备口蹄疫病毒体内抗病毒活性抑制

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中草药红茶菌的制备及其体外抗口蹄疫病毒活性

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安徽农业科学 2014年第17期42卷 5500-5502页

[目的]研究中草药红茶菌的细胞、乳鼠毒性以及对口蹄疫病毒在体外的抗病毒活性。[方法]将中草药红茶菌过滤,用细胞培养液稀释,分别接种在BHK21细胞上观察细胞生长情况,评价其对细胞的毒性作用。将中草药红茶菌用灭菌水稀释,分别接种3日... 详细信息

[目的]研究中草药红茶菌的细胞、乳鼠毒性以及对口蹄疫病毒在体外的抗病毒活性。[方法]将中草药红茶菌过滤,用细胞培养液稀释,分别接种在BHK21细胞上观察细胞生长情况,评价其对细胞的毒性作用。将中草药红茶菌用灭菌水稀释,分别接种3日龄乳鼠,观察乳鼠生长、健康状态和接种部位变化情况,评价其对乳鼠的毒性作用。用稀释的中草药红茶菌与浓度为1 000 LD50的口蹄疫病毒等量混合,37℃条件下作用30 min,接种3日龄乳鼠,观察乳鼠发病死亡情况,估算中草药红茶菌体外可杀灭口蹄疫病毒的最大使用浓度。用稀释的中草药红茶菌与口蹄疫病毒混合,接种BHK21细胞,观察致细胞病变效应,记录不同稀释度的中草药红茶菌对口蹄疫病毒的杀灭效果。[结果]BHK21细胞和乳鼠试验表明,中草药红茶菌在1∶4稀释后,对BHK21细胞无毒性反应,并可有效抑制1 000TCID50口蹄疫病毒在BHK21细胞生长繁殖;1∶2稀释的红茶菌微生态制剂对3日龄乳鼠无毒性反应,并可有效杀灭1 000 LD50口蹄疫病毒。[结论]中草药红茶菌是一种安全性好且对口蹄疫病毒有较好杀灭作用的口蹄疫预防中草药微生态制剂。

关键词：中草药红茶菌口蹄疫病毒预防活性体外

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Al(OH)_3、ISA206及Poly(I:C)免疫佐剂对灭活口蹄疫140S抗原免疫效果的影响

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免疫学杂志 2013年第11期29卷 927-932页

作者：周春雪魏巍李冬韩成昊李艳丽刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

目的选取Al(OH)3、ISA206及Poly(I:C)3种佐剂,分别与灭活口蹄疫病毒(FMDV)配制成疫苗,并通过小鼠实验比较和评价3种佐剂的免疫效力。方法以口蹄疫O型病毒为毒种,经细胞培养传代,获得较高滴度的病毒培养物,并经化学方法灭活制成140S口蹄... 详细信息

目的选取Al(OH)3、ISA206及Poly(I:C)3种佐剂,分别与灭活口蹄疫病毒(FMDV)配制成疫苗,并通过小鼠实验比较和评价3种佐剂的免疫效力。方法以口蹄疫O型病毒为毒种,经细胞培养传代,获得较高滴度的病毒培养物,并经化学方法灭活制成140S口蹄疫完整病毒粒子抗原。在蔗糖密度梯度定量后分别与Al(OH)3、ISA206及Poly(I:C)3种佐剂配合制作口蹄疫灭活疫苗。疫苗经肌肉注射免疫Balb/c小鼠,通过检测抗体效价评价机体产生的体液免疫反应。通过检测体外刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后产生的细胞因子以及淋巴细胞增殖实验评价机体产生的细胞免疫反应。结果 ISA206口蹄疫灭活苗和Poly(I:C)口蹄疫灭活苗诱导小鼠产生的抗体效价较高;通过体外刺激实验发现,ISA206口蹄疫灭活苗免疫组小鼠脾淋巴细胞在抗原刺激后,产生的IFN-γ和IL-4含量最高;通过淋巴细胞增殖实验发现,ISA206口蹄疫灭活苗免疫组小鼠脾淋巴细胞的增殖能力最强(P<0.05)。结论ISA206佐剂在配合灭活口蹄疫140S完整病毒粒子进行免疫时所表现的免疫效力最高。

关键词： Poly(I C) Al(OH)3 ISA206 口蹄疫

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