检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2010年第8期30卷 1139-1144页

作者：闫鸿斌贾万忠田广孚才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

鸡球虫病是由顶复器门(Apicomplexa)、孢子虫纲(Sporozoasida)、真球虫目(Eucoccidiorida)、艾美耳科(Eimeriidae)、艾美耳属(Eimeria)的球虫引起的一种呈全球性分布的原虫病,发病率高达50%－70%,死亡率为20%－30%,严重时高达80%。每年... 详细信息

鸡球虫病是由顶复器门(Apicomplexa)、孢子虫纲(Sporozoasida)、真球虫目(Eucoccidiorida)、艾美耳科(Eimeriidae)、艾美耳属(Eimeria)的球虫引起的一种呈全球性分布的原虫病,发病率高达50%－70%,死亡率为20%－30%,严重时高达80%。每年全世界因球虫病造成的经济损失超过30亿美元。鸡只感染球虫后能诱导机体产生特异、持久的免疫保护力。一般只有足够的卵囊才能刺激机体产生坚强的免疫力,但是有的虫种也有例外,如巨型艾美耳球虫就具有很强的免疫原性,仅需较小剂量的卵囊就能刺激机体产生坚强的免疫力。[第一段]

关键词：艾美耳球虫鸡细胞免疫体液免疫黏膜免疫细胞因子免疫机理

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猪IFN-α1重组蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其生物学特性

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中国兽医科学 2010年第10期40卷 1057-1062页

作者：和燕玲陈国华王佩雅薛萍房永祥景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

应用杂交瘤细胞技术,将用猪IFN-α1重组蛋白免疫的小鼠脾细胞经与骨髓瘤细胞融合、筛选和多次克隆化培养,成功获得了3株能稳定分泌抗猪IFN-α1的单克隆杂交瘤细胞株,分别将其命名为4E9、5B2和5H11。这3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体经EL... 详细信息

应用杂交瘤细胞技术,将用猪IFN-α1重组蛋白免疫的小鼠脾细胞经与骨髓瘤细胞融合、筛选和多次克隆化培养,成功获得了3株能稳定分泌抗猪IFN-α1的单克隆杂交瘤细胞株,分别将其命名为4E9、5B2和5H11。这3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体经ELISA检测,体外细胞培养上清的效价均可达到1∶104,体内腹水的效价均可达1∶105;SDS-PAGE分析显示,纯化的这3株单克隆抗体的重链分子质量均在60ku以上,轻链均在30ku以上,符合抗体IgG重链、轻链分子的大小;抗体亚类鉴定表明4E9、5B2为IgG2a类,5H11株为IgG2b类,且其抗原结合位点基本一致。细胞染色体分析表明,3株杂交瘤细胞株染色体平均数为88～96条,远高于骨髓瘤细胞或脾细胞的染色体数,从遗传角度证实获得了杂交瘤细胞株;在杂交瘤细胞的稳定性试验中,这3株细胞经多次冻存复苏和传代培养,不同代次细胞上清中的抗体效价均在1∶104～1∶105之间,说明该3株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的性能稳定。

关键词：重组猪IFN-α1蛋白单克隆抗体生物学特性

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猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒增强亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒抗原免疫水平的研究

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畜牧兽医学报 2010年第10期41卷 1281-1289页

作者：赵娜陈国华房永祥李玩生贾怀杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

分析CpG基序与猪IFN-γ基因组合的重组表达质粒对口蹄疫灭活抗原的免疫佐剂效应。以亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒为抗原,与含有猪IFN-γ基因和CpG基序的重组质粒配伍,采用肌肉注射法免疫小鼠,加强免疫后检测口蹄疫特异性抗体和中和性抗体水平... 详细信息

分析CpG基序与猪IFN-γ基因组合的重组表达质粒对口蹄疫灭活抗原的免疫佐剂效应。以亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒为抗原,与含有猪IFN-γ基因和CpG基序的重组质粒配伍,采用肌肉注射法免疫小鼠,加强免疫后检测口蹄疫特异性抗体和中和性抗体水平、T淋巴细胞增殖反应、体内细胞毒性T细胞杀伤反应以及细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ的分泌水平。发现猪IFN-γ和CpG基序双因子重组质粒相对单一的因子能诱导更强的体液免疫和细胞免疫反应水平,尤其在中和性抗体和抗原特异性CTL反应方面更为明显。猪IFN-γ和CpG基序在诱导小鼠抵抗亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活病毒免疫方面具有良好的佐剂效应,其重组质粒可望成为一种有前途的新型免疫佐剂。

关键词： γ干扰素 CpG基序口蹄疫病毒灭活抗原免疫佐剂

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猪T细胞受体α链基因的克隆、序列分析及其结构预测

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华北农学报 2010年第1期25卷 23-29页

作者：冯海燕莫斯科房永祥景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体（Tcell receptor,TCR）α链（AB087988）为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因（p... 详细信息

旨在为研究猪T细胞受体分子结构与功能,并首次在国内克隆了猪T细胞受体α链基因。以GenBank上登载的猪T细胞受体（Tcell receptor,TCR）α链（AB087988）为参考序列,从甘肃合作猪外周血液淋巴细胞中用RT-PCR的方法克隆了TCR-α链基因（pTCR-α）。结果表明：克隆的TCR-α基因具有完整的ORF,全长819 bp,编码272个氨基酸,预测蛋白分子量为30 kDa,含18个强碱性氨基酸,23个强酸性氨基酸,87个疏水性氨基酸和103个极性氨基酸,含有一段20个氨基酸的信号肽序列;与GenBank上登载的TCR-α参考序列（AB087988）的同源性为94.6%,与其他具有完整ORF的猪TCR-α相比,同源性为54.4%-80.3%。推测可能是一新的TCR-α基因转录本。同时,应用生物信息学技术分析了其基因序列及编码蛋白的结构特征,这为猪T细胞受体分子结构与功能的研究奠定了基础。

关键词：猪T细胞受体α链基因基因克隆序列分析生物信息学

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弓形虫病的分子诊断技术研究进展

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中国人兽共患病学报 2010年第12期26卷 1160-1162页

作者：王萌王艳华蔡志杰张德林中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生中病重点实验室兰州730046

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Tooxoplasma gondii)引起的呈世界性分布的严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患寄生虫病。免疫功能正常的人多呈隐性感染,而孕妇感染弓形虫后可导致流产、早产、畸胎、死胎等,成为影响人类... 详细信息

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Tooxoplasma gondii)引起的呈世界性分布的严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患寄生虫病。免疫功能正常的人多呈隐性感染,而孕妇感染弓形虫后可导致流产、早产、畸胎、死胎等,成为影响人类优生优育的一种重要生物病原。[第一段]

关键词：弓形虫病分子诊断技术人兽共患寄生虫病人类健康刚地弓形虫畜牧业发展世界性分布隐性感染

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造血系统中miRNAs的表达和功能

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免疫学杂志 2010年第1期26卷 74-80页

作者：闫鸿斌贾万忠高闪电才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病原生物学国家重点实验甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

微RNA(miRNAs)是具有在转录水平调节基因表达的约19～24个核苷酸的非编码RNA。目前,已在病毒、植物、线虫、昆虫、鱼类、小鼠、人类等几乎各种生物体中发现了miRNAs,它广泛分布于多种组织细胞中。微点阵技术(即芯片技术)促进了不同造血... 详细信息

微RNA(miRNAs)是具有在转录水平调节基因表达的约19～24个核苷酸的非编码RNA。目前,已在病毒、植物、线虫、昆虫、鱼类、小鼠、人类等几乎各种生物体中发现了miRNAs,它广泛分布于多种组织细胞中。微点阵技术(即芯片技术)促进了不同造血细胞特异miRNAs的发现。通过对组织培养细胞、miRNAs转基因小鼠或miRNAs基因敲除小鼠模型的研究,发现miRNAs不仅参与机体的免疫应答,而且对免疫系统的发育及其功能的发挥均有调节作用。研究还发现,不仅肿瘤中miRNAs表达存在异常,而且不同肿瘤中miRNAs异常表达谱也不尽相同。miRNAs作为一种潜在的基因诊断和治疗工具如何有效地用于免疫紊乱和癌症的检测、治疗已成为研究热点。本文主要综述了miRNAs在造血系统中的表达和功能研究方面的最新进展。

关键词：微RNA 造血系统免疫应答癌症细胞因子 TNF-α

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重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测

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中国人兽共患病学报 2010年第12期26卷 1097-1100页

作者：丁耀忠刘永生陈浩泰刘文倩张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果... 详细信息

目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测到目的蛋白在COS-1细胞中的表达。结论目的蛋白PrP102-242在COS-1细胞中的成功表达为下一步研究PrPc的结构和功能奠定了基础。

关键词：朊蛋白 COS-1细胞间接免疫荧光检测技术

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人体带绦虫病诊断方法的研究进展

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中国兽医科学 2010年第2期40卷 210-214页

作者：贾万忠王玉朝闫鸿斌郭爱疆中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

就目前用于人体带绦虫感染或寄生的常用临床诊断方法,如虫体形态学观察、粪便或肛门拭子涂片显微镜检查、循环抗体ELISA检测、粪抗原ELISA和粪DNA-PCR检测等及其优缺点进行了综述。指出,敏感性高且特异性强的粪抗原ELISA和粪DNA分子生... 详细信息

就目前用于人体带绦虫感染或寄生的常用临床诊断方法,如虫体形态学观察、粪便或肛门拭子涂片显微镜检查、循环抗体ELISA检测、粪抗原ELISA和粪DNA-PCR检测等及其优缺点进行了综述。指出,敏感性高且特异性强的粪抗原ELISA和粪DNA分子生物学检测是今后的发展方向和应重点研究的领域。

关键词：人带绦虫病诊断粪抗原粪DNA

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猪Toll样受体7基因的克隆及序列分析

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第6期26卷 599-601页

作者：段凤云房永祥陈国华王生富何延华景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1... 详细信息

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1050个氨基酸,富含16.2%的亮氨酸;同源性分析显示,与GenBank上登载的猪TLR7参考序列(DQ333222)的同源性为98.8%,与牛和绵羊的同源性较高,与马、狗、人、家鼠、褐鼠的次之,其遗传演化关系与亲缘关系密切;推导氨基酸的分子结构预测表明,该分子属于I型跨膜受体,由胞外区(588个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(174个氨基酸)组成,有信号肽序列、富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域。结论:成功克隆了猪TLR7基因,预测分析证实具有典型的TLR家族结构特征,这为进一步研究其参与病原分子模式识别和信号传导奠定了基础。

关键词：猪Toll样受体7 分子克隆序列分析结构预测

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Toll样受体7介导的抗病毒天然免疫反应研究进展

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中国兽医科学 2010年第6期40卷 645-649页

作者：何小兵房永祥贾怀杰陈国华曾爽景志忠程国锋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

概述了Toll样受体(TLRs)的发现、种类及其作用模式,重点介绍了TLR7的分子结构、组织分布、识别的配体以及依赖MyD88接头分子的信号转导通路,最后,综述了TLR7介导的抗病毒效应的研究进展。提出,对TLR7及其作用机制的研究必将有助于新型... 详细信息

概述了Toll样受体(TLRs)的发现、种类及其作用模式,重点介绍了TLR7的分子结构、组织分布、识别的配体以及依赖MyD88接头分子的信号转导通路,最后,综述了TLR7介导的抗病毒效应的研究进展。提出,对TLR7及其作用机制的研究必将有助于新型动物用疫苗的创制。

关键词： Toll样受体7 单链RNA 髓样分化因子88 抗病毒免疫

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