检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2017年第6期48卷 979-989页

作者：杨洋付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次... 详细信息

动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次地挖掘。本文中作者将就寄生性蠕虫全基因组测序现状、基因的组成及特征、功能基因组的研究等进行综述,为深入了解寄生性蠕虫的起源、进化和致病机制,以及为寄生性蠕虫病的诊断、新药设计和疫苗研发提供新的思路。

关键词：寄生性蠕虫基因组测序功能基因组学

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我国部分省份羊衣原体病血清学抗体监测调查

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中国兽医学报 2017年第11期37卷 2147-2150页

作者：樊天喜吴锦艳陈妍王光祥尹双辉杨顺利曹小安何继军尚佑军刘湘涛张志东中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃省张家川回族自治县畜牧兽医工作站甘肃张家川741500

为了解我国羊衣原体病的流行近况,采用间接血凝试验(IHA)对我国13省的43个县(市)的921份羊血清样品进行了羊衣原体病抗体的检测。结果显示:被检血清样品平均阳性率为12.38%(114/921)。对被检地区羊衣原体病抗体阳性率进行统计分析,比较... 详细信息

为了解我国羊衣原体病的流行近况,采用间接血凝试验(IHA)对我国13省的43个县(市)的921份羊血清样品进行了羊衣原体病抗体的检测。结果显示:被检血清样品平均阳性率为12.38%(114/921)。对被检地区羊衣原体病抗体阳性率进行统计分析,比较已有报道发现,此病呈逐年上升的趋势。

关键词：羊衣原体间接血凝试验血清学调查

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多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达

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中国畜牧兽医 2017年第10期44卷 2858-2864页

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部兽医公共卫生重点开放实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELIS... 详细信息

为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达反应原性

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合作小型猪免疫识别和应答多样性与特异性分子遗传基础研究

合作小型猪免疫识别和应答多样性与特异性分子遗传基础研究

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第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会

作者：景志忠房永祥李玩生莫斯科冯海燕王生富何小兵姚文娟陈国华曾爽贾怀杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室兰州730046

机体免疫识别和应答主要与免疫细胞特别是抗原递呈细胞(APCs)和T淋巴细胞上的许多免疫识别和应答关键分子如参与天然免疫的TOLL样受体(TLR)以及参与获得性免疫的主要组织相容性复合物(MHC)、T细胞受体(TCR)和CD4/8分子等密切相关，本研...

机体免疫识别和应答主要与免疫细胞特别是抗原递呈细胞(APCs)和T淋巴细胞上的许多免疫识别和应答关键分子如参与天然免疫的TOLL样受体(TLR)以及参与获得性免疫的主要组织相容性复合物(MHC)、T细胞受体(TCR)和CD4/8分子等密切相关，本研究以合作猪的这些分子为对象，在免疫遗传学上分析其功能基因的分子结构，探讨其免疫识别和应答多样性和特异性的分子结构基础。

关键词：

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合作小型猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性研究

合作小型猪T细胞受体β链的基因结构及其多样性研究

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第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会

作者：景志忠房永祥贾怀杰陈国华何小兵曾爽李玩生冯海燕中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

以猪TCRβ链基因的一对特异性引物，用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了 82个猪TCRβ基因(简称STB).测序分析表明，克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的...

以猪TCRβ链基因的一对特异性引物，用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中高通量克隆和鉴定了 82个猪TCRβ基因(简称STB).测序分析表明，克隆的猪TCRβ链的基因都含有可变的信号肽区和V区、高变的D区和J区以及恒定的C区的基因片段，绝大部分基因间的核苷酸序列组成都不完全相同，且具有十分复杂的多态性和多样性，基因间的同源性在36.6％～99.9％，这与TCRβ链的基本基因结构特征相一致.猪TCRβ基因的分子结构、遗传演化关系和归类分析发现，在同一类基因分子中其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区间的差异主要由V基因片段的多态性引起，而CDR3区的差异主要由其D、J基因片段的多样性造成.同时发现猪TCRβ与人类的遗传演化关系较近，大部分基因序列都能找到与人类对应的TRBV、TRBD、TRBJ基因片段，但又存在一定的差异性.这表明，猪TCRβ基因既有应对外界复杂微生物环境的免疫多样性分子遗传基础，也有物种间的相似性与特异性.

关键词：

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棘球蚴病防控技术的研究与应用

棘球蚴病防控技术的研究与应用

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：贾万忠闫鸿斌李立李文卉付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

(1)建立了棘球绦虫(蚴)病DNA-LAMP、多重PCR和PCR-RFLP方法等,为开展流行病学调查和创制DNA分子诊断制剂奠定了基础,初步解决了我国暂时因没有针对犬科动物多房棘球绦虫感染粪抗原检测试剂盒而无法开展对此棘球绦虫感染进行诊断与检测... 详细信息

(1)建立了棘球绦虫(蚴)病DNA-LAMP、多重PCR和PCR-RFLP方法等,为开展流行病学调查和创制DNA分子诊断制剂奠定了基础,初步解决了我国暂时因没有针对犬科动物多房棘球绦虫感染粪抗原检测试剂盒而无法开展对此棘球绦虫感染进行诊断与检测的困难。(2)建立了牛羊棘球蚴病血清学ELISA方法,研制出了相应的试剂盒,检出效果优于市场上现有的诊断试剂盒,增加了可选择的棘球蚴病诊断试剂的种类。(3)实现了棘球蚴病基因工程疫苗抗原EG95在毕赤酵母系统中的高效表达,目的蛋白的

关键词：棘球蚴病防控技术棘球绦虫感染研究与应用

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人工感染犬不同时间粪中细粒棘球绦虫相关蛋白质组分析

人工感染犬不同时间粪中细粒棘球绦虫相关蛋白质组分析

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：李双男闫鸿斌李立姚刚田文俊李文卉张念章吴燕涛付宝权贾万忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

【目的】对不同感染时间(0 d、16 d、21 d、25 d、30 d、34 d、40 d)犬粪便中细粒棘球绦虫蛋白质组进行分析,探明感染犬不同时期粪便中寄生虫蛋白的表达谱,挑选细粒棘球绦虫特异性蛋白,为建立犬细粒棘球绦虫感染粪抗原检测方法和进一步... 详细信息

【目的】对不同感染时间(0 d、16 d、21 d、25 d、30 d、34 d、40 d)犬粪便中细粒棘球绦虫蛋白质组进行分析,探明感染犬不同时期粪便中寄生虫蛋白的表达谱,挑选细粒棘球绦虫特异性蛋白,为建立犬细粒棘球绦虫感染粪抗原检测方法和进一步研究细粒棘球绦虫代谢过程及其生活机制提供依据。【方法】收集感染细粒棘球绦虫后不同时间的犬粪,分离和提取蛋白质,对蛋白质在胶内酶切后,通过QE的液质联用仪分析后进而进行生物信息

关键词：细粒棘球绦虫人工感染抗原检测方法

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多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核表达

多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶A催化亚基TmPKA-C基因的克隆及原核...

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第五届全国人畜共患病学术研讨会

作者：杨洋李文卉张念章李婷婷李立闫鸿斌贾万忠付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分... 详细信息

为鉴定多头带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基基因(TmPKA-C)作为诊断抗原的潜能,以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增TmPKA-C基因。将TmPKA-C基因片段连接至pET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western-blot和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,TmPKA-C基因开放阅读框的长度为1032 bp,编码343个氨基酸。TmPKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的大小约42 kDa。Western-blot

关键词：多头带绦虫 TmPKA-C 原核表达催化亚基

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猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和Vβ6真核表达载体的构建及共转染研究

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动物医学进展 2016年第10期37卷 34-40页

作者：王春燕陈国华何小兵曾爽贾怀杰房永祥冯园李守杰景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

本实验室前期研究发现猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和TCR Vβ6基因家族,为进一步研究其体外表达情况,应用RT-PCR从猪外周血单个核细胞中扩增其全长基因序列,并构建TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒,将其转染293T细胞... 详细信息

本实验室前期研究发现猪瘟病毒C株特异的TCR Vα5和TCR Vβ6基因家族,为进一步研究其体外表达情况,应用RT-PCR从猪外周血单个核细胞中扩增其全长基因序列,并构建TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒,将其转染293T细胞。结果显示,TCR Vα5和TCR Vβ6全长基因分别为816bp和945bp,双酶切和核酸序列测定证实TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP重组质粒构建正确;转染293T细胞24h后荧光显微镜下可以看到70%以上的细胞表达EGFP蛋白。此外,实时荧光定量PCR可检测到TCR Vα5和TCR Vβ6基因的表达,单独转染组和共同转染组Western blot均可检测到EGFP蛋白的表达,且蛋白杂交带强度相似。研究结果表明,CSFV-C株特异性的TCR Vα5-pIRES2-EGFP和TCR Vβ6-pIRES2-EGFP真核表达质粒可同时转染到293T细胞中,实现体外共表达。

关键词：猪瘟病毒C株 TCR Vα/Vβ基因脂质体转染增强绿色荧光蛋白

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口疮病毒B4R锚蛋白抑制细胞NF-κB信号通路的研究

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中国兽医科学 2016年第11期46卷 1412-1417页

作者：冯园贾怀杰何小兵成温玉陈国华王春燕何玉林景志忠桂林医学院微生物学教研室广西桂林541000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

为明确口疮病毒(ORFV)编码的B4R蛋白调节细胞N F-κB活化的作用,以ORFV ORF008基因编码的B4R蛋白为研究对象,构建真核表达载体p CM V-Flag008,转染293T细胞,首先,利用双荧光素酶报告基因系统分析B4R蛋白对NF-κB信号活化的调节作用;其次... 详细信息

为明确口疮病毒(ORFV)编码的B4R蛋白调节细胞N F-κB活化的作用,以ORFV ORF008基因编码的B4R蛋白为研究对象,构建真核表达载体p CM V-Flag008,转染293T细胞,首先,利用双荧光素酶报告基因系统分析B4R蛋白对NF-κB信号活化的调节作用;其次,采用W estern-blot检测B4R蛋白对NF-κB信号通路中NF-κB p65蛋白核移位和IκBα蛋白磷酸化水平的影响。结果显示,B4R蛋白对NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性有明显的抑制作用(P<0.05);B4R蛋白能阻止IκBα蛋白磷酸化降解过程而抑制细胞NF-κB p65蛋白核移位。由此可见,ORFV编码的B4R蛋白能抑制细胞NF-κB信号通路的活化。

关键词：口疮病毒 NF-κB ORF008基因 B4R蛋白

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