检索结果-内蒙古大学图书馆

华北农学报 2010年第5期25卷 28-32页

作者：刘新生王永录中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

以AF/72RNA为模板,反转录并扩增目的cDNA,然后与pGEM-T easy体连接并转化JM109菌株,提取的重组质粒用凝胶电泳、PCR和EcoRI酶切法鉴定。应用BIMAS生物学软件对AF/72株结构蛋白VP1的H-2Dd、H-2Kd、H-2Ld、A20限制性T细胞表位进行预测,并... 详细信息

以AF/72RNA为模板,反转录并扩增目的cDNA,然后与pGEM-T easy体连接并转化JM109菌株,提取的重组质粒用凝胶电泳、PCR和EcoRI酶切法鉴定。应用BIMAS生物学软件对AF/72株结构蛋白VP1的H-2Dd、H-2Kd、H-2Ld、A20限制性T细胞表位进行预测,并对不同限制性的T细胞表位进行对比。结果表明,口蹄疫AF/72株结构蛋白VP1长639bp,编码213个氨基酸。不同限制性的T细胞表位虽然不尽相同,但与已鉴定的T细胞表位相比较,它们之间也有一些类似的、并且可能是通用型的T细胞表位。本试验通过生物信息学方法预测AF/72结构蛋白VP1的T细胞表位,为进一步试验确定T细胞表位和口蹄疫病毒T细胞表位的研究提供了一种有效的方法。同时为口蹄疫病毒表位疫苗的设计提供有效地理论基础。

关键词：口蹄疫病毒 T细胞表位 VP1蛋白

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口蹄疫核酸疫苗研究进展

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中国人兽共患病学报 2010年第9期26卷 874-878页

作者：王刚潘丽张永光中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

口蹄疫(Foot-and-mouth-disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth-disease virus,FMDV)引起的危害严重的家畜传染病之一。由于传统疫苗的安全性、免疫保护期短、多次免疫、血清型间无交叉保护效应,感染与免疫难以区分等缺点。因而,[... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-mouth-disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth-disease virus,FMDV)引起的危害严重的家畜传染病之一。由于传统疫苗的安全性、免疫保护期短、多次免疫、血清型间无交叉保护效应,感染与免疫难以区分等缺点。因而,[第一段]

关键词：口蹄疫病毒核酸疫苗免疫保护传统疫苗保护效应传染病安全性血清型

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热休克蛋白免疫学效应与应用研究进展

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中国人兽共患病学报 2010年第6期26卷 587-591页

作者：王景锋邵军军常惠芸郝峰强中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

热休克蛋白(heat shock protein,HSP),又称应激蛋白(stress protein,SP),是一组广泛表达于原核和真核生物细胞中,在进化上高度保守的蛋白质。自从上个世纪70年代由美国学者Tissieres等发现以来,生物学界科学家对HSP的生物学功能进行了... 详细信息

热休克蛋白(heat shock protein,HSP),又称应激蛋白(stress protein,SP),是一组广泛表达于原核和真核生物细胞中,在进化上高度保守的蛋白质。自从上个世纪70年代由美国学者Tissieres等发现以来,生物学界科学家对HSP的生物学功能进行了广泛深入研究。人们发现,HSP的生物学功能广泛.主要表现在:①HSP在应激条件下维持细胞内必需蛋白质的空间构象,从而保护细胞生命活动,[第一段]

关键词：热休克蛋白免疫学效应 protein 真核生物细胞生物学功能应用 HSP 应激蛋白

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O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达

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华北农学报 2010年第5期25卷 11-15页

作者：吴国华张强颜新敏侯俊玲赵志荀崔力凡李健朱海霞朱彩珠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

为了构建O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A。重组... 详细信息

为了构建O型FMDVP1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A。重组表达质粒鉴定后,在脂质体介导下转染BHK-21细胞,用RT-PCR和直接免疫荧光试验分别检测P1-2A和IFN-γ在BHK-21细胞中的表达。RT-PCR检测显示,重组表达质粒转染细胞后P1-2A和IFN-γ基因成功转录出mRNA;免疫荧光试验表明目的基因在BHK-21细胞中获得了表达。结果证明,本研究成功构建了重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A并在体外进行了表达,这为研制抗FMDVDNA疫苗和IFN-γ的佐剂作用奠定了坚实基础。

关键词： FMDV P1—2A基因 IFN-γ基因共表达

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RNAi实现方法及在免疫相关基因功能鉴定中的应用

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中国人兽共患病学报 2010年第11期26卷 1067-1070页

作者：魏衍全田宏吴锦艳尚佑军刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过内、外源双链RNA触发的,由19—23bp小分子干扰RNA片段(siRNA)诱导的同源性mRNA的降解,从而使该基因表达沉默(gene silence)的过程。它是广泛存在于动、植物中的序列特异性转录后基因沉默,是生物体... 详细信息

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是通过内、外源双链RNA触发的,由19—23bp小分子干扰RNA片段(siRNA)诱导的同源性mRNA的降解,从而使该基因表达沉默(gene silence)的过程。它是广泛存在于动、植物中的序列特异性转录后基因沉默,是生物体在进化过程中,[第一段]

关键词：免疫相关基因功能鉴定 RNAi 转录后基因沉默 RNA干扰应用双链RNA RNA片段

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氯霉素和四环素阻碍细菌蛋白分泌研究进展

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中国生物工程杂志 2010年第7期30卷 97-100页

作者：吴琼靳野郑海学刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

氯霉素和四环素发挥活性的一个途径就是阻碍细菌蛋白质的分泌,其分泌功能是由其氨基端的信号序列决定的,该序列能将蛋白质引导到由SecY,E,G和A组成的转运蛋白复合体上。蛋白的转运还取决于融合蛋白的折叠特点,蛋白质转运到周质后的错误... 详细信息

氯霉素和四环素发挥活性的一个途径就是阻碍细菌蛋白质的分泌,其分泌功能是由其氨基端的信号序列决定的,该序列能将蛋白质引导到由SecY,E,G和A组成的转运蛋白复合体上。蛋白的转运还取决于融合蛋白的折叠特点,蛋白质转运到周质后的错误折叠可导致毒素聚集体形成,快速折叠还会使转运复合体发生拥堵,使所有的蛋白质分泌都受到抑制,导致细胞死亡。抗生素氯霉素和四环素处理细菌后会导致转运复合体中SecY的降解,造成致命的蛋白拥堵。现就抗生素氯霉素和四环素的干扰细菌蛋白质合成的作用机制以及导致SecY的降解来发挥阻碍细菌蛋白质分泌活性的一个新模式进行概述,以期为探讨新的靶向细菌的治疗方法提供科学依据。

关键词：分泌蛋白转运蛋白复合体蛋白折叠蛋白拥堵

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仔猪心肌原代细胞培养及其对口蹄疫病毒敏感性研究

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中国人兽共患病学报 2010年第10期26卷 912-915页

作者：王光祥尚佑军陈江涛吉艳红刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

目的旨在建立仔猪原代心肌细胞的培养方法,探索O型口蹄疫病毒对易感动物心肌原代细胞的敏感性,为研究O型口蹄疫感染引发幼畜心肌炎致病机理提供细胞模型。方法利用混合消化酶(2g/L胰蛋白酶(trypsin)和1g/LⅡ型胶原酶(collagenase)1∶1混... 详细信息

目的旨在建立仔猪原代心肌细胞的培养方法,探索O型口蹄疫病毒对易感动物心肌原代细胞的敏感性,为研究O型口蹄疫感染引发幼畜心肌炎致病机理提供细胞模型。方法利用混合消化酶(2g/L胰蛋白酶(trypsin)和1g/LⅡ型胶原酶(collagenase)1∶1混合)消化法培养原代心肌细胞;相差显微镜观察心肌细胞生长和波动情况;胎盘蓝对细胞染色,鉴定细胞成活率。将生长良好的原代心肌细胞接种口蹄疫O型乳鼠毒观察其敏感性,同时将该毒接种BHK21细胞做平行对比。结果仔猪原代细胞成活率为95.6%;成活细胞形态完整,部分细胞自行蠕动,当生长成片后可见呈岛屿状搏动。仔猪原代心肌细胞对O型口蹄疫病毒敏感。与BHK21细胞相比,结果无明显差异。结论本试验成功培养了仔猪心肌原代细胞,并且培养的原代细胞对O型口蹄疫病毒敏感。

关键词：猪心肌原代细胞培养 O型口蹄疫敏感性

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口蹄疫病毒与猪水泡病病毒入侵宿主细胞的内化机制研究进展

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中国人兽共患病学报 2010年第11期26卷 1075-1077,1082页

作者：吉艳红刘艳红刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是猪、牛、羊等偶蹄动物的一种高度接触性传染病,其临床表现以口鼻腔粘膜、蹄部等出现水泡或溃烂为特征,与猪水泡病(swine vesicular disease,SVD)极其相似,常以流行形式发病,对养猪业的危害较大。由... 详细信息

口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是猪、牛、羊等偶蹄动物的一种高度接触性传染病,其临床表现以口鼻腔粘膜、蹄部等出现水泡或溃烂为特征,与猪水泡病(swine vesicular disease,SVD)极其相似,常以流行形式发病,对养猪业的危害较大。由于FMD和SVD在临床症状上很难区分,因此给FMD和SVD的诊断带来一定的困难。[第一段]

关键词：口蹄疫病毒养猪业水泡病宿主细胞病毒入侵内化口鼻腔粘膜临床表现

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羊传染性脓疱病毒湖北株的鉴定及分子特征分析

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畜牧兽医学报 2010年第9期41卷 1154-1157页

作者：张克山何继军尚佑军郭建宏郑海学田宏靳野刘永杰王光祥刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

为了确诊疑似羊传染性脓疱病例,分析羊传染性脓疱病毒(Orfvirus,ORFV)的分子特征,作者以湖北某羊场疑似传染性脓疱病料为对象,进行了电镜观察、病理切片染色、特异性目的基因扩增和序列测定及遗传进化关系分析。结果在电镜下观察到ORFV... 详细信息

为了确诊疑似羊传染性脓疱病例,分析羊传染性脓疱病毒(Orfvirus,ORFV)的分子特征,作者以湖北某羊场疑似传染性脓疱病料为对象,进行了电镜观察、病理切片染色、特异性目的基因扩增和序列测定及遗传进化关系分析。结果在电镜下观察到ORFV样粒子,切片HE染色可见有炎性细胞浸润,自病料中扩增出特异性目的ORFVB2L基因片段(GenBank序列号GU320351)。结果表明该病例为黑山羊传染性脓疱病毒引起,序列遗传进化分析表明该病毒和2007年分离于中国台湾的毒株(DQ904351)遗传关系最近,和印度2004到2005年分离于绵羊(DQ263306、DQ263305)、山羊(DQ263304、DQ263303)的ORFV同属于一个进化分支。本研究为ORFV分子流行病学研究积累了资料。

关键词：羊传染性脓疱病毒鉴定分子特征分析

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猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒结构蛋白的研究进展与应用

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中国农学通报 2010年第23期26卷 1-6页

作者：王猛刘永生张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)属于动脉炎病毒科的单股正义RNA病毒。病毒基因组共有15kb,编码RNA复制酶(ORF1a和ORF1b)、糖基化蛋白(GP2-GP5)、基膜蛋白M(ORF6)和核衣壳蛋白N(ORF7)。其中每一个PRRSV的结构蛋白在病毒的感染及免疫... 详细信息

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)属于动脉炎病毒科的单股正义RNA病毒。病毒基因组共有15kb,编码RNA复制酶(ORF1a和ORF1b)、糖基化蛋白(GP2-GP5)、基膜蛋白M(ORF6)和核衣壳蛋白N(ORF7)。其中每一个PRRSV的结构蛋白在病毒的感染及免疫原性等的作用均不相同。笔者对PRRSV结构蛋白最新的研究进展及应用进行综述。

关键词：糖基化蛋白免疫原性小结构蛋白异源二聚体

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