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中国毒理学会第十一次全国毒理学大会

作者：张贺超李准杨亚军刘希望李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药重点实验室甘肃农业大学动物医学院

目的截短侧耳素（Pleuromutilin）是一种具有独特的抗菌机制,对革兰氏阳性菌和支原体具有高度抑菌活性的二萜类抗生素,其抗菌特性有望使得截短侧耳素及其衍生物的开发成为抗生素研究的新热点。为了评价截短侧耳素衍生物PDC的临床前毒理... 详细信息

目的截短侧耳素（Pleuromutilin）是一种具有独特的抗菌机制,对革兰氏阳性菌和支原体具有高度抑菌活性的二萜类抗生素,其抗菌特性有望使得截短侧耳素及其衍生物的开发成为抗生素研究的新热点。为了评价截短侧耳素衍生物PDC的临床前毒理学,进行了其在大鼠体内的急性毒性试验和28天经口毒性试验。材料和方法依据《兽药急性毒性试验(LD测定)指导原则》进行PDC在大鼠体内的急性毒性试验,按照寇氏法进行设计,通过预试验和正式试验确定PDC在大鼠体内的LD。依据急性毒性试验结果和《兽药30天和90天喂养试验指导原则》进行PDC在大鼠体内的28天经口毒性试验,将大鼠按体重随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组雌雄各10只。对照组每天给予相同体积的空白溶剂,试验组每天灌胃高、中、低剂量的PDC,连续给药28天。试验期间进行日常观察,给药结束后进行血常规和血生化检测、脏器系数及病理检查。结果急性毒性试验结果表明,当高剂量组已达5000 mg/kg,实验动物死亡率为0/4,并且将动物数增至10只（雌、雄各半）,并重复两次试验后动物均未出现死亡,结束整个急性毒性试验,急性毒性试验(LD测定)结论为:截短侧耳素衍生物PDC的LD大于5000 mg/kg。28天经口毒性试验结果表明,在3000 mg/kg、1000 mg/kg、300 mg/kg试验剂量范围内,PDC对大鼠精神行为,食欲无影响;试验各组大鼠体重无显著差异;总采食量及日均增重无显著差异;与对照组脏器系数相比,给药组大鼠肝的脏器系数极显著增高;中、高剂量组大鼠胃的脏器系数极显著增高;PDC中、高剂量组血常规指标PLT与对照组相比显著增高,但均在正常值范围内;血生化指标中ALB、ALT、ALP、Urea、CK和T-Bil具有显著性统计学意义。结论截短侧耳素衍生物PDC安全性高,LD大于5000 mg/kg,属于实际无毒化合物。在试验剂量范围内,PDC对机体体重无显著影响;从血常规和饲料消耗变化来看,药物对机体不会造成炎症及贫血等影响;从脏器系数、血生化和病理检查来看,PDC的毒性靶器官可能为肝脏和肾脏。

关键词：截短侧耳素毒理学急性毒性经口毒性

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核受体在脂代谢紊乱引发肝、肾毒性中调控作用的研究进展

核受体在脂代谢紊乱引发肝、肾毒性中调控作用的研究进展

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中国毒理学会第十一次全国毒理学大会

作者：张治杰陶琦范丽萍李剑勇杨亚军中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药重点实验室甘肃农业大学动物医学院

核受体是依赖于配体激活的转录调节因子,在机体生长发育和多种代谢途径中发挥着极其重要的功能。然而核受体在天然配体或合成配体的作用下才能被激活,通过一系列复杂的调控机制来控制下游靶基因的表达,进而维持机体稳态。脂质代谢紊乱... 详细信息

核受体是依赖于配体激活的转录调节因子,在机体生长发育和多种代谢途径中发挥着极其重要的功能。然而核受体在天然配体或合成配体的作用下才能被激活,通过一系列复杂的调控机制来控制下游靶基因的表达,进而维持机体稳态。脂质代谢紊乱会导致重要脂肪酸异位沉积于肝脏和肾脏的各类细胞中,进而引起肝、肾毒性,参与急性或慢性的肝脏和肾脏的发生和发展。核受体的介入能够逆转这种状态,提示核受体可能是治疗脂质代谢紊乱性疾病的关键靶点。核受体能够被激素、胆汁酸、肠道细菌的次级代谢产物和药物等内、外源性物质激活,被激活的核受体通过与视黄醇X受体等形成异源二聚体复合物,进而调节机体的生理功能。核受体主要通过参与脂质的生成、脂肪酸的β氧化以及脂质转运等过程来调节脂质代谢,例如:过氧化物酶体增殖激活受体α和法尼醇X受体,可以通过激活固醇调节元件结合蛋白1c,或通过肝X受体信号通路的间接作用来调节肝脏脂肪的产生;过氧化物酶体增殖激活受体α,也会促进下游参与脂肪酸氧化的相关基因的表达,从而促进脂肪酸氧化;肝X受体通过调节ABC转运蛋白和载脂蛋白的表达,进而调控胆固醇的逆向转运。因此,核受体可通过调控脂质代谢相关基因的转录,来调节脂质代谢进程,进而缓解脂质代谢紊乱造成的肝脏毒性和肾脏毒性。核受体参与的脂质代谢调控是一个复杂的、多层次的交互网络,其被内源性或者外源性配体激活后,可以通过二聚化、竞争性结合、招募辅助转录因子以及自身结构的修饰化,来调节下游靶基因的转录。对核受体的深入研究,将会为治疗脂质代谢紊乱性疾病开辟新的解决思路与方案,而研发靶向核受体的小分子药物,将会推动解决脂质代谢紊乱性疾病的进程。

关键词：核受体性疾病代谢紊乱肾毒性

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奶牛乳腺炎5种病原菌多重PCR快速检测方法的建立与评价

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中国预防兽医学报 2021年第5期43卷 507-511,533页

作者：申纪饶王丹李新圃杨峰武小虎丁学智王胜义严作廷王旭荣李宏胜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为建立一种能同时快速检测多种奶牛乳腺炎致病菌的多重PCR检测方法,本研究以化脓隐秘杆菌ISR基因、无乳链球菌cfb基因、大肠杆菌phoA基因、副乳房链球菌23S rRNA基因和金黄色葡萄球菌nuc基因为靶基因,设计并合成了5对特异性引物,通过方... 详细信息

为建立一种能同时快速检测多种奶牛乳腺炎致病菌的多重PCR检测方法,本研究以化脓隐秘杆菌ISR基因、无乳链球菌cfb基因、大肠杆菌phoA基因、副乳房链球菌23S rRNA基因和金黄色葡萄球菌nuc基因为靶基因,设计并合成了5对特异性引物,通过方阵法对多重PCR反应体系及反应条件优化,建立了一种能快速检测5种病原菌的多重PCR方法。对各菌种随机组合后利用该多重PCR方法检测,结果显示,该方法能同时快速检测奶牛乳腺炎乳样中5种主要病原菌,而其他病原菌则呈阴性结果,具有较强特异性。分别将化脓隐秘杆菌、无乳链球菌、大肠杆菌、副乳房链球菌、金黄色葡萄球菌菌液10倍倍比稀释后,利用建立的多重PCR方法进行检测,确定该方法敏感性,结果显示,该方法对5种病原菌最低检测浓度分别为:金黄色葡萄球菌6.25×10^(4)cfu/mL,大肠杆菌2.95×10^(6)cfu/mL,化脓隐秘杆菌2.95×10^(5)cfu/mL,副乳房链球菌4.3×10^(5)cfu/mL,无乳链球菌3.15×10^(5)cfu/mL。对临床送检及人工模拟的乳样检测结果显示该方法具有较好符合率及灵敏度。本研究首次建立了对包括副乳房链球菌在内的奶牛乳腺炎致病菌多重PCR检测方法,为快速检测奶牛乳腺炎病原菌提供了可行的技术手段。

关键词：奶牛乳腺炎病原菌引物反应条件多重PCR

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乳黄消口服液治疗奶牛乳房炎的临床疗效观察

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中国兽医杂志 2021年第1期57卷 87-91,96页

作者：白东东李新圃杨峰罗金印王旭荣张行李宏胜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为了观察乳黄消口服液治疗奶牛乳房炎的临床疗效,将符合纳入标准的40头患临床型乳房炎的病牛随机分为乳黄消口服液高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照药物组,每组10头,另从牛场随机挑选10头健康奶牛作为健康组。试验药物每天灌服1次,连... 详细信息

为了观察乳黄消口服液治疗奶牛乳房炎的临床疗效,将符合纳入标准的40头患临床型乳房炎的病牛随机分为乳黄消口服液高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照药物组,每组10头,另从牛场随机挑选10头健康奶牛作为健康组。试验药物每天灌服1次,连续3~5 d,健康组奶牛不做处理,统计观察临床治疗效果、治疗前后血常规、血液生化指标及乳汁体细胞数。结果表明,乳黄消口服液高、中、低剂量组治愈率分别为70%、90%和60%,对照药物公英散治愈率50%;乳黄消口服液高、中、低剂量组、对照药物组和健康组奶牛血常规和血液生化指标治疗前与治疗后差异均不显著(P>0.05);治愈后的奶牛乳汁体细胞数与治疗前比较明显呈下降趋势,但3~5 d未能下降到20万/mL左右,治愈后第30天乳黄消口服液高、中、低剂量组所有奶牛乳汁体细胞数均降到20万/mL,与健康组奶牛乳汁中体细胞数无显著性差异(P>0.05)。表明乳黄消口服液各剂量组对奶牛乳房炎的临床疗效均好于对照药物组,且中剂量组临床疗效最佳。

关键词：乳黄消口服液奶牛乳房炎临床疗效体细胞数

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沙拉沙星环糊精包合物的制备与体外释放度研究

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动物医学进展 2021年第5期42卷 67-72页

作者：姜兴粲李冰张继瑜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为了制备沙拉沙星的新剂型,评价其体外释放度,采用响应面法优化沙拉沙星/β-环糊精包合物微囊的制备条件,用扫描电子显微镜(SEC)进行表征试验,对环糊精包合物微囊的粒径和释放度进行评价。响应面法优化后的参数为沙拉沙星和β-环糊精混... 详细信息

为了制备沙拉沙星的新剂型,评价其体外释放度,采用响应面法优化沙拉沙星/β-环糊精包合物微囊的制备条件,用扫描电子显微镜(SEC)进行表征试验,对环糊精包合物微囊的粒径和释放度进行评价。响应面法优化后的参数为沙拉沙星和β-环糊精混合液以300 r/min转速在50℃下搅拌4 h,粒径试验表明包合物粒径平均值为1.0μm。体外释放度试验表明,SAR/β-CD包合物在60 min后累积溶出度达到97%左右并保持稳定,物理混合物60 min后累积溶出度仅63%左右,SAR粉剂在60 min后累积溶出率仅74.4%左右。将沙拉沙星成功制备成一种新型包合物制剂,提高了药物的释放性质,对沙拉沙星的推广具有积极意义。

关键词：包合物响应面法释放度

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阿司匹林丁香酚酯对体外脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症反应的抑制效应

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畜牧兽医学报 2022年第11期53卷 4048-4057页

作者：刘旭潘寅川杨亚军刘希望马宁李剑勇河北农业大学动物医学院(中兽医学院)河北省兽医生物技术创新中心保定071000 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050

本文旨在研究阿司匹林丁香酚酯(aspirin eugenol ester,AEE)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)炎症反应的抑制作用及其潜在作用机制。LPS刺激RAW264.7细胞诱导其炎症模型,细胞分为对照组、LPS组、阿司匹... 详细信息

本文旨在研究阿司匹林丁香酚酯(aspirin eugenol ester,AEE)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)炎症反应的抑制作用及其潜在作用机制。LPS刺激RAW264.7细胞诱导其炎症模型,细胞分为对照组、LPS组、阿司匹林组(aspirin,Asp,150μmol·L^(-1))、丁香酚组(eugenol,Eug,150μmol·L^(-1))、AEE低(75μmol·L^(-1))、中(150μmol·L^(-1))、高剂量(300μmol·L^(-1))组。CCK-8法检测AEE对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞毒性;ELISA法检测各组细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α炎症因子的含量变化;RT-PCR法检测细胞中花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢通路关键酶PLA2、COX-2、COX-1、CYP450和5-LOX的mRNA表达量;分子对接研究Asp、Eug、AEE与AA代谢通路关键酶的相互作用。结果表明:1)CCK-8结果显示,AEE浓度在0~350μmol·L^(-1)时,对细胞无毒性;2)ELISA结果表明,与空白对照组比较,LPS组炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α表达极显著升高(P<0.01);经不同剂量的AEE处理能极显著降低炎症因子IL-1β、IL-8、TNF-α表达水平(P<0.01);在炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8中,与Asp和Eug组比较,等摩尔的AEE与其差别不显著(P>0.05),表明其抗炎效果相似;不同剂量的AEE在炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8之间差异不显著(P>0.05);3)RT-PCR结果表明,与空白对照组比较,LPS组中AA代谢通路关键酶表达极显著升高(P<0.01);经不同剂量的AEE处理能显著降低AA代谢通路关键酶的mRNA表达量(P<0.05);与Asp和Eug组比较,等摩尔量的AEE能够显著降低AA代谢通路关键酶PLA2的表达量(P<0.05);不同剂量的AEE在COX-1、COX-2、5-LOX和CYP450关键酶表达量之间差异不显著(P>0.05);4)分子对接结果显示,AEE与靶蛋白的结合能均低于-20.9 kJ,表明AEE与靶蛋白结合稳定且质量高,且AEE能够与PLA2、COX-2、COX-1、CYP450和5-LOX之间形成氢键。综上,AEE能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应,并且与前体化合物Asp和Eug抗炎作用相似,其可能通过AA代谢通路发挥抗炎作用。

关键词：阿司匹林丁香酚酯 RAW264.7细胞炎症分子对接

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甘肃部分奶牛场乳腺炎病原菌分离鉴定及凝固酶阴性葡萄球菌的药物敏感性研究

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中兽医医药杂志 2022年第6期41卷 13-18页

作者：申纪饶杨峰武小虎杨雅媛吕亚楠丁学智严作廷王旭荣李宏胜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室肃兰州730050

近年来由凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)引起的乳腺炎呈逐年增多趋势。本试验对引起甘肃部分奶牛场乳腺炎的病原菌进行分离鉴定,明确病原菌区系分布,并进一步研究CNS在体外对抗菌药和中兽药的敏感性。从甘肃省7个规模化奶牛场采集126份临床型... 详细信息

近年来由凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)引起的乳腺炎呈逐年增多趋势。本试验对引起甘肃部分奶牛场乳腺炎的病原菌进行分离鉴定,明确病原菌区系分布,并进一步研究CNS在体外对抗菌药和中兽药的敏感性。从甘肃省7个规模化奶牛场采集126份临床型乳腺炎乳样,进行细菌分离培养,经16S rDNA方法进行鉴定;选取20株分离鉴定的CNS,用赤芍、连翘、白芍、丹参4味中药和克林霉素、青霉素、苯唑西林等10种抗菌药物进行体外抑菌试验。结果表明,甘肃部分奶牛场乳腺炎细菌检出率为90.48%,其病原菌区系分布主要为大肠杆菌、无乳链球菌、CNS、金黄色葡萄球菌等,其中CNS检出率为20.57%。所有CNS菌株对赤芍表现高度敏感,大部分CNS菌株对白芍、丹参和连翘均表现为高度敏感(85.0%~100.0%)和中度敏感(10.0%),仅有1株CNS对丹参表现为不敏感。20株CNS对8种抗菌药均产生了不同程度的耐药性,耐药率为15.0%~60.0%,其中对青霉素、苯唑西林耐药严重,耐药率达45.0%~60.0%。说明CNS是引起甘肃部分奶牛场乳腺炎的主要病原菌之一,而且已产生不同程度的耐药性,在体外对赤芍、连翘、白芍等中药敏感。

关键词：奶牛乳腺炎病原菌分离鉴定凝固酶阴性葡萄球菌耐药性

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细菌生物被膜及其防控策略研究进展

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中兽医医药杂志 2024年第6期43卷 35-41页

作者：王玮玮魏小娟王清徐晶伊蓝坤陈旭周雅馨翟斌涛张继瑜白玉彬中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药重点实验室甘肃兰州730050 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056038

生物被膜是细菌在压力环境下形成的一种嵌在胞外聚合物基质中的多细胞三维聚集物,它的形成依赖于环境因素的变化。生物被膜结构的发展包括可逆附着、不可逆附着与早期结构发展、生物被膜成熟、细胞分散等4个主要阶段。生物被膜导致常规... 详细信息

生物被膜是细菌在压力环境下形成的一种嵌在胞外聚合物基质中的多细胞三维聚集物,它的形成依赖于环境因素的变化。生物被膜结构的发展包括可逆附着、不可逆附着与早期结构发展、生物被膜成熟、细胞分散等4个主要阶段。生物被膜导致常规抗生素难以渗透,使细菌对抗生素不再敏感。生物被膜的耐药机制有外排泵、群体感应等。了解生物被膜形成机制对成功防控生物被膜至关重要,目前的预防策略侧重于阻断生物被膜的形成过程,包括阻止细菌附着在底物上,阻止生物被膜基质的合成阶段,抑制群体感应信号级联以及中断细菌之间的通信等。治疗策略主要是控制和消除形成的生物被膜,方式包括噬菌体、抗菌肽、天然药物、纳米复合材料、光动力疗法、联合用药等。生物被膜的防控策略包括但不限于以上方法,未来的研究可能集中在提高这些方法的效率、纳米材料的临床应用可行性、拓宽噬菌体宿主谱、提高抗生物被膜制剂的稳定性、联合使用多种策略、新型的防控策略等多个方面。同时,进一步深入研究生物被膜的形成机制与调控机制,将为开发新的防控策略提供理论基础。

关键词：生物被膜耐药外排泵群体感应防控策略噬菌体抗菌肽

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五倍子颗粒止泻与抗炎镇痛作用研究

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中兽医医药杂志 2023年第4期42卷 13-20,F0002页

作者：郑笑红王玲严钰璋贺泂杰王胜义胡庭俊崔东安广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、农业农村部兽用药物创制重点实验室、甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为评估五倍子颗粒(Galla Chinensis granules,GCG)止泻、抗炎和镇痛的药效作用,通过番泻叶诱导小鼠腹泻模型,二甲苯诱导耳肿胀及角叉菜胶诱导足肿胀急性炎症模型,以及小鼠疼痛模型(热板法和扭体法)的构建,观察GCG对小鼠腹泻、胃肠运动... 详细信息

为评估五倍子颗粒(Galla Chinensis granules,GCG)止泻、抗炎和镇痛的药效作用,通过番泻叶诱导小鼠腹泻模型,二甲苯诱导耳肿胀及角叉菜胶诱导足肿胀急性炎症模型,以及小鼠疼痛模型(热板法和扭体法)的构建,观察GCG对小鼠腹泻、胃肠运动、炎症和痛觉反应的影响,并通过病理组织学及血清炎性细胞因子检测,进一步探究GCG的药效作用。结果表明,与模型组比较,GCG治疗组(50 mg/kg BW、100 mg/kg BW和200 mg/kg BW)对小鼠腹泻具有显著抑制作用(P<0.05),可极显著降低小鼠胃肠蠕动(P<0.01),且对小鼠耳肿胀及足肿胀具有显著抑制作用(P<0.05),极显著抑制醋酸引起的腹部收缩(P<0.01),其中,GCG治疗组(200 mg/kg BW和100 mg/kg BW)分别在给药后0.5 h和1.0 h开始延长小鼠热板试验中热刺激引起的疼痛反应时间(P<0.05),而GCG治疗组(50 mg/kg BW)只在4.0 h延长小鼠疼痛反应时间(P<0.05)。其次,GCG治疗组均可不同程度改善角叉菜胶引起的足病理变化,且GCG治疗组血清炎症因子TNF-α、PGE2及COX-2水平显著低于模型组(P<0.05)。综上,GCG止泻、抗炎及镇痛作用较为显著,对小鼠胃肠蠕动、腹泻及炎症反应具有抑制作用,且能够减轻小鼠疼痛反应,可为其临床应用提供依据。

关键词：五倍子腹泻肠蠕动炎症细胞因子

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天然植物精油在家禽生产上的应用

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家禽科学 2024年第1期46卷 39-43页

作者：牛彪刘宇金艮泸县农业农村局市场泸县646100 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 定西市安定区畜牧兽医局白碌畜牧兽医站甘肃定西743026

植物精油是一种从植物中提取的天然活性物质,具有抑菌、镇痛、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种功能,有成为抗生素替代物的潜力。当前,植物精油已广泛应用在家禽生产中来提高家禽生产性能和肠道健康。通过对天然植物精油作用机理及其在家禽... 详细信息

植物精油是一种从植物中提取的天然活性物质,具有抑菌、镇痛、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种功能,有成为抗生素替代物的潜力。当前,植物精油已广泛应用在家禽生产中来提高家禽生产性能和肠道健康。通过对天然植物精油作用机理及其在家禽生产中的应用进行综述,以期为植物精油的开发和应用提供参考。

关键词：植物精油作用机理家禽

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