检索结果-内蒙古大学图书馆

奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

动物医学进展 2024年第12期45卷 19-25页

作者：朱安基李世宏徐浩杨亚军白莉霞李剑勇许笑甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045

为建立检测奶牛乳房炎主要革兰氏阴性致病菌的快速诊断方法,选择大肠埃希氏菌phoa基因,肺炎克雷伯菌rcsa基因以及奇异变形杆菌urer基因设计合成特异性引物与探针,建立了奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man... 详细信息

为建立检测奶牛乳房炎主要革兰氏阴性致病菌的快速诊断方法,选择大肠埃希氏菌phoa基因,肺炎克雷伯菌rcsa基因以及奇异变形杆菌urer基因设计合成特异性引物与探针,建立了奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man荧光定量PCR检测方法。该方法可在120 min内通过一管反应体系特异性鉴定出3种常见的奶牛乳房炎革兰氏阴性致病菌,最低检测限可达1×10^(1)copies/μL且特异性和重复性良好,以此方法对80份奶牛乳房炎生乳样进行检测,大肠埃希氏菌检出率为35%(28/80),肺炎克雷伯菌检出率为21.2%(17/80),奇异变形杆菌检出率为11.2%(9/80)。结果表明,所建立的奶牛乳房炎大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌三重Taq Man荧光定量PCR检测方法具有操作简单、特异性强、灵敏度高的特点,适用于奶牛乳房炎的临床诊断,对革兰氏阴性致病菌的快速检测及合理用药具有指导意义。

关键词：奶牛乳房炎实时荧光定量PCR 大肠埃希氏菌肺炎克雷伯菌奇异变形杆菌

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大型奶牛养殖环境源大肠埃希菌毒力基因与系统进化分群

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1612-1619页

作者：唐敏嘉张雪婧何卓琳蒲万霞中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

对甘肃2个大型奶牛养殖环境的大肠埃希菌(Escherichia coli,***)分离株进行系统进化分群和毒力基因分布情况研究,分析系统群与***主要毒力基因之间的潜在关联,以期为***的研究和防治提供参考。利用PCR方法对281株***分离株进行系统进化... 详细信息

对甘肃2个大型奶牛养殖环境的大肠埃希菌(Escherichia coli,***)分离株进行系统进化分群和毒力基因分布情况研究,分析系统群与***主要毒力基因之间的潜在关联,以期为***的研究和防治提供参考。利用PCR方法对281株***分离株进行系统进化分群鉴定和毒力基因检测。281株***分离株被分为8个系统进化群,B1、A、E、F、D、C、B2群和隐支Ⅰ或Ⅱ的占比分别为51.96%,28.47%,11.39%,2.85%,1.78%,1.07%,0.71%,0.36%,有4株为未知系统群。毒力基因检测结果显示,ompA、ibeB、ompT、iroN、traT、iucD、fyuA和irp2的阳性率分别为100%,98.58%,76.16%,71.53%,68.33%,64.06%,30.96%,30.25%。不同年份和养殖环境的部分毒力基因的分布存在明显差异,携带8个所鉴定的毒力基因的菌株在B1、B2群和粪土源中的分布较多;traT在2017年的分布明显低于2018和2019年;traT和iroN在粪土源分离株中的分布高于污水源。系统群与毒力基因的关联性分析结果显示,A群与ompT和traT存在负相关性;B1群与ompT、irp2、fyuA和iucD存在正相关性;E群与irp2、fyuA和iucD存在负相关性,与iroN存在正相关性。系统进化分群以B1群为主,不同年份和养殖环境的部分毒力基因的分布有明显的差异;部分毒力基因的分布与系统群存在联系。

关键词：大肠埃希菌奶牛养殖环境毒力基因系统进化分群

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茶树精油对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的影响

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食品工业科技 2021年第14期42卷 107-112页

作者：程峰刘宇杨珍莫亚男尚若锋郝宝成王学红梁剑平中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

本文研究了茶树精油对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜的影响及其作用机制。首先测定了茶树精油对1株MRSA标准菌株及12株金黄色葡萄球菌分离菌株的MIC值为0.08%~0.32%。结晶紫半... 详细信息

本文研究了茶树精油对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)生物被膜的影响及其作用机制。首先测定了茶树精油对1株MRSA标准菌株及12株金黄色葡萄球菌分离菌株的MIC值为0.08%~0.32%。结晶紫半定量染色实验发现0.16%的茶树精油对MRSA生物被膜形成有抑制作用,结晶紫半定量染色实验和激光共聚焦显微镜发现0.32%的茶树精油可完全清除MRSA成熟的生物被膜,0.16%可明显破坏其生物被膜。抗生物被膜机制的初步探究发现茶树精油可以抑制MRSA生物被膜形成过程中多糖黏附素(polysaccharide intercellular adhesion,PIA)和胞外DNA(extracellular DNA,eDNA)的分泌以及物被膜形成相关基因agr、ica、cid、sar的表达。因此,茶树精油具有强大的抗生物被膜作用,可能机制是抑制其PIA的合成,eDNA的分泌以及生物被膜形成相关基因的表达。

关键词：茶树精油生物被膜结晶紫半定量法激光共聚焦显微镜多糖黏附素胞外DNA

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肺炎克雷伯菌耐药机制和毒力因子研究进展

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中兽医医药杂志 2024年第1期43卷 29-38页

作者：耿响刘希望李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

肺炎克雷伯菌是寄生于人和动物的皮肤、呼吸道、肠道等处的机会致病菌,具有较高的致病性,常引起呼吸系统、泌尿系统等感染,甚至出现败血症、脑炎等。肺炎克雷伯菌可分为经典肺炎克雷伯菌(cKP)与高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP),hvKP能导致更... 详细信息

肺炎克雷伯菌是寄生于人和动物的皮肤、呼吸道、肠道等处的机会致病菌,具有较高的致病性,常引起呼吸系统、泌尿系统等感染,甚至出现败血症、脑炎等。肺炎克雷伯菌可分为经典肺炎克雷伯菌(cKP)与高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP),hvKP能导致更严重、散播性更强的感染。目前,肺炎克雷伯菌的耐药性增强,耐药菌株的流行呈全球性和多样化的趋势,已引发关注。除了外排泵,肺炎克雷伯菌对抗菌药产生耐药性的机制有很多种,并且可以随着可移动遗传元件快速传播。本文详细阐述了肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、替加环素、多黏菌素等抗菌药物的耐药机制。肺炎克雷伯菌的毒力因子多样,包括荚膜、脂多糖、黏附素、PEG-344、铁载体(肠杆菌素、沙门菌素、耶尔森菌素、气杆菌素)、外膜蛋白等。目前,对肺炎克雷伯菌的致病性和耐药性的研究越来越深入,在治疗方面也不断推进,主要的策略包括老药新用、纳米化抗菌药、新型抗菌药研发、噬菌体疗法、抗体疗法等。对肺炎克雷伯菌耐药机制、毒力因子进行详细、全面的综述,可为肺炎克雷伯菌的防控和临床用药提供参考。肺炎克雷伯菌的生物学特性、精准诊断、与宿主不同组织细胞的互作机制、宿主免疫应答机制等方面仍需深入研究。

关键词：肺炎克雷伯菌耐药机制毒力因子荚膜铁载体生物被膜

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菊苣酸介导外泌体对巨噬细胞免疫抑制的影响

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中国畜牧兽医 2023年第10期50卷 4223-4230页

作者：白莉霞刘希望杨亚军秦哲李世宏葛闻博许笑冯晨婧李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050 天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300384

【目的】建立巨噬细胞免疫抑制模型,探究菊苣酸(cichoric acid,CA)对磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导巨噬细胞免疫抑制的作用及调控机制,为将CA开发为临床防治免疫抑制性疾病的新型药物提供理论依据。【方法】以巨噬细胞源性... 详细信息

【目的】建立巨噬细胞免疫抑制模型,探究菊苣酸(cichoric acid,CA)对磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导巨噬细胞免疫抑制的作用及调控机制,为将CA开发为临床防治免疫抑制性疾病的新型药物提供理论依据。【方法】以巨噬细胞源性外泌体为研究对象,采用ExoQuick免疫沉淀试剂盒提取外泌体,用透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)、纳米颗粒跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)、Western blotting鉴定外泌体形态、粒径大小与浓度,以及表面标志蛋白CD63、HSP90的表达。同时,采用浓度为3μmol/L的PM诱导巨噬细胞24 h,建立免疫抑制模型后,给予低、中、高剂量CA(25、50、100μmol/L)进行干预,通过CCK-8测定细胞活力、中性红检测细胞吞噬能力及NTA测定外泌体粒径大小与浓度,研究CA介导外泌体增强免疫的作用机制。【结果】提取的巨噬细胞源性外泌体杯状形态完整,粒径在30~200 nm之间,标志蛋白表达清晰,具有良好的生物活性。由CCK-8、中性红及NTA测定结果可见,CA在3.12~400μmol/L浓度范围内对巨噬细胞无毒性作用;与PM模型组相比,低、中、高剂量CA可极显著提高免疫抑制巨噬细胞活力及其吞噬能力(P<0.01),极显著促进外泌体的分泌(P<0.01)。【结论】本研究结果表明,CA可能通过调控巨噬细胞源性外泌体分泌,增强其细胞活力与吞噬能力激活巨噬细胞,揭示了CA增强免疫的潜在作用机理。

关键词：菊苣酸巨噬细胞外泌体磷酰胺氮芥免疫抑制

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羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂的添加剂量筛选及抑菌效力评价

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中国兽医杂志 2022年第9期58卷 88-92页

作者：张东辉路宁宁白玉彬董朕陈晨李冰张继瑜周绪正中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农村农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

为了筛选羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂的最适添加浓度,并对其进行抑菌效力评价,本试验依据2020版《中华人民共和国兽药典(二部)》抑菌效力检查法,通过对含不同浓度抑菌剂的羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的抑菌效果进行考察,筛选出... 详细信息

为了筛选羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂的最适添加浓度,并对其进行抑菌效力评价,本试验依据2020版《中华人民共和国兽药典(二部)》抑菌效力检查法,通过对含不同浓度抑菌剂的羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液的抑菌效果进行考察,筛选出最合适的抑菌剂添加浓度,并根据抑菌效力评价标准,评价混悬液是否满足抑菌要求,进而验证最佳抑菌剂添加剂量。结果显示,与不添加抑菌剂的羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液相比,在混悬液中添加0.020%的苯甲酸钠可以对5种微生物的生长产生良好的抑制作用,且为最低有效添加剂量,能达到“内服制剂、直肠给药制剂的抑菌效力判断标准”。结果表明,羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中抑菌剂苯甲酸钠的最佳添加剂量为0.020%。

关键词：羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液剂量筛选苯甲酸钠抑菌效力

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菊苣酸调节免疫系统作用机制的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2023年第9期 28-32页

作者：冯晨婧白莉霞李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050 天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384

菊苣酸又称二咖啡酒石酸,是一种咖啡酸衍生物,对免疫系统具有重要的调节作用,可以增强机体免疫、促进固有免疫和适应性免疫、提高免疫细胞功能、调控细胞因子与抗体、调节免疫器官生长发育。文章主要综述了菊苣酸调节免疫系统的作用机制... 详细信息

菊苣酸又称二咖啡酒石酸,是一种咖啡酸衍生物,对免疫系统具有重要的调节作用,可以增强机体免疫、促进固有免疫和适应性免疫、提高免疫细胞功能、调控细胞因子与抗体、调节免疫器官生长发育。文章主要综述了菊苣酸调节免疫系统的作用机制,以期为菊苣酸在兽医临床免疫方面的开发与应用提供参考。

关键词：菊苣酸免疫系统作用机制细胞因子抗体

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羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中苯甲酸钠含量的HPLC测定

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动物医学进展 2022年第4期43卷 43-46页

作者：张东辉陈玲玲陈晨白玉彬董朕李冰周绪正中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农村农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050

建立高效液相色谱法(HPLC)测定羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中防腐剂苯甲酸钠的含量。采用Agilent ZORBAX C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵水溶液∶甲醇=85∶15,流速为1.0 mL/min,检测波长为224 nm,进样量... 详细信息

建立高效液相色谱法(HPLC)测定羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中防腐剂苯甲酸钠的含量。采用Agilent ZORBAX C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵水溶液∶甲醇=85∶15,流速为1.0 mL/min,检测波长为224 nm,进样量为10μL,柱温为35℃。苯甲酸钠浓度在2.5μg/mL~25.0μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(R^(2)=1),平均回收率为95.90%,RSD为0.69%(n=9),苯甲酸钠的检测限为0.25μg/mL。结果表明,所建立的HPLC法操作简便,灵敏度高,结果准确可靠,可用于羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液中防腐剂苯甲酸钠含量的测定。

关键词：羟氯扎胺阿苯达唑复方混悬液苯甲酸钠高效液相色谱法含量测定

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基于数据挖掘的白头翁防治动物腹泻的应用分析

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中兽医医药杂志 2024年第2期43卷 42-48页

作者：范丽萍许笑陶琦刘希望李剑勇杨亚军中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药重点实验室甘肃兰州730050

通过文献计量学方法,以相关文献、专利、兽药信息等为基础,分析白头翁在动物疾病防治中的应用,挖掘白头翁的研究价值。结果表明,与白头翁相关的主要研究主题有腹泻防治、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等;白头翁被广泛用于猪、鸡、牛、羊、兔等... 详细信息

通过文献计量学方法,以相关文献、专利、兽药信息等为基础,分析白头翁在动物疾病防治中的应用,挖掘白头翁的研究价值。结果表明,与白头翁相关的主要研究主题有腹泻防治、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等;白头翁被广泛用于猪、鸡、牛、羊、兔等靶动物的疾病防治,以防治腹泻、抗菌、抗病毒、杀虫为主,适用于鸡、猪的白头翁相关中兽药复方制剂研究相对成熟,这些制剂主要用于治疗畜禽湿热泄泻/下痢,部分制剂专用于鸡球虫病、兔球虫病的防治。目前,关于白头翁的药理作用和活性成分也成为研究热点之一,白头翁具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗虫、抗氧化等药理作用,其活性成分以皂苷类为主,且白头翁皂苷B4最受关注。在兽医临床上,白头翁多以传统中兽药复方的形式用于动物疾病防治,但对于白头翁活性成分或复方的药理作用挖掘还不充分;关于其活性成分的应用研究尚不深入;除靶动物猪、鸡外,关于白头翁的其他畜禽兽用制剂相对缺乏。本文综合分析了白头翁在动物腹泻防治中的应用及研究情况,以期为其深入研究与新兽药创制提供参考。

关键词：白头翁腹泻猪鸡球虫白头翁皂苷B4

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抗血栓药研究进展

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中兽医医药杂志 2024年第4期43卷 32-39页

作者：陶琦冯基范丽萍杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药重点实验室甘肃兰州730050

血栓形成在生理性止血中有着至关重要的作用,能够及时减少血液流失,但病理性血栓将严重危害机体的健康。血小板来源于巨核细胞胞质的分割断裂,其活化后具有多种功能,如黏附、释放和聚集等功能,并参与凝血反应。血栓的形成虽被众多因素影... 详细信息

血栓形成在生理性止血中有着至关重要的作用,能够及时减少血液流失,但病理性血栓将严重危害机体的健康。血小板来源于巨核细胞胞质的分割断裂,其活化后具有多种功能,如黏附、释放和聚集等功能,并参与凝血反应。血栓的形成虽被众多因素影响,但其形成过程基本分为血小板的活化和凝血反应两步,其治疗药物主要分为抗血小板药物和抗凝血药物。目前,多种上市的抗血栓药物经相关受体、信号通路等各种途径抑制血栓的形成,有较好的临床效果,如阿司匹林、华法林等。但近年的研究与应用发现,多种抗血栓药物均存在一定的出血风险。近年来,随着宠物物质生活的不断提高,中老年伴侣动物的心血管疾病发病率呈逐年升高趋势。然而现阶段研究预防血栓形成的药物一般是用于人类,到目前为止,国内还没有宠物专用的预防血栓形成的药物上市。因此,开发新型有效的宠物专用预防血栓药物显得越发重要。本文总结现有抗血栓药的类型和作用机制,以期为宠物专用预防血栓药物的研发提供参考。

关键词：血栓形成血小板凝血因子凝血反应抗血小板药物抗凝血药物

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