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中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议

作者：张贺超葛闻博刘希望杨亚军李剑勇李世宏中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室

目的为评价乙酰氨基阿维菌素(Eprinomectin,EPR)长效注射液对靶动物肉牛的安全性,考察安全剂量范围,为临床安全使用提供依据,根据《兽药研究技术指导原则汇编(2022年)》、《畜禽用药物靶动物安全性试验指导原则》和《兽药临床试验质量... 详细信息

目的为评价乙酰氨基阿维菌素(Eprinomectin,EPR)长效注射液对靶动物肉牛的安全性,考察安全剂量范围,为临床安全使用提供依据,根据《兽药研究技术指导原则汇编(2022年)》、《畜禽用药物靶动物安全性试验指导原则》和《兽药临床试验质量管理规范》设计,开展了EPR长效注射液在靶动物肉牛上的安全性试验。材料与方法试验选择16头体重约为150kg的健康杂交肉牛,随机分为4个组,每组4头,公母各半,分别为1倍剂量组(1.0mg/kg·BW)、3倍剂量组(3.0mg/kg·BW)、5倍剂量组(5.0mg/kg·BW)和空白对照组。所有试验肉牛均隔离常规饲养管理,颈部皮下单次注射给药,空白对照组不给药。对受试肉牛在试验期间(D-7～D120)的临床表现(精神、行为状况等)、采食、局部给药部位、粪便等进行观察;对体温、脉搏、呼吸、采食量、体重等指标进行测量记录。在给药前D-1和给药后(D3、D28、D56、D84、D112)采集受试肉牛的尾静脉血,进行血液学和血生化检查。给药后D3和D120,对5倍剂量组和空白对照组试验肉牛按公母各屠宰50%,剖检观察心、肝、脾、肺、肾等有无病理变化,计算脏器系数,对主要器官进行组织病理学检查。结果EPR长效注射液对靶动物肉牛的临床表现、粪便和饮食无明显影响,各剂量给药组受试肉牛的体温、脉搏、呼吸频次、体重与空白对照组无显著差异(P>0.05);血液学检测结果显示,各剂量给药组受试肉牛的红细胞总数、白细胞总数、白细胞分类和血红蛋白等参数与空白对照组相比,无剂量依赖性显著差异(P>0.05);血生化测试结果显示,各剂量给药组受试肉牛的ALT、AST、ALP、TP、ALB、UA、CR、TBiL、GLU、LDH、CK等指标与空白对照组相比,无剂量依赖性显著差异(P>0.05);剖检结果显示,5倍剂量组和空白对照组试验肉牛的主要脏器心、肝、脾、肺、肾无肉眼可见的损伤和病变,脏器系数与空白对照组无显著差异(P>0.05);病理组织学检查结果显示,5倍剂量组和空白对照组试验肉牛的主要脏器心、肝、脾、肺、肾无明显的病理变化。结论试验结果表明,EPR长效注射液对靶动物肉牛皮下注射给药,即使按5倍推荐剂量单次给药,也无明显的毒副作用和不良反应。因此,EPR长效注射液在靶动物肉牛上按推荐剂量皮下注射给药是安全的。

关键词：乙酰氨基阿维菌素安全性评价血液学血生化组织病理学

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除虫脲在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性研究

除虫脲在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性研究

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中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议

作者：陶琦徐玉珍秦哲白莉霞刘希望李世宏杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

目的考察除虫脲(DFB)在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性,为合理开发DFB口服制剂提供试验依据。方法采用高效液相色谱法(HPLC),分别检测DFB与空白人工胃液(pH=1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH=6.8,不含酶)、人工胃液(pH=1.3,含... 详细信息

目的考察除虫脲(DFB)在人工胃/肠液和肠道菌群及生物样品中的稳定性,为合理开发DFB口服制剂提供试验依据。方法采用高效液相色谱法(HPLC),分别检测DFB与空白人工胃液(pH=1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH=6.8,不含酶)、人工胃液(pH=1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH=6.8,含胰蛋白酶)、SD大鼠(雄性)肠道菌群或生物样品分别共孵育不同时间后,检测DFB的含量变化。结果结果表明,DFB在空白人工胃液和人工胃液中孵育0-2h剩余百分比基本没有发生变化,之后随着时间的增加,剩余百分比略有下降,但剩余百分比都在90%以上,总体呈现稳定的趋势。在空白人工肠液中孵育,剩余百分比随着时间增加显著下降,孵育6 h后剩余百分比为82.97%;在人工肠液中孵育6 h,DFB的剩余百分比为77.41%。DFB在SD大鼠肠道菌群中孵育12 h发生了部分降解,但DFB的剩余百分比在90%以上,总体成稳定的趋势。DFB在肝、胃、大肠等生物样品中孵育6 h后,DFB的剩余百分比均在90%以上;而在小肠生物样品中孵育6 h后DFB的剩余百分比为84.06%。结论综上所述,DFB在空白胃液、人工胃液、生物样品、SD大鼠肠道菌群有一定程度的降解,但总体呈稳定的趋势;但在空白人工肠液、人工肠液及小肠生物样品中可以发生较为明显的降解。

关键词：除虫脲人工胃液人工肠液肠道菌群生物样品稳定性

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阿司匹林丁香酚促进胆汁酸代谢的作用机理研究

阿司匹林丁香酚促进胆汁酸代谢的作用机理研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：杨亚军路晓荣李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

引言胆固醇是细胞膜的主要成分之一,还是合成胆汁酸(BAs)的底物。机体内过多的胆固醇所导致的高脂血症,是动脉粥样硬化和心脑血管疾病的首要危险因子。机体无法直接分解胆固醇,但可在肝脏内将其代谢为BAs。体内胆固醇稳态的维持,包括胆...

引言胆固醇是细胞膜的主要成分之一,还是合成胆汁酸(BAs)的底物。机体内过多的胆固醇所导致的高脂血症,是动脉粥样硬化和心脑血管疾病的首要危险因子。机体无法直接分解胆固醇,但可在肝脏内将其代谢为BAs。体内胆固醇稳态的维持,包括胆固醇摄入、从头合成、代谢为BAs、BAs肠肝循环,以及BAs经肠道排泄等环节;其中,生成BAs是胆固醇代谢的主要去路。前期研究表明,阿司匹林丁香酚酯(AEE)具有确切的降血脂作用,可显著改善模型动物的总胆固醇、低密度脂蛋白等血脂指标。

关键词：

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乙酰氨基阿维菌素长效注射液在靶动物牛体内的生物等效性研究

乙酰氨基阿维菌素长效注射液在靶动物牛体内的生物等效性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：张贺超刘希望李世宏杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室

引言乙酰氨基阿维菌素(eprinomectin,EPR)又称埃普利诺菌素,是由美国Merck公司于1997年开发出的大环内酯类体内外杀虫剂,是高效、广谱、低残留的新一代兽用抗寄生虫药物,对寄生于家畜体内外的绝大多数线虫和节肢动物的幼虫、成虫有效。...

引言乙酰氨基阿维菌素(eprinomectin,EPR)又称埃普利诺菌素,是由美国Merck公司于1997年开发出的大环内酯类体内外杀虫剂,是高效、广谱、低残留的新一代兽用抗寄生虫药物,对寄生于家畜体内外的绝大多数线虫和节肢动物的幼虫、成虫有效。为了明确自制的受试制剂乙酰氨基阿维菌素长效注射液,与参比制剂在靶动物牛体内的生物等效性,依据《兽用化学药品生物等效性试验指导原则》制定了试验方案,采用平行设计,以血药浓度法评价了两种制剂在72头健康肉牛体内的生物等效性。

关键词：

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盐酸恩诺沙星颗粒对猪自然感染细菌性呼吸道疾病的治疗试验研究

盐酸恩诺沙星颗粒对猪自然感染细菌性呼吸道疾病的治疗试验研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：李江何源张继瑜周绪正姚学强周凯仁中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室

(目的)本试验旨在研判盐酸恩诺沙星颗粒对猪自然感染细菌性呼吸道疾病的治疗效果,确定合理高效的治疗剂量。(方法)试验通过细菌分离培养、临床诊断与病理剖检判断并遴选出150只自然感染细菌性呼吸道疾病的杜长大三元杂交猪,随机分为5组...

(目的)本试验旨在研判盐酸恩诺沙星颗粒对猪自然感染细菌性呼吸道疾病的治疗效果,确定合理高效的治疗剂量。(方法)试验通过细菌分离培养、临床诊断与病理剖检判断并遴选出150只自然感染细菌性呼吸道疾病的杜长大三元杂交猪,随机分为5组,即高剂量组、中剂量组、低剂量组、药物对照组和阳性对照组,每组30只。分别对高、中、低剂量组中的所有实验猪按口服给药的方式给予10.0、7.5和5.0 mg/***的盐酸恩诺沙星颗粒,给药一次,严重病例与慢性呼吸道感染猪48 h后再给药一次,药物对照组给予延胡索酸泰妙菌素预混剂,87.5 g/1000 kg饲料混饲,连续给药10天,阳性对照组不给予任何药物。给药结束后所有组统一观察至第24日。于给药前(第0日)和给药后(第24日)采集各试验组猪的鼻拭子;通过比较各试验组猪的病原菌检出率、增重和治愈率,评价不同剂量的盐酸恩诺沙星颗粒对猪自然感染细菌性呼吸道疾病的治疗效果。(结果)结果显示,盐酸恩诺沙星颗粒可以有效地降低自然感染细菌性呼吸道疾病的猪的病死率,高、中、低剂量组治愈率分别为86.7%、83.3%、60.0%,阳性药物对照组治愈率为86.7%。盐酸恩诺沙星颗粒高、中剂量组与阳性药物对照组治疗效果相当,组间无显著性差异。(结论)以7.5 mg/***作为盐酸恩诺沙星颗粒临床推荐剂量,可以有效治疗由细菌引起的猪呼吸道疾病。

关键词：

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羟氯扎胺盐酸左旋咪唑复方混悬液在羊体内的对比药代动力学研究

羟氯扎胺盐酸左旋咪唑复方混悬液在羊体内的对比药代动力学研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：姚学强陈玲玲李江周凯仁张继瑜周绪正中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

[目的]本研究旨在研究羟氯扎胺盐酸左旋咪唑复方混悬液口服给药后在羊体内的药代动力学特征,为临床上确定药物合理的给药剂量和间隔时间,制定合理有效的给药方案提供依据。[方法]选取16只小尾寒羊,雌雄各半,体重在17～25 kg左右,在甘肃... 详细信息

[目的]本研究旨在研究羟氯扎胺盐酸左旋咪唑复方混悬液口服给药后在羊体内的药代动力学特征,为临床上确定药物合理的给药剂量和间隔时间,制定合理有效的给药方案提供依据。[方法]选取16只小尾寒羊,雌雄各半,体重在17～25 kg左右,在甘肃省临夏市永靖县太极镇瑞林科技有限公司养殖场常规饲养。采用LC-MS/MS方法用于复方混悬液与原研制剂在羊血浆中的对比药代动力学研究,分析了两种药物在羊体内药代动力学过程,为该药物的临床应用疗效提供数据支撑。[结果]本复方混悬液在羊血浆中的药时曲线为非房室模型,其中羟氯扎胺的最大血药浓度C为45.54±17.58μg/mL,达峰时间T为22.5 h,药时曲线下面积AUC为1845.43±851.92μg/mL·h,消除半衰期t为20.58±7.97 h;盐酸左旋咪唑的最大血药浓度C为2.25±0.90μg/mL,达峰时间T为0.49±0.69 h,药时曲线下面积AUC为9.51±2.20μg/mL·h,消除半衰期t为4.43±1.75 h。原研制剂羟氯扎胺的最大血药浓度C为34.60±5.65μg/mL,达峰时间T为15.50±3.96 h,药时曲线下面积AUC为1285.46±225.7μg/mL·h,消除半衰期t为23.12±5.04 h;盐酸左旋咪唑的最大血浆浓度C为2.41±1.11μg/mL,达峰时间T为0.81±0.66 h,药时曲线下面积AUC为9.09±2.12μg/mL·h,消除半衰期t为3.16±1.05 h。结果表明,在相同药物含量情况下,等剂量单次用药,复方混悬液比原研制剂的药时曲线下面积更大,达峰时间更快,达峰浓度更高,药物的生物利用度更高。

关键词：羟氯扎胺盐酸左旋咪唑复方混悬液药代动力学 LC-MS/MS 羊血浆

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阿司匹林丁香酚酯减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤，同时稳定血清代谢产物水平

阿司匹林丁香酚酯减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤，同时稳定血清...

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：陶琦杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

阿司匹林丁香酚酯(AEE)是由阿司匹林和丁香酚酯化而成的新型药物化合物。该药具有多种药理活性,如抗炎、解热、镇痛、抗氧化应激等。目的本研究旨在探讨AEE对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的影响,体外实验评价了AEE对LPS诱导的A... 详细信息

阿司匹林丁香酚酯(AEE)是由阿司匹林和丁香酚酯化而成的新型药物化合物。该药具有多种药理活性,如抗炎、解热、镇痛、抗氧化应激等。目的本研究旨在探讨AEE对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的影响,体外实验评价了AEE对LPS诱导的A549细胞的保护作用。材料和方法检测细胞上清液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β);Wistar大鼠随机分为5组(n=8):(1)对照组(2)模型组(LPS组)(3)LPS+AEE组(AEE,54 mg·kg-1)(4)LPS+AEE组(AEE,108 mg·kg-1)(5)LPS+AEE组(AEE,216 mg·kg-1);计算肺湿重与干重(W/D)比值及免疫器官指数;计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞,并测定总蛋白浓度;对肺组织进行苏木精-伊红(HE)染色;检测谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、抗氧化超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAOC)、乳酸脱氢酶(LDH)、C反应蛋白(CRP)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、TNF-α、IL-6、IL-1β活性。通过UPLC-QTOF-MS/MS对大鼠的血清进行代谢组学分析。结果从结果看,与LPS组相比,AEE改善了组织病理学变化,降低了MDA、CRP、MPO、MDA和MIF的产生,降低了BALF的WBC计数和总蛋白含量、促炎细胞因子水平、免疫器官指数和肺干湿重(W/D),增加了抗氧化酶活性,且呈剂量依赖性。血清代谢组学分析结果表明,LPS诱导的ALI能引起大鼠代谢紊乱和氧化应激,而AEE能在一定程度上改善该状态。结论因此,AEE可以通过调控异常炎性反应、减缓氧化应激、调节能量代谢等途径减轻LPS诱导的大鼠ALI。

关键词：阿司匹林丁香酚酯(AEE) 急性肺损伤炎症氧化应激代谢产物

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FLD抑制肺炎克雷伯菌生物被膜作用方式研究

FLD抑制肺炎克雷伯菌生物被膜作用方式研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十三次全国会员代表大会暨第十七次学术研讨会

作者：耿响刘希望李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室

引言肺炎克雷伯菌作为一种条件致病菌,能够形成生物被膜,增强了细菌的毒性和对抗生素的耐药性,对人类和动物的健康构成了严重的威胁。然而,生物被膜的形成和破坏的机制仍然难以捉摸。因此,我们研究FLD抑制肺炎克雷伯菌生物被膜的作用方...

引言肺炎克雷伯菌作为一种条件致病菌,能够形成生物被膜,增强了细菌的毒性和对抗生素的耐药性,对人类和动物的健康构成了严重的威胁。然而,生物被膜的形成和破坏的机制仍然难以捉摸。因此,我们研究FLD抑制肺炎克雷伯菌生物被膜的作用方式。材料与方法FLD (上海源叶生物科技有限公司);Alamar Blue (AB),0.1%结晶紫染色液(北京索莱宝科技有限公司);大蜡螟幼虫(天津慧裕德生物科技有限公司)。

关键词：

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IBC逆转肺炎克雷伯菌对黏菌素硫酸盐耐药性的作用方式

IBC逆转肺炎克雷伯菌对黏菌素硫酸盐耐药性的作用方式

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：耿响刘希望李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业农村部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室

目的试验通过研究异补骨脂查尔酮(Isobavachalcone,IBC)对耐黏菌素硫酸盐黏菌素硫酸盐(Colistin sulfate,CS)的肺炎克雷伯菌(KP2105)的生物被膜、膜稳定性、氧化应激及产H2S等方面的研究,探讨IBC对逆转肺炎克雷伯菌耐药性的作用机制。... 详细信息

目的试验通过研究异补骨脂查尔酮(Isobavachalcone,IBC)对耐黏菌素硫酸盐黏菌素硫酸盐(Colistin sulfate,CS)的肺炎克雷伯菌(KP2105)的生物被膜、膜稳定性、氧化应激及产H2S等方面的研究,探讨IBC对逆转肺炎克雷伯菌耐药性的作用机制。方法通过棋盘法验证IBC对CS的增敏作用,溶血性实验与细胞毒性考察IBC的安全性,结晶紫染色法检测IBC对肺炎克雷伯菌生物被膜生成的影响,膜完整性、膜流动性实验考察IBC对细胞膜的影响,用3,3′-二乙基氧杂羰花青碘检测IBC对内膜质子梯度的影响,采用增强型ATP检测试剂盒、BCECF-AM与DCFH-DA荧光探针确定IBC对细胞的氧化应激,使用醋酸铅试纸检测IBC对细菌产H2S产量的影响。结果棋盘法结果显示,IBC在8μg/mL时,可以将细菌对CS的MIC由>256μg/mL降至1μg/mL,并且IBC在≤128μg/mL时,没有明显的溶血性和细胞毒性;在0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC浓度时,有明显的降低生物被膜产生的作用;在含有0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC IBC的培养基孵育2 h后,细菌细胞膜随着IBC浓度的升高,呈现随浓度增高的细胞膜破裂与膜流动性降低的趋势;在0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC浓度处理下,呈现随浓度增高的对质子动力势的破坏趋势;在IBC与CS联合使用时,对内外细胞内外ATP均有随浓度而提升的提高趋势,并且联合使用的趋势比IBC单独使用情况下更明显;在0.5×MIC、1×MIC、2×MIC和4×MIC浓度处理下,能够明显抑制ΔpH的增高趋势和提高ROS的量,同时,随着IBC浓度的增加,细菌产H2S的量也随之增加。结论 IBC在8μg/mL时,可以将CS对肺炎克雷伯菌的MIC由>256μg/mL降低至1μg/mL,并且毒性较小。其增敏的作用机制可能为通过破坏细胞的膜稳态,降低膜的流动性,增加CS进入细胞的量。IBC进入细胞后,可以破坏质子动力势,增加细胞内外的ATP含量,同时抑制ΔpH增加,增强细胞的氧化应激,增多产H2S的量。

关键词：肺炎克雷伯菌 IBC 抗菌增敏耐药性

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乙酰氨基阿维菌素缓释注射剂中乙酰氨基阿维菌素含量与有关物质HPLC检测方法的建立

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中国畜牧兽医 2021年第12期48卷 4681-4689页

作者：耿响刘希望杨亚军李剑勇中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业农村部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050

试验旨在建立一种高效液相色谱检测方法,同时测定乙酰氨基阿维菌素(EPR)缓释注射剂的主成分与有关物质,采用外标法计算主成分的含量,采用自身对照法计算有关物质的含量。色谱柱为Phenomenex Luna 5μ-C8-100A 250 mm×4.60 mm,5μm... 详细信息

试验旨在建立一种高效液相色谱检测方法,同时测定乙酰氨基阿维菌素(EPR)缓释注射剂的主成分与有关物质,采用外标法计算主成分的含量,采用自身对照法计算有关物质的含量。色谱柱为Phenomenex Luna 5μ-C8-100A 250 mm×4.60 mm,5μm;色谱条件为:流动相为乙腈-0.1%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.5 mL/min,检测波长为245 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果表明,EPR缓释注射剂主成分与杂质分离度良好,B1a与B1b之间分离度>3;在EPR浓度为1.5625~1000μg/mL的范围内线性关系良好;EPR的检测限与定量限分别为0.01和0.34μg/mL,3种精密度的相对标准偏差(RSD)均<2%,稳定性的RSD为0.28%,加样回收率为102.54%,且RSD为3.14%(n=9)。耐用性试验表明,EPR缓释注射剂主成分的分离度均>1.5,理论塔板数>4500,表明该检测条件的耐用性良好。3批样品中,EPR缓释注射剂含量的平均值为102.60%,B1b占B1a与B1b之和的1.68%,总杂质的平均含量为2.57%。建立的EPR缓释注射剂中主成分含量与有关物质的测定方法具有简便、专属性强、灵敏度高、结果准确等特点,可用于EPR缓释注射剂的质量控制。

关键词：乙酰氨基阿维菌素(EPR) 高效液相色谱法含量测定有关物质

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