检索结果-内蒙古大学图书馆

猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段的表达、纯化及抗原性分析

中国兽医学报 2012年第2期32卷 231-237页

作者：郝宝成梁剑平兰喜刑小勇项海涛温峰琴胡永浩柳纪省中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药重点开放实验室甘肃省新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学学院甘肃兰州730070

根据已克隆的戊型肝炎病毒株swCH189株结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计套式引物,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2主要抗原基因片段,长度为728bp,将其克隆于PMD18-T载体,测序结果表明插... 详细信息

根据已克隆的戊型肝炎病毒株swCH189株结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计套式引物,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2主要抗原基因片段,长度为728bp,将其克隆于PMD18-T载体,测序结果表明插入的片段属于猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因ORF2部分;将该片段插入pet32a表达载体,经酶切、测序鉴定证实获得了带有目的基因的重组表达质粒。将重组质粒转化Rosetta菌,经0.3mmol/L IPTG诱导得到融合表达,得到相对分子质量为45 000的重组蛋白,以包涵体形式存在。Western blot分析表明,该蛋白可以与猪戊型肝炎阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性。并用SDS电泳切胶纯化和透析浓缩方法进行纯化,用纯化的蛋白免疫兔子,经每2周免疫1次,连续3次免疫后,对免疫组和对照组,分别在45,60,90d采血,每只兔子采集1份。用夹心ELISA法测定免疫血清抗体,结果表明免疫组在45d后均产生具有HEV抗原结合活性的抗体。本试验对猪swCH189株CP239基因的克隆和表达研究,为进一步研究结构蛋白基因ORF2的生物学功能奠定了基础。

关键词：猪戊型肝炎病毒 swCH189株克隆原核表达纯化抗原性分析

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环形泰勒虫suAT1基因的克隆及序列分析

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江苏农业科学 2011年第2期39卷 40-42页

作者：蔺红玲张继瑜袁莉刚魏小娟李冰甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业部兽用药物创制重点实验室/新兽药工程重点开放实验室甘肃兰州730050

以环形泰勒虫兰州株基因组为模板,经PCR扩增获得了suAT1的部分基因,将该基因克隆到pMD20-T载体,对重组质粒进行PCR和双酶切鉴定及序列测定。结果表明:该基因的长度为1 377 bp,编码了459个氨基酸。同源性分析结果显示:克隆序列与GenBank... 详细信息

以环形泰勒虫兰州株基因组为模板,经PCR扩增获得了suAT1的部分基因,将该基因克隆到pMD20-T载体,对重组质粒进行PCR和双酶切鉴定及序列测定。结果表明:该基因的长度为1 377 bp,编码了459个氨基酸。同源性分析结果显示:克隆序列与GenBank收录的环形泰勒虫参考核苷酸序列同源性为98.35%,氨基酸同源性为97.13%,说明环形泰勒虫兰州株的suAT1与GenBank上公布的序列同源性很高,进一步说明了suAT1基因存在很强的保守性。

关键词：环形泰勒虫 suAT1基因序列分析

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猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段原核表达条件的优化

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湖北农业科学 2011年第15期50卷 3116-3119页

作者：郝宝成梁剑平兰喜刑小勇项海涛温峰琴胡永浩柳纪省中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/新兽药重点开放实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点开放实验室/农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,... 详细信息

为了提高猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段在大肠杆菌中的表达量,研究了载体、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对衣壳蛋白基因CP239片段融合蛋白表达量的影响。结果表明,用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为0.3 mmol/L的IPTG在37℃、200r/min诱导培养4 h,pET32a-CP239融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-CP239融合蛋白的分子质量与预期大小一致,约为45.3 ku;Western blotting结果表明,pET32a-CP239融合蛋白可以与抗-HEV阳性血清发生特异性反应,并具有良好的反应原性,说明衣壳蛋白基因CP239片段蛋白得到正确表达。

关键词：猪戊型肝炎病毒衣壳蛋白 CP239片段原核表达

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复方茜草灌注液质量标准研究

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中兽医医药杂志 2011年第6期13卷 23-26页

作者：王学红王作信郭文柱刘宇郝宝成梁剑平中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点实验室中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室甘肃兰州730050 临夏州畜牧局

目的:制定复方茜草灌注液质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中的丹参、茜草、苦参进行鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量。结果:隐丹参酮的回归方程Y=1×106 X+744 462,r=0.999 5,平均回收率为98.5%,... 详细信息

目的:制定复方茜草灌注液质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中的丹参、茜草、苦参进行鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量。结果:隐丹参酮的回归方程Y=1×106 X+744 462,r=0.999 5,平均回收率为98.5%,RSD为1.61%。丹参酮ⅡA的回归方程Y=2×106 X+2×106,r=0.999 5,平均回收率为97.8%,RSD为2.05%。结论:建立的鉴别方法直观、简单、专属性强;含量测定方法准确、重现性好。可作为制定复方茜草灌注液质量标准的试验依据。

关键词：复方茜草灌注液丹参酮ⅡA 隐丹参酮薄层色谱高效液相色谱法

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细胞因子在奶牛乳房炎生物学防治中的应用

细胞因子在奶牛乳房炎生物学防治中的应用

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会

作者：王玲李宏胜陈炅然苗小楼王正兵郭天芬中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点开放实验室甘肃农业大学动物医学院

细胞因子可直接作为防治奶牛乳房炎的生物制剂或作为奶牛乳房炎疫苗的佐剂,也可与抗生素协同应用于奶牛乳房炎的治疗。随着奶牛细胞因子的相继克隆成功,通过基因工程技术大量生产重组奶牛细胞因子用于临床已经成为了可能。鉴于细胞因子... 详细信息

细胞因子可直接作为防治奶牛乳房炎的生物制剂或作为奶牛乳房炎疫苗的佐剂,也可与抗生素协同应用于奶牛乳房炎的治疗。随着奶牛细胞因子的相继克隆成功,通过基因工程技术大量生产重组奶牛细胞因子用于临床已经成为了可能。鉴于细胞因子对乳房免疫机能独特有效的操纵和调节,在奶牛乳房炎控制中具有一定独特优势,本文就细胞因子的生物学活性、作用机制和特点,重点对国内外应用奶牛重组细胞因子防治奶牛乳房炎进行了总结、分析,有望为控制奶牛乳房炎提供安全、有效、实用的生物学防治途径。

关键词：奶牛乳房炎重组细胞因子生物学防治

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细胞因子在奶牛乳房炎生物学防治中的应用

细胞因子在奶牛乳房炎生物学防治中的应用

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中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨年学术研讨会

作者：王玲李宏胜陈炅然苗小楼王正兵郭天芬中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室甘肃省新兽药工程重点开放实验室甘肃兰州 730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070

细胞因子可直接作为防治奶牛乳房炎的生物制剂或作为奶牛乳房炎疫苗的佐剂，也可与抗生素协同应用于奶牛乳房炎的治疗。随着奶牛细胞因子的相继克隆成功，通过基因工程技术大量生产重组奶牛细胞因子用于临床已经成为了可能。鉴于细胞因... 详细信息

细胞因子可直接作为防治奶牛乳房炎的生物制剂或作为奶牛乳房炎疫苗的佐剂，也可与抗生素协同应用于奶牛乳房炎的治疗。随着奶牛细胞因子的相继克隆成功，通过基因工程技术大量生产重组奶牛细胞因子用于临床已经成为了可能。鉴于细胞因子对乳房免疫机能独特有效的操纵和调节，在奶牛乳房炎控制中具有一定独特优势，本文就细胞因子的生物学活性、作用机制和特点，重点对国内外应用奶牛重组细胞因子防治奶牛乳房炎进行了总结、分析，有望为控制奶牛乳房炎提供安全、有效、实用的生物学防治途径。

关键词：奶牛乳房炎重组细胞因子生物学防治作用机制

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猪戊型肝炎病毒分子生物学与流行病学研究进展

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中国动物传染病学报 2010年第5期18卷 67-73页

作者：郝宝成兰喜刑小勇项海涛胡永浩柳纪省梁剑平中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点实验室兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis ... 详细信息

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis E,HE)的流行病学特点作一简要概述。

关键词：戊型肝炎病毒形态基因分型分子生物学特性流行病学

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猪戊型肝炎病毒分子生物学及流行病学研究进展

猪戊型肝炎病毒分子生物学及流行病学研究进展

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会（第三届中国兽药大会学术论坛）

作者：郝宝成兰喜柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点实验室

戊型肝炎病毒(HEV)是80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就戊型肝炎病毒(HEV)的形态、基因分型、分子生物学特性、我国HE的流行病学特点作一简要... 详细信息

戊型肝炎病毒(HEV)是80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就戊型肝炎病毒(HEV)的形态、基因分型、分子生物学特性、我国HE的流行病学特点作一简要概述。

关键词：戊型肝炎病毒形态基因分型分子生物学特性流行病学

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猪戊型肝炎病毒最新研究进展

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上海畜牧兽医通讯 2010年第5期 23-25页

作者：郝宝成兰喜梁剑平胡永浩刑小勇柳纪省中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程重点实验室甘肃兰州730050 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

戊型肝炎(Hepatitis E)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV)引起的以黄疸为主的急性病毒性肝炎[1,2].戊型肝炎主要经粪-口途径传播,有流行和散发两种形式.流行主要发生在亚洲、非洲、美洲等发展中国家,因水源被污染引起.散发则主... 详细信息

戊型肝炎(Hepatitis E)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV)引起的以黄疸为主的急性病毒性肝炎[1,2].戊型肝炎主要经粪-口途径传播,有流行和散发两种形式.流行主要发生在亚洲、非洲、美洲等发展中国家,因水源被污染引起.散发则主要发生在欧美一些发达国家.目前研究表明,戊型肝炎是一种人畜共患病.

关键词：戊型肝炎病毒病毒性肝炎发展中国家发达国家猪散发黄疸

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猪戊型肝炎病毒分子生物学及流行病学研究进展

猪戊型肝炎病毒分子生物学及流行病学研究进展

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中国畜牧兽医学会生物制品学分会、中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会暨第三届中国兽药大会

作者：郝宝成兰喜柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州 730046 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药工程中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部畜禽病毒学重点开放实验室，农业部草食动物疫病重点开放实验室甘肃兰州 730046

肝炎病毒(HEV)是80年代发现的又一新型肝炎病毒，近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展，本文就戊型肝炎病毒(HEV)的形态、基因分型、分子生物学特性、我国腿的流行病学特点作一简要概述。

关键词：

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