检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2011年第7期33卷 695-706页

作者：黄冬维储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

动物季节性发情繁殖涉及下丘脑-垂体-性腺轴系统复杂的神经内分泌过程,并受光照周期等环境因素的影响。褪黑激素则作为光周期信号分子调控动物季节性繁殖活动。近年来研究发现,对GnRH分泌有重要影响的Kiss1/GPR54系统既受褪黑激素的调... 详细信息

动物季节性发情繁殖涉及下丘脑-垂体-性腺轴系统复杂的神经内分泌过程,并受光照周期等环境因素的影响。褪黑激素则作为光周期信号分子调控动物季节性繁殖活动。近年来研究发现,对GnRH分泌有重要影响的Kiss1/GPR54系统既受褪黑激素的调控又受到性腺类固醇激素反馈调节,Kiss1/GPR54系统很可能是调控动物季节性繁殖的关键因子;同时动物季节性繁殖很可能还存在一条涉及TSH-DIO2/DIO3系统的逆向调控通路,该系统同样显著影响GnRH合成释放并受褪黑激素调控。文章就褪黑激素中心信号,特别是Kiss1/GPR54和TSH-DIO2/DIO3系统对繁殖季节性调控的最新研究进展进行综述。

关键词：季节性繁殖分子调控褪黑激素 Kiss1 促甲状腺素

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piggyBac转座子在牛基因组的整合位点及特征分析

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遗传 2013年第6期35卷 771-777页

作者：杜新华高雪张路培高会江李俊雅许尚忠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院肉牛研究中心农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

piggyBac(PB)转座子作为一种遗传工具被广泛应用于多个物种的转基因及插入突变研究,目前PB转座子在牛中的相关研究还较少。为了获得PB转座子在牛基因组中的整合位点,总结其转座特征,文章构建了PB[CMV-EGFP]和pcDNA-PBase二元转座系统,... 详细信息

piggyBac(PB)转座子作为一种遗传工具被广泛应用于多个物种的转基因及插入突变研究,目前PB转座子在牛中的相关研究还较少。为了获得PB转座子在牛基因组中的整合位点,总结其转座特征,文章构建了PB[CMV-EGFP]和pcDNA-PBase二元转座系统,利用细胞核电转技术共转染牛耳组织成纤维细胞,经G-418筛选,获得了稳定转染EGFP的转基因细胞系;提取细胞基因组DNA,利用基因组步移技术扩增PB转座子5′Bac区插入位置的DNA序列;通过与牛基因组序列进行BLAST比对,得到PB转座子在牛基因组中的插入位点。文章共获得了8个有效的整合位点,但仅有5个位点定位到染色体1、2、11和X染色体上。序列分析表明:在牛基因组中,PB转座子可特异性的插入到"TTAA"位置,并整合到基因间的非调控区;分析整合位点"TTAA"相邻一侧的5个碱基组成,发现PB转座子5′端倾向于插入到GC(62.5%)碱基富集区。该研究表明,PB转座子可以在牛基因组中发生转座,获得的整合位点信息为利用PB转座子在牛上开展遗传学研究提供了理论参考。

关键词： piggyBac 转基因牛基因组整合位点

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绵羊多胎主效基因Fec~B分子检测方法的建立与应用

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农业生物技术学报 2009年第1期17卷 52-58页

作者：储明星狄冉叶素成方丽刘忠慧彭志兰张跟喜贾立华孙洁冯涛中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室

Fec(BFec,fecundity;B,Booroola)是在布鲁拉美利奴(Booroola Merino)绵羊(Ovis aries)中发现的能增加排卵数和产羔数的一个常染色体突变基因,是在绵羊中识别出的第1个高繁殖力主效基因。建立了绵羊多胎主效基因FecB的PCR-RFLP和PCR-SSC... 详细信息

Fec(BFec,fecundity;B,Booroola)是在布鲁拉美利奴(Booroola Merino)绵羊(Ovis aries)中发现的能增加排卵数和产羔数的一个常染色体突变基因,是在绵羊中识别出的第1个高繁殖力主效基因。建立了绵羊多胎主效基因FecB的PCR-RFLP和PCR-SSCP检测方法,对小尾寒羊、湖羊、中国美利奴、东弗里生、杜泊、萨福克、特克塞尔、多赛特、考力代、德国肉用美利奴、南非肉用美利奴以及杂种羊共6 647只绵羊的检测结果表明,两种检测方法均能准确判型,稳定可靠性好,而且两种方法的检测结果完全一致。检测结果表明小尾寒羊和湖羊携带FecB突变(A746G),中国美利奴、东弗里生、杜泊、萨福克、特克塞尔、多赛特、考力代、德国肉用美利奴和南非肉用美利奴绵羊都不携带该突变。

关键词：绵羊繁殖力骨形态发生蛋白受体IB基因 FecB突变 PCR-RFLP PCR-SSCP

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小鼠卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响

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农业生物技术学报 2012年第4期20卷 411-419页

作者：任晶晶赵学明秦彤杜卫华郝海生刘岩王栋朱化彬中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽遗传资源与利用农业部重点开放实验室

本实验通过牛生发泡（GV）期无卵丘细胞卵母细胞-裸卵（denuded oocytes,DOs）与小鼠卵丘细胞（mouse cumulus cells,mCCs）共培养,研究异种mCCs对牛DOs体外成熟和孤雌激活后发育的影响,进而探讨卵丘细胞对卵母细胞的作用机制,为牛卵母... 详细信息

本实验通过牛生发泡（GV）期无卵丘细胞卵母细胞-裸卵（denuded oocytes,DOs）与小鼠卵丘细胞（mouse cumulus cells,mCCs）共培养,研究异种mCCs对牛DOs体外成熟和孤雌激活后发育的影响,进而探讨卵丘细胞对卵母细胞的作用机制,为牛卵母细胞体外成熟效率提高提供实验依据。牛卵母细胞分为COCs（cumulus-oocytes complexes）组、DOs+bCCs（bovine cumulus cells,bCCs）组、DOs+mCCs组和DOs组4个组合,体外成熟22;4h后,检测各组卵母细胞第一极体排出率、MⅡ期卵母细胞中谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量和孤雌激活后的发育能力,以及卵母细胞内骨形态发生蛋白15（BMP15）和生长分化因子9（GDF9）mRNA相对表达水平。结果表明:（1）DOs+mCCs组和DOs+bCCs组卵母细胞核成熟率[（68.48±5.71）%,（71.00±4.27）%]显著低于COCs组（84.70±3.41）%（P<0.05）,但均显著高于DOs组（54.26±5.03）%（P<0.05）;（2）DOs+mCCs组MⅡ卵母细胞GSH含量和孤雌激活囊胚率[（2.48±0.24）pmol/oocyte,（44.19±4.03）%]与DOs+bCCs组[（2.49±0.18）pmol/oocyte,（48.57±5.20）%]和DOs组[（2.40±0.17）pmol/oocyte,（43.47±7.34）%]之间没有差异,但分别显著低于COCs组[（9.67±0.18）pmol/oocyte,（59.93±6.13）%]（P<0.05）,各组孤雌激活卵裂率之间没有显著差异[（98.85±4.32）%,（92.11±2.00）%,（95.40±4.11）%,（93.18±3.19）%]（P>0.05）;（3）DOs+mCCs组、DOs+bCCs组和COCs组卵母细胞中BMP15和GDF9 mRNA相对表达水平均显著性高于DOs组（P<0.05）,其中,DOs+mCCs组和COCs组GDF9 mRNA相对表达水平显著高于DOs+bCCs组（P<0.05）。实验结果表明,mCCs能提高牛DOs的核成熟率及BMP15和GDF9 mRNA相对表达水平,但对牛DOs的细胞质成熟和MⅡ卵母细胞孤雌激活胚胎囊胚发育没有促进作用,说明卵丘细胞通过一些旁分泌因子促进卵母细胞核成熟,且这些因子的作用可能没有种属特异性。

关键词：牛小鼠卵丘细胞共培养体外成熟孤雌发育

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UCP2基因遗传多态性与西门塔尔牛生长相关性状的遗传效应分析

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畜牧兽医学报 2012年第5期43卷 708-716页

作者：陈翠张立敏陈晓杰刘喜冬张猛李姣袁峥嵘张路培高雪高会江李俊雅许尚忠中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

本研究旨在分析UCP2基因SNPs及其单倍型与肉牛饲料转化率和体尺等生长相关性状的相关性。以118头西门塔尔牛为试验材料,利用DNA池和PCR-RFLP方法检测UCP2基因G118A、C161T、C215G、C305T位点多态性,构建单倍型并与生长性状进行相关分析... 详细信息

本研究旨在分析UCP2基因SNPs及其单倍型与肉牛饲料转化率和体尺等生长相关性状的相关性。以118头西门塔尔牛为试验材料,利用DNA池和PCR-RFLP方法检测UCP2基因G118A、C161T、C215G、C305T位点多态性,构建单倍型并与生长性状进行相关分析。结果表明,G118A、C161T和C305T位点均与饲料转化率显著相关(P<0.05),其中杂合个体均值显著高于纯合个体且料肉比较高,而纯合个体之间差异不显著。位点C161T和C305T对胸围和腹围发挥主要影响作用,在差异显著表型性状中,TT基因型显著大于CC基因型个体。所构建的单倍型与单个SNP分析结果较为一致。综合考虑饲料转化率、平均日增体质量、胸围和腹围,建议将C161T和C305T位点的纯合个体TT基因型作为提高肉牛生长性状的候选分子标记。

关键词： UCP2 生长性状单倍型关联分析

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西门塔尔牛微卫星亲子鉴定体系的优化

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畜牧兽医学报 2013年第6期44卷 871-879页

作者：郭立平徐丽朱淼张路培高会江李俊雅许尚忠高雪中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

旨在优化西门塔尔牛亲子鉴定的微卫星标记组合,建立西门塔尔牛准确高效经济的亲子鉴定体系,以期为西门塔尔牛的遗传评估及育种提供科学依据。应用荧光引物和自动测序技术分析检测了内蒙古乌拉盖地区107头西门塔尔牛11个微卫星基因座的... 详细信息

旨在优化西门塔尔牛亲子鉴定的微卫星标记组合,建立西门塔尔牛准确高效经济的亲子鉴定体系,以期为西门塔尔牛的遗传评估及育种提供科学依据。应用荧光引物和自动测序技术分析检测了内蒙古乌拉盖地区107头西门塔尔牛11个微卫星基因座的遗传多态性,最终确定8个微卫星基因座为西门塔尔牛亲子鉴定的核心标记,并用似然法对验证群体10对父子和1个无关父亲牛亲子关系进行推断,检验该STR标记组合的亲子鉴定效力。结果表明:8个位点平均等位基因数为11.4、平均观察杂合度0.804、平均期望杂合度0.828、平均多态信息含量0.807;3种情况下的累计排除概率分别为:0.99、0.999 5和0.999 998。验证群体的鉴定结果与系谱一致,LOD值为9.29～14.66,且置信度均达到95%。该STR标记组合在西门塔尔牛中呈高度多态性,鉴定价值较高,在实现高效亲子鉴定的同时节省了鉴定成本。

关键词：微卫星标记亲子鉴定西门塔尔牛

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免疫磁珠纯化小鼠精原干细胞的研究

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中国生物工程杂志 2014年第7期34卷 38-43页

作者：贺亚南陈晓丽任晓霞郝海生秦彤赵学明路永强王栋中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 北京畜牧兽医总站北京10017

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)富集纯化是利用SSCs进行基因修饰新方法等研究的前提基础。采用免疫磁珠分选法,使用干细胞抗体CD90.2进行小鼠SSCs的纯化富集,并采用流式细胞分析法和定量PCR验证了磁珠分选效率。流式细胞... 详细信息

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)富集纯化是利用SSCs进行基因修饰新方法等研究的前提基础。采用免疫磁珠分选法,使用干细胞抗体CD90.2进行小鼠SSCs的纯化富集,并采用流式细胞分析法和定量PCR验证了磁珠分选效率。流式细胞分析结果:免疫磁珠分选后SSCs纯度为50.11%。荧光定量PCR检测结果:磁珠分选后支持细胞特异表达基因GATA4显著下调(6倍)、SSCs表达基因GFRα-1上调(6.5倍)、生殖干细胞特异表达基因OCT4极显著上调(5.9倍),3个基因相对表达量的变化说明,免疫磁珠分选效率为6倍。流式细胞分析法所产生的偏差可能是受到了未解离磁珠及SSCs本身转基因荧光的影响。

关键词：免疫磁珠分选流式细胞分析荧光定量PCR

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哺乳动物精子获能前后的理化变化及获能机制研究进展

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畜牧兽医学报 2013年第12期44卷 1867-1873页

作者：贺亚南朱化彬陈晓丽郝海生秦彤赵学明路永强王栋中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 北京畜牧兽医总站北京100107

综述了精子获能前后的运动轨迹和质膜微观结构的改变,及与之相伴的代谢类型、酶系活性和相关离子流动等一系列理化变化,并从胆固醇外流、活性氧产生、蛋白质磷酸化、膜电位极化等方面阐述了获能机理,同时指出,蛋白酪氨酸磷酸化是精子获... 详细信息

综述了精子获能前后的运动轨迹和质膜微观结构的改变,及与之相伴的代谢类型、酶系活性和相关离子流动等一系列理化变化,并从胆固醇外流、活性氧产生、蛋白质磷酸化、膜电位极化等方面阐述了获能机理,同时指出,蛋白酪氨酸磷酸化是精子获能的关键。提出应用转录组学、蛋白组学结合生物信息学等技术,研究获能过程胆固醇转运体的作用方式、胞外Ca2+对获能的影响、与质膜胆固醇流失相伴的膜外Ca2+、HCO-3内流顺序及其关系、与信号传导相关蛋白的酪氨酸磷酸化等重要获能事件,将为深入研究精子获能机制提供一定的理论参考。

关键词：精子获能蛋白酪氨酸磷酸化获能机制

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转appA-MxA基因猪PCR检测灵敏度及环境安全评价研究

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畜牧兽医学报 2014年第9期45卷 1399-1403页

作者：刘小丹辛磊磊樊俊华孔思远杨述林李奎中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

本试验旨在研究转appA-MxA基因猪中PCR检测外源基因的灵敏度及其通过粪便漂移到外界环境中的可能性。根据转基因猪目的基因植酸酶(appA)和抗粘液病毒(MxA)引物对不同浓度梯度的pcDNA-appA-MxA质粒进行PCR检测,评价常规PCR检测目的基因... 详细信息

本试验旨在研究转appA-MxA基因猪中PCR检测外源基因的灵敏度及其通过粪便漂移到外界环境中的可能性。根据转基因猪目的基因植酸酶(appA)和抗粘液病毒(MxA)引物对不同浓度梯度的pcDNA-appA-MxA质粒进行PCR检测,评价常规PCR检测目的基因的能力;对适宜浓度的粪便DNA进行PCR检测来评价转appAMxA基因猪外源基因是否经粪便漂移到环境中。PCR扩增结果表明,在10μL PCR体系中对CMV-appA和CMV-MxA基因检测的最低浓度分别为2.4×104和2.4×103拷贝·μL-1。克服粪便PCR抑制反应量的适宜转基因猪粪便DNA检测结果表明,其粪便DNA中不含任何外源基因。本试验结果表明,转appA-MxA基因猪体内的外源基因通过粪便漂移到外界环境中的概率极小,从一定程度上证明了转基因猪不存在环境安全问题。

关键词：转基因猪 PCR 粪便基因漂移环境安全

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绵羊微卫星BMS2508和FecB基因的多态及连锁分析

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遗传 2009年第5期31卷 500-507页

作者：李延璐储明星陈宏权方丽狄冉马月辉李奎安徽农业大学动物科技学院合肥230036 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

文章分析与绵羊高繁殖力主效基因FecB紧密连锁的微卫星座位BMS2508在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊)和低繁殖力绵羊品种(特克塞尔、多赛特和中国美利奴)中的遗传多态性,同时探讨该微卫星座位与小尾寒羊FecB基因的连锁不平衡关系。高繁殖力... 详细信息

文章分析与绵羊高繁殖力主效基因FecB紧密连锁的微卫星座位BMS2508在高繁殖力绵羊品种(小尾寒羊)和低繁殖力绵羊品种(特克塞尔、多赛特和中国美利奴)中的遗传多态性,同时探讨该微卫星座位与小尾寒羊FecB基因的连锁不平衡关系。高繁殖力品种小尾寒羊在骨形态发生蛋白受体IB(Bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB)基因编码序列第746位碱基处发生了与Booroola Merino绵羊相同的FecB突变(A746G),而在低繁殖力的特克塞尔、多赛特和中国美利奴绵羊中没有检测到该突变;小尾寒羊BB、B+、++的基因型频率分别为0.485、0.398和0.117。微卫星座位BMS2508在4个绵羊品种的438个个体中共检测到8个等位基因和15种基因型,最小等位基因为94 bp,最大等位基因为116 bp;小尾寒羊(n=307)、特克塞尔(n=45)、多赛特(n=46)、中国美利奴(n=40)和BB型(n=149)、B+型(n=122)、++型(n=36)小尾寒羊群体中优势等位基因分别是100 bp、94 bp、94 bp、112 bp、100 bp、100 bp、112 bp,其频率分别为0.453、0.544、0.802、0.475、0.483、0.439、0.389。连锁不平衡分析显示小尾寒羊FecB基因B等位基因与BMS2508微卫星座位100 bp等位基因之间存在一定的连锁不平衡(D′=0.408),而+等位基因与BMS2508微卫星座位110 bp和114b p等位基因均存在一定的连锁不平衡(D′=0.513)。

关键词：绵羊多羔性 FecB基因 BMS2508 连锁不平衡

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