检索结果-内蒙古大学图书馆

黑龙江畜牧兽医 2013年第8期 43-46,192页

作者：武永淑张海燕杨柳杨超李海超廉传江韩建林曲连东韩凌霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物研究室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030

为了研究屏障环境下小规模保存实验用巴马小型猪的遗传学背景,试验运用19个微卫星基因座,对长期在屏障环境下封闭饲养的同世代、同父本但不同母本的3窝巴马小型猪(BM/HVRI猪)进行分子群体遗传学检测,计算平均等位基因数(Na)、平均观察... 详细信息

为了研究屏障环境下小规模保存实验用巴马小型猪的遗传学背景,试验运用19个微卫星基因座,对长期在屏障环境下封闭饲养的同世代、同父本但不同母本的3窝巴马小型猪(BM/HVRI猪)进行分子群体遗传学检测,计算平均等位基因数(Na)、平均观察杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He),检验Hardy-Weinberg平衡并进行遗传分化分析。结果表明:该群体的Na、Ho和He分别为3.05±0.71,0.703 7±0.019 2和0.574 6±0.023 1,3窝仔猪的He分别为0.558 3±0.029 3,0.552 0±0.037 3和0.549 2±0.030 8,且差异不显著(P>0.05);经完全枚举法检验,A窝和C窝分别有3个和5个基因座偏离Hardy-Weinberg平衡;经U检验,A窝和C窝分别有4个和6个基因座存在杂合子过剩,仅C窝1个基因座表现出杂合子缺失现象。说明该猪群遗传多样性较低,处于低度杂合状态,窝系之间不存在遗传分化。

关键词：屏障环境实验用巴马小型猪遗传多样性

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东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析

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中国兽医科学 2013年第2期43卷 208-212页

作者：李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性... 详细信息

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%～99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%～98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%～90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。

关键词：野生鸟类 B亚群禽白血病流行病学调查序列分析

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我国东北地区野生鸟类A亚群禽白血病病毒分子流行病学调查及env基因序列分析

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中国预防兽医学报 2013年第3期35卷 245-247页

作者：杨波高玉龙高宏雷秦立廷刘婉思李德龙高奇曾祥伟王笑梅东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271000

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV... 详细信息

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV(ALV-A)的同源性最高,为91.1%～100%,而与已发表的鸡的B、C、D、E、J亚群ALV的gp85编码序列的同源性仅在28.0%～80.3%之间。遗传进化树分析也表明这两份ALV阳性样品的gp85编码序列属于ALV-A。本实验在我国野生鸟类群体中首次分离和鉴定出ALV-A,表明目前我国野生鸟类已经存在A亚群ALV的感染。

关键词：野生鸟类 A亚群禽白血病 gp85 序列分析

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牛支原体表面一种新的膜蛋白(P33)的特性研究

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中国预防兽医学报 2013年第4期35卷 255-258页

作者：邹晓辉李媛汪洋宋志强孙文静周玉梅白帆吴金迪刘素丽辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室/国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118

牛支原体(***)是牛支原体肺炎的病原体,能够引起犊牛肺炎等多种疾病。研究表明,牛支原体粘附蛋白可能在牛支原体致病过程中起关键作用。本研究选取了牛支原体的一个假定膜蛋白,对其基因进行PCR扩增,并连接到pET-28a载体,转化于大肠杆菌B... 详细信息

牛支原体(***)是牛支原体肺炎的病原体,能够引起犊牛肺炎等多种疾病。研究表明,牛支原体粘附蛋白可能在牛支原体致病过程中起关键作用。本研究选取了牛支原体的一个假定膜蛋白,对其基因进行PCR扩增,并连接到pET-28a载体,转化于大肠杆菌BL21(DE3)中,通过IPTG诱导获得了以可溶形式表达的重组蛋白,该重组蛋白大小约为36 ku,将其命名为P33。纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。重组蛋白与胎牛肺细胞(EBL)作用,通过激光共聚焦显微镜观察到了明显的粘附作用,而ELISA试验证明该蛋白的这种粘附为特异性粘附,从而证明该蛋白是牛支原体的一个粘附相关蛋白。

关键词：牛支原体原核表达 ELISA

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禽肠炎沙门氏菌Lon/CpxR双基因缺失株的构建及其特性研究

禽肠炎沙门氏菌Lon/CpxR双基因缺失株的构建及其特性研究

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：司微于申业陈利苹王秀梅张万江刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

禽沙门氏菌病是影响养鸡业的重要疾病之一,它够引起鸡腹泻病,严重影响生产性能,甚至引起死亡.相对于灭活疫苗,弱毒疫苗对预防肠炎沙门氏菌的肠道定殖和全身性感染有更好的效果.

关键词：

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携带cfr基因的猪源大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2序列分析

携带cfr基因的猪源大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2序列分析

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：张万江徐兴然王秀梅刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/细菌病研究室黑龙江哈尔滨 150001 西南大学重庆400715

[目的]获得cfr基因阳性大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2的全核酸序列,并分析cfr基因的遗传背景及新的传播方式.[方法]2010年从猪场分离到1株cfr基因阳性大肠杆菌,通过S1-PFGE、Southern杂交、接合转移试验、电击转化和质粒复制子分型等方法对p... 详细信息

[目的]获得cfr基因阳性大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2的全核酸序列,并分析cfr基因的遗传背景及新的传播方式.[方法]2010年从猪场分离到1株cfr基因阳性大肠杆菌,通过S1-PFGE、Southern杂交、接合转移试验、电击转化和质粒复制子分型等方法对pSCEC2质粒进行研究;同时采用454 GS-FLX测序仪对pSCEC2质粒进行序列全测定.[结果]最终获得一个全长为135,615 bp的pSCEC2,该质粒含有200编码大于100个氨基酸的开放阅读框.序列分析显示,pSCEC2质粒含有两个耐药基因簇,分别为floR耐药区和cfr耐药区.由cfr和两个转录方向相同的IS256插入元件组成的一个4.4 kb的片段,其中IS256被认为与cfr基因的转移有关.另一个耐药区包含floR、tet (A)-tetR、strA/strB和sul2耐药基因,该耐药基因簇在之前发现的其他IncA/C类型的质粒中都有发现.除了这2个耐药基因簇外,pSCEC2的质粒骨架和其他IncA/C类型的质粒骨架和核酸序列同源性＞99％.[结论]首次在宿主范围广、转移能力强以及稳定的IncA/C家族质粒中发现了多重耐药基因cfr,pSCEC2质粒将加速cfr基因的传播.cfr的基因环境分析表明,cfr基因两端各有一个完整的IS256插入元件,而且反向PCR也能得到由cfr和其中一个IS256组成的环状结构,这也再次提示IS256可介导cfr基因的移动.

关键词：恶唑烷酮耐药多重耐药食品源动物

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果子狸呼肠孤病毒结构的冷冻电镜三维重构

果子狸呼肠孤病毒结构的冷冻电镜三维重构

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中国畜牧兽医学会信息技术分会2013年学术研讨会

作者：孙伟邵昱昊杨崇文朱平王靖飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物疫病诊断与技术服务中心/禽病研究室哈尔滨150001 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物疫病诊断与技术服务中心/禽病研究室哈尔滨150001 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101

果子狸是一种低等哺乳动物,也是SARS等重要病原的宿主.本研究利用冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒三维重构技术获得了从果子狸中分离的呼肠孤病毒(MRV)MPC/04株的较高分辨率的三维结构.三维重构结果显示,果子狸呼肠孤病毒MPC/04株具有哺乳动物... 详细信息

果子狸是一种低等哺乳动物,也是SARS等重要病原的宿主.本研究利用冷冻电镜(cryo-EM)单颗粒三维重构技术获得了从果子狸中分离的呼肠孤病毒(MRV)MPC/04株的较高分辨率的三维结构.三维重构结果显示,果子狸呼肠孤病毒MPC/04株具有哺乳动物呼肠孤病毒典型的形态.该病毒由内外两层衣壳蛋白组成,呈二十面体对称结构.内衣壳的外面包裹着一层由200个μl3σ33异源六聚体复合物构成的外衣壳,三角形剖分函数T=13.同时我们还观察到了该病毒主要蛋白之间的连接方式.本研究为不同宿主的呼肠孤病毒的形态和结构比较研究提供了有益数据.

关键词：果子狸呼肠孤病毒冷冻电镜三维重构

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重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：刘丹王一平吴洪丽危艳武唐青海刘建波李胜斌魏萍刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学动物医学院

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核... 详细信息

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核苷酸(nt),由2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2)构成。PCV2-ORF2由702nt编码233个氨基酸(aa),Cap蛋白构成病毒核衣

关键词：亚单位疫苗 Cap Rep/Rep PCV 猪圆环病毒免疫保护性

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重组猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

重组猪圆环病毒2型Rep/Rep'和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：刘丹王一平吴洪丽危艳武唐青海刘建波李胜斌魏萍刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep和-rRep’蛋白及PCV2-rCap蛋白制备亚单位苗，同时利用PCV2全病毒制备的灭活苗，在相同条件下进行鼠体免疫攻毒试验，旨在比较各自的免疫原性和攻毒保护性。以PCV2-rRep和-rRep’蛋白亚单位疫苗免... 详细信息

本研究以重组杆状病毒表达的PCV2-rRep和-rRep’蛋白及PCV2-rCap蛋白制备亚单位苗，同时利用PCV2全病毒制备的灭活苗，在相同条件下进行鼠体免疫攻毒试验，旨在比较各自的免疫原性和攻毒保护性。以PCV2-rRep和-rRep’蛋白亚单位疫苗免疫应答结果表明，这2种复制酶蛋白均具有良好的免疫原性，能够诱导机体产生高水平的抗体滴度，但在鼠体攻毒模型中对PCV2感染无任何保护性，用各自的免疫血清进行的体外中和试验也证明这些抗体无中和病毒活性，研究证明PCV2-rRep和-rRep’蛋白不是病毒保护性抗体，其功能可能仅限于病毒复制。比较而言，PCV2-rCap亚单位疫苗和全病毒灭活苗均能够有效刺激机体产生较强的体液免疫反应，在攻毒后抗体滴度得到进一步提升，对免疫攻毒鼠体病毒载量检测显著低于攻毒对照组水平，表明Cap蛋白抗原在抗病毒感染过程中起关键作用。由此可见，PCV2疫苗都是Cap蛋白刺激机体产生的抗体起免疫保护作用，而且针对Cap蛋白的抗体具有中和活性。

关键词：猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫保护蛋白表达

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猪圆环病毒2型Rep′蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位分析

猪圆环病毒2型Rep′蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位分析

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：刘丹刘建波吴洪丽王一平危艳武唐青海李胜斌魏萍刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

背景猪圆环病毒2型(PCV2)基因组由单股负链闭合环状DNA构成,包含2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2),其中ORF1编码Rep蛋白,参与病毒的复制,是病毒的非结构蛋白;ORF2编码的Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白.PCV2-Rep蛋白编码基因全长945 ...

背景猪圆环病毒2型(PCV2)基因组由单股负链闭合环状DNA构成,包含2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2),其中ORF1编码Rep蛋白,参与病毒的复制,是病毒的非结构蛋白;ORF2编码的Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白.PCV2-Rep蛋白编码基因全长945 nt,含有314个氨基酸(aa),分子量为36ku,预测有3个潜在糖基化位点.在病毒复制过程中PCV2-ORF1转录本mRNA第417～799 nt处含有剪接位点,经剪接后产生一个截断的Rep′蛋白,其共编码178个aa,预测分子量为20.4 ku.由于剪接过程中Rep′蛋白C-末端阅读框发生移位,导致了Rep′与Rep蛋白第140位后C末端氨基酸序列完全不同.目前对Rep蛋白抗原表位分析报道较少.

关键词：

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