检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2009年第3期31卷 165-169页

作者：韩秀娥张萍王雪峰孔宪刚周建华相文华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江省乳品工业技术开发中心黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150001

为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜... 详细信息

为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9。将其转染驴胎皮肤细胞(FDD),通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性。结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性,电镜下见到典型的EIAV颗粒。

关键词：马传染性贫血病毒 N-连接糖基化定点突变感染性克隆

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马传染性贫血病毒基质蛋白p15单克隆抗体的制备

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中国预防兽医学报 2009年第9期31卷 730-733页

作者：张萍于在江韩秀娥王雪峰朱远茂周建华魏萍东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150001 兽医生物技术国家重点实验室／大动物病研究室、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江省乳品工业技术开发中心黑龙江哈尔滨150001

为制备抗马传染性贫病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组EIAV基质蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗EIAV基质蛋白p15抗体的杂交瘤细胞。应用重组p15和EIAV总蛋白为抗原建立的ELISA以及EIAV感... 详细信息

为制备抗马传染性贫病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组EIAV基质蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗EIAV基质蛋白p15抗体的杂交瘤细胞。应用重组p15和EIAV总蛋白为抗原建立的ELISA以及EIAV感染细胞的间接免疫荧光法,对杂交瘤细胞进行了有限稀释法筛选,获得了7株稳定分泌抗p15抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为:1F12、1E2、1E3、4B10、4H7、5E5、4G5。这些抗p15 MAb均能与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的相应蛋白结合。抗体效价叠加实验表明,这7株MAb中含有至少3种识别不同抗原决定簇的抗体。这些p15 MAb的获得有助于对EIAV和慢病毒的深入研究。

关键词：马传染性贫血病毒基质蛋白p15 单克隆抗体

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口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

口蹄疫病毒一个构象型中和表位的鉴定及相关研究

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：王海伟杨德成薛美于永忠赵磊李万于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚... 详细信息

@@口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的侵害偶蹄动物的最重要的传染病。为研究亚洲1型口蹄疫病毒江苏谱系Asia1/YS/CHA/05株抗原表位的性质，利用纯化的全病毒免疫BALB/c鼠制备了一株具有高度中和活性的单克隆抗体3E11，该单抗识别亚洲1型FMDV一个构象型中和表位。对3E11单抗逃逸病毒进行序列比对分析发现，VP1蛋白G1y144是单抗3E11识别的一个重要氨基酸，由此将该构象型中和表位定位于VP1蛋白的G1y144周围。

关键词：口蹄疫病毒构象型中和表位病毒鉴定单克隆抗体比对分析

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一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影响

一个非中和性表位关键氨基酸的改变对口蹄疫病毒中和表位活性的影...

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第八届全国病毒学学术研讨会

作者：杨德成于永忠于力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室大动物病研究室黑龙江哈尔滨 150001

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复... 详细信息

@@0型泛亚潜系口蹄疫病毒在上个世纪末大规模流行于亚、非、欧以及南美大陆，造成严重的经济损失，目前该病毒仍然在一些国家和地区流行。本研究用泛亚口蹄疫病毒反向遗传操作平台，对近20年间的泛亚口蹄疫病毒的抗原演化进行定点回复突变，进而将这些拯救的突变株与一系列泛亚口蹄疫病毒的单克隆抗体反应，发现P153Q突变病毒不能与单抗1F6(不具备中和活性)结合。

关键词：非中和性表位关键氨基酸口蹄疫病毒中和活性单克隆抗体反应定点回复突变

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牛分枝杆菌细胞壁相关蛋白表达及免疫原性分析

牛分枝杆菌细胞壁相关蛋白表达及免疫原性分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：亓英芳杜艳芬刘慧芳赫明雷司微倪洪波王春来刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的严重危害奶牛业的人畜共患病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,对人类的健康也造成了威胁.传统的BCG苗保护力低,因此研究更加特异准确的结核病新型诊断方法并加快新型疫苗的研... 详细信息

牛结核病是由牛分枝杆菌引起的严重危害奶牛业的人畜共患病,可以通过吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人,对人类的健康也造成了威胁.传统的BCG苗保护力低,因此研究更加特异准确的结核病新型诊断方法并加快新型疫苗的研制具有重要的实际意义与应用前景.外膜蛋白具有良好免疫原性,可加快巨噬细胞对抗原的递呈作用,激活淋巴细胞增殖反应,刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,从而抵抗同源菌和异源菌的攻击,而ompA是编码外膜蛋白抗原的重要基因之一.本实验应用PCR方法扩增出牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA(1041bp),采用DNA重组技术,将这个基因片段连接表达载体pGEX6p-1,并在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白ompA,用glutathioneSepharose 4B纯化蛋白.Western blot分析了两个重组蛋白的免疫学活性.结果本实验构建的重组质粒pGEX6p-1-ompA在大肠杆菌中得到高效表达,western-blot分析表明纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性,为结核分枝杆菌的准确诊断以及基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词：牛分枝杆菌 ompA 原核表达纯化 Western-blot 免疫原性

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我国牛腹泻性传染病的研究、调查和分析

我国牛腹泻性传染病的研究、调查和分析

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：于力中国农业科学院哈尔医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室

牛传染性腹泻病的病因复杂、是由一组病原导致的传染病,临床上以严重腹泻、脱水和高度死亡为特征,是严重制约我国养牛业发展的主要因素之一。这类病原体在肠道繁殖,引起肠绒毛萎缩和肠壁变薄,导致生长缓慢、饲料报酬下降,是目前我国奶... 详细信息

牛传染性腹泻病的病因复杂、是由一组病原导致的传染病,临床上以严重腹泻、脱水和高度死亡为特征,是严重制约我国养牛业发展的主要因素之一。这类病原体在肠道繁殖,引起肠绒毛萎缩和肠壁变薄,导致生长缓慢、饲料报酬下降,是目前我国奶牛淘汰率奇高的一类主要病因。引起牛腹泻的病原主要包括轮状病毒、冠状病毒、产毒素性大肠杆菌、副结核以及隐孢子虫和球虫感染。本文对我国主要养牛地区牛腹泻病流行的基本情况以及引起腹泻病的病因进行调查研究,并结合国内外的研究进行综合分析,进而描述我们有针对性地进行的疫苗和诊断方法研究进展,最后对有效控制我国牛群中腹泻性传染病的策略和目标提出了建议。

关键词：牛腹泻传染病

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比较蛋白组学分析两株不同基因型的结核分枝杆菌

比较蛋白组学分析两株不同基因型的结核分枝杆菌

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：亓英芳王春来刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳赫明雷司微尹录欧阳凤菊倪洪波中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室哈尔滨150001

本文应用双向电泳技术，对来源于同一牛群的这2株不同基因的结核分枝杆菌的胞内蛋白进行了分离，挑选了26个有表达差异的蛋白进行解析，利用串联质谱技术鉴定出21个差异蛋白。其中，15个蛋白与生物体的多个关键代谢过程有关，包括小分... 详细信息

本文应用双向电泳技术，对来源于同一牛群的这2株不同基因的结核分枝杆菌的胞内蛋白进行了分离，挑选了26个有表达差异的蛋白进行解析，利用串联质谱技术鉴定出21个差异蛋白。其中，15个蛋白与生物体的多个关键代谢过程有关，包括小分子代谢、大分子代谢和细胞进程相关等;另外的6个蛋白仍是假想蛋白或者功能未知蛋白。依据基因型的差异，从蛋白水平上揭示了2株结核分枝杆菌的蛋白表达情况，为进一步开展蛋白质的差异与毒力、代谢差异以及结核分枝杆菌跨越种群屏障的机理研究奠定基础。

关键词：结核分枝杆菌蛋白解析基因表达双向电泳技术比较蛋白组学

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几种中国鸡传染性支气管炎致弱毒株对流行毒株CK/CH/LDL/97Ⅰ保护作用的评价

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中国兽医学报 2009年第4期29卷 389-393页

作者：张晓楠王滨李成仁王钰刘乔然韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030 青岛市动物卫生监督所山东青岛266071 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319

选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110、tl/CH/LDT3/03 F120和1株同种毒株CK/CH/LDL97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,研究了CK... 详细信息

选择2株鸡传染性支气管炎异种致弱毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110、tl/CH/LDT3/03 F120和1株同种毒株CK/CH/LDL97ⅠF115,研究其对中国流行强毒株CK/CH/LDL97Ⅰ的保护效果。首先对不同毒株及参考毒株的S1基因进行比较和系统进化树分析,研究了CK/CH/LDL97Ⅰ与其他病毒的基因型关系。结果显示,CK/CH/LDL97Ⅰ属于有别于其他IBV毒株的一个独立的基因群。在此基础上,通过血清抗体检测、攻毒后发病率、死亡率、临床症状、病理变化观察以及气管和肾脏中病毒分离等方面研究了同种致弱毒株和异种致弱毒株对CK/CH/LDL97Ⅰ的免疫效力。结果显示,同种致弱毒株对CK/CH/LDL97Ⅰ强毒的攻击可提供100%的临床和病毒分泌的保护性。异种毒株tl/CH/LDT3/03 F120可提供100%的临床保护,但呼吸道病毒检出率达50%,表明对呼吸系统的保护效果不好。异种毒株CK/CH/LHLJ/04ⅤF110免疫组临床发病率为50%,气管样品病毒检出率为100%,可见临床和对病毒分泌的保护效果均较差。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因交叉保护同种异种

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仔猪常见肠道疾病的鉴别诊断与防制

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畜禽业 2009年第5期20卷 68-71页

作者：苗岚飞张振梅祝超姚贵哲李金敏崔尚金东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

新生仔猪的肠道疾病是限制养猪业养殖效率和经济收益最重要的因素之一。它主要是导致仔猪死亡率上升和饲料效率的降低，进而可能使生猪推迟上市．猪的质量下降。因此，此类疾病应引起足够重视。本文就仔猪常见肠道疾病的鉴别诊断与预防... 详细信息

新生仔猪的肠道疾病是限制养猪业养殖效率和经济收益最重要的因素之一。它主要是导致仔猪死亡率上升和饲料效率的降低，进而可能使生猪推迟上市．猪的质量下降。因此，此类疾病应引起足够重视。本文就仔猪常见肠道疾病的鉴别诊断与预防进行探讨和总结如下。

关键词：新生仔猪肠道疾病鉴别诊断防制经济收益养殖效率饲料效率养猪业

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胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：赵海玲刘慧芳杜艳芬司微王春来刘思国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001

本文根据胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针，建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测胎儿弯杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示，该方法检测胎儿弯... 详细信息

本文根据胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针，建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测胎儿弯杆菌的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示，该方法检测胎儿弯杆菌结果均为阳性，而非胎儿弯杆菌均为阴性;对带有SapA基因的阳性质粒的检测敏感性为108-102拷贝/μl范围内具有良好的线性关系，可敏感地检测到模板中13个拷贝的细菌DNA，其灵敏度是常规PCR方法的100倍。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。该方法为胎儿弯杆菌病的定性HE定量检测提供了有力的工具，为胎儿弯杆菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。

关键词：胎儿弯杆菌免疫学检验蛋白基因荧光PCR检测

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