检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2007年第6期29卷 448-452页

作者：李万周国辉杨增岐涂亚斌于力西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室黑龙江哈尔滨150001

用纯化的Asia1型口蹄疫病毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)筛选,有限稀释法克隆,获得了2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H6、5G3,其细胞培养上清效价分别为... 详细信息

用纯化的Asia1型口蹄疫病毒免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)筛选,有限稀释法克隆,获得了2株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H6、5G3,其细胞培养上清效价分别为1:64和1:128,小鼠腹水效价分别为1×10^(-4)和8×10^(-3);ELISA和IFA结果显示,2株单抗仅与Asial型口蹄疫病毒反应,不与O型口蹄疫病毒反应,表明它们均为抗Asial型口蹄疫病毒的型特异性单克隆抗体。westem blot结果显示,2株单克隆抗体均不与全病毒抗原反应,表明它们所针对的抗原表位均为构象表位。相加ELISA试验表明,两株单抗识别不同的抗原表位。经硫氰酸盐洗脱法测定,3H6和5G3的相对亲和力指数分别为1.0 mol/L和1.5 mol/L。这2株单抗的获得为建立口蹄疫病毒检测方法提供了强有力的工具。

关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪戊型肝炎诊断方法的研究进展

引用

中国预防兽医学报 2007年第12期29卷 981-984页

作者：曲娟娟于婧王滨于敏赵立平相文华李柱刚黑龙江省农业科学院生物技术研究所黑龙江省生物与家畜分子育种重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室青岛市动物卫生监督所山东青岛266071

戊型肝炎（Hepatitis E，HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis Evirus，HEV）感染引起的一种急性、自限性疾病，病毒经粪．口途径传播，其暴发和流行主要分布在发展中国家，常因饮用水被污染而引起，散发病例呈全球分布。1997年，发现了动... 详细信息

戊型肝炎（Hepatitis E，HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis Evirus，HEV）感染引起的一种急性、自限性疾病，病毒经粪．口途径传播，其暴发和流行主要分布在发展中国家，常因饮用水被污染而引起，散发病例呈全球分布。1997年，发现了动物源性的戊型肝炎病毒，随后，各发达国家及印度等国陆续都有猪HEV的相关报道，确定戊型肝炎为一种人畜共患病，并成为各国密切关注的公共卫生问题。最新研究结果表明人的戊型肝炎病毒的感染主要来源于猪。猪常常作为人类食物的重要来源和器官移植的供体，因此存在着普通人群、器官移植者及其家人、医务人员感染戊肝的风险。伏丽萍等对全国22个省、市、地区的血清学检测研究表明，几乎所有被检地区都或多或少存在猪戊型肝炎病毒（SHEV）的污染。

关键词：戊型肝炎病毒诊断方法猪公共卫生问题器官移植发展中国家人畜共患病血清学检测

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性喉气管炎病毒WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达

引用

中国预防兽医学报 2007年第6期29卷 417-422页

作者：木古丽王云峰侯绍华石星明王玫冉多良童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

根据传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列,分别与ILTV S... 详细信息

根据传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列,分别与ILTV SA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7%和99.1%,但与其它α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0%。对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTV WG株后第10 d～60 d内均能检测到ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出。鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTV WG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础。

关键词：传染性喉气管炎病毒 WG株 ICP4基因序列分析潜伏感染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

禽β-防御素的研究进展

引用

农业生物技术学报 2007年第2期15卷 341-345页

作者：马得莹韩宗玺廖文燕刘胜旺东北农业大学动物科技学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽病研究室

已从鸡(Gallinacins)、火鸡(Gallopavin)和驼鸟(Ostricacin)的血液、鸡与火鸡的上皮细胞、以及企鹅(Sphenicins)的胃内容物中分离到多种禽β-防御素。综述了该类抗菌肽的分子特征、抗菌机理与应用前景。

关键词：抗菌肽 β-防御素禽β-防御素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat6融合基因的分子克隆及表达

引用

中国预防兽医学报 2007年第8期29卷 588-590页

作者：迟磊刘思国王春来宫强赵昆王勇刘建东云孟克赵福广中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学生物技术学院吉林长春130118

以牛分枝杆菌valleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增mpb64、ag85b和esat6 3个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)和基因重组技术获得融合基因mpb64-ag85b,将mpb64-ag85b和esat6串联到同一原核表达载体pET32a(+)中获得重组质粒pET64-85... 详细信息

以牛分枝杆菌valleeⅢ株基因组DNA为模板,PCR扩增mpb64、ag85b和esat6 3个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)和基因重组技术获得融合基因mpb64-ag85b,将mpb64-ag85b和esat6串联到同一原核表达载体pET32a(+)中获得重组质粒pET64-85b-e6。将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG(终浓度1 mmol/L)进行诱导,SDS-PAGE电泳分析表达情况,以Ni^(21)亲和层析柱纯化表达的融合蛋白和Western blot分析融合蛋白的免疫活性。结果表明:表达的融合蛋白大约为76 Ku,与预测大小相符,以Ni^(21)亲和层析柱纯化的融合蛋白能与牛结核病阳性血清发生反应。

关键词：牛分枝杆菌融合基因重组表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究

引用

中国预防兽医学报 2007年第6期29卷 427-431页

作者：高玉龙高宏雷王晓艳李俊山邓小芸刘伟王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得... 详细信息

将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒 vp2基因杆状病毒免疫原性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库免疫小鼠产生的免疫保护作用

用胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库免疫小鼠产生的免疫保护作用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：刘慧芳周媛媛刘思国宫强王勇刘建东王春来云孟克常月红迟磊赵昆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室

为了筛选、鉴定APP保护性抗原基因库,本研究构建了胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组表达文库(～106个克隆),并将该文库分成10个克隆库(1.0×105个克隆/库)。提取每个克隆库的重组质粒免疫小鼠并以1型胸膜肺炎放线杆菌进行攻毒,有4... 详细信息

为了筛选、鉴定APP保护性抗原基因库,本研究构建了胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组表达文库(～106个克隆),并将该文库分成10个克隆库(1.0×105个克隆/库)。提取每个克隆库的重组质粒免疫小鼠并以1型胸膜肺炎放线杆菌进行攻毒,有4个克隆库免疫组(L2,L3,L6,L7)的小鼠在攻毒后的存活率高于其他免疫组和对照组小鼠,肺脏荷菌数显著低于空载体免疫组小鼠。将其中的一个对小鼠具有保护作用的克隆库(L3)进一步分成4个亚克隆库,每个含有～2×104个克隆。结果有一个亚克隆库(L3-4)免疫后的小鼠能基本抵抗1型胸膜肺炎的感染,肺脏荷菌数最低,并能诱导小鼠产生特异性的免疫应答。结果表明,本研究构建的基因组表达文库含有一部分基因,该基因表达的蛋白能使免疫小鼠抵抗APP的感染。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库免疫保护

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因修饰的鸡新城疫病毒F48E9株HN基因DNA疫苗的构建及其免疫效力评价

基因修饰的鸡新城疫病毒F48E9株HN基因DNA疫苗的构建及其免疫效力...

引用

中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：贺笋王云峰木古丽石星明王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐 830052 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001

DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量和免疫原性有直接关系，为了提高目的基因的表达量，增强其免疫效果，本研究对NDV F48E9株的HN基因进行了修饰，将NDV F48E9株的HN基因的密码子全部替换为鸡体内偏嗜性密码子，同时在HN基因的5’端... 详细信息

DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量和免疫原性有直接关系，为了提高目的基因的表达量，增强其免疫效果，本研究对NDV F48E9株的HN基因进行了修饰，将NDV F48E9株的HN基因的密码子全部替换为鸡体内偏嗜性密码子，同时在HN基因的5’端加上同样已替换密码子的禽流感病毒HA蛋白信号肽序列。修饰后HN基因命名为SoptiHN，剔除信号肽的HN基因命名为optiHN。将SoptiHN、optiHN和F48E9株的HN基因分别克隆到真核表达载体pVAX1和含有多个鸡体内最适免疫刺激序列CpG-ODN的载体pVAX1-CpG中，将他们分别命名为pV-SopliHN、pVC-SoptiHN、pV-optiHN、pVC-optiHN和pV-HN、pVC-HN，用这些质粒转染293T细胞，48h后间接免疫荧光和West-blotting检测细胞中瞬时表达的HN蛋白。结果显示，与未经修饰的HN基因相比，修饰后的HN基因体外瞬时表达水平明显提高，并且密码子优化与添加信号肽序列这两种途径都可以提高HN基因的体外表达量。将质粒pVAx1、pvAx1-CpG、pV-HN、pVC-HN、pV-Sop-tiHN和pVC-SoptiHN采用四头肌多点注射三周龄SPF鸡，每只鸡200μg，PBS设为空对照组;一免后三周以相同的剂量加强免疫，二免后以103 EID50 NDV的F48E9强毒株进行攻毒，计算发病率、死亡率、以及排毒情况。免疫前后，及攻毒前后每周采集血清和外周血淋巴计算Ⅷ抗体和细胞因子IFN-γ和IL-18动态变化情况。分析结果表明，相比NDV F48E9马株的HN基因而言，修饰后的HN基因可以诱导更加强烈的免疫反应，产生更好的保护效率。

关键词：鸡新城疫病毒 DNA疫苗密码子优化信号肽免疫印迹

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡马立克氏病病毒814株细菌人工染色体的构建

鸡马立克氏病病毒814株细菌人工染色体的构建

引用

中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：崔红玉王云峰石星明童光志兰德松何来仇华吉刘长军王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001 河北北方学院动物科技学院动物医学系张家口 075131 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001

本研究通过构建表达Eco-gpt(Xanthine-guaninephosphoribosyl transferase，XGPRT，gpt)的哺乳动物细胞基因转移遗传选择标记(1.3kb)和带有细菌人工染色体(BacterialArtificial Chromosome，BAC)基本功能基因序列的鸡马立克氏病病毒重组病毒转移载体pUAB-gpt-BAC11，将重组病毒转移栽体与鸡马立克氏病病毒细胞总DNA共转染鸡胚成纤维细胞，在选择培养基中经过加压筛选，获得并纯化重组病毒;将重组病毒细胞总DNA电转化大肠杆菌，筛选共获得38个BAC分子克隆化病毒，提取BAC-DNA转染鸡胚成纤维细胞以拯救重组病毒。结果，再次启动病毒感染，拯救了重组鸡马立克氏病病毒。本研究成功构建了鸡马立克氏病病毒814株基因组全长感染性细菌人工染色体，为病毒的反向遗传操作提供技术平台。

关键词：鸡马立克氏病病毒细茵人工染色体分子克隆化病毒病毒感染分子克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建

火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建

引用

第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：兰德松崔红玉石星明王云峰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室河北北方学院动物科技学院

HVT 为一种α疱疹病毒,因其与 MDV 抗原相关性而被广泛用作预防 MD 的活疫苗。本研究利用 Eco-gpt(黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因和细菌人工染色体(BAC)载体 pBeloBAC11的基本功能序列,构建了重组病毒转移载体

关键词：火鸡疱疹病毒病毒拯救细菌人工染色体 BAC 分子克隆化病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：