检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：姜永萍张洪波李呈军步志高张芳芳于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室(黑龙江哈尔滨) 农业部畜牧兽医总站(北京)

利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR法及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA.将pCIoptiHA和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白;随之将pCIoptiHA及pCIHA分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD<,50>的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击.结果,间接免疫荧光法和Western-blot分析表明密码子优化的HA基因表达水平显著高于野生型HA基因;免疫SPF鸡后,100μg pCIoptiHA可形成75﹪的免疫保护,100μg pCIHA可形成50﹪的免疫保护;10μg pCIoptiHA可形成对免疫鸡75﹪的部分免疫保护,而10μg pCIHA则基本不能形成免疫保护;pCIoptiHA诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA.试验结果表明,HA基因密码子的优化可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果.

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗免疫保护密码子优化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达载体的优化显著增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果

表达载体的优化显著增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果

引用

中国畜牧兽医学会2004年学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：姜永萍张洪波李呈军张芳芳步志高于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室(黑龙江哈尔滨) 农业部畜牧兽医总站(北京)

CAGGS含鸡β-actin启动子和CMV增强子,是一种高效真核表达载体.将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA,将pCAGGHA和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24-48小时293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白,Western-blot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI.为进一步评估不同表达载体对H5亚型禽流感DNA疫苗免疫效果的影响,DNA疫苗质粒pCIHA及pCAGGHA分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后分别用100LD<,50>的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击.结果,100μg pCAGGHA可形成100﹪的免疫保护,100μg pCIHA可形成50﹪的免疫保护;10μg pCAGGHA可形成对免疫鸡100﹪的免疫保护,而10μg pCIHA则基本不能形成免疫保护;pCAGGHA诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA.试验结果表明,鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果.

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗免疫保护表达载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株核蛋白基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株核蛋白基因分子演化的研究

引用

第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕陈化兰李泽君于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的核蛋白(NP)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NP基因核甘酸全长为1565bp,共编码498个氨基酸.经同源性比较结果中知,除SW... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的核蛋白(NP)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NP基因核甘酸全长为1565bp,共编码498个氨基酸.经同源性比较结果中知,除SW/HLJ/395/01外,其余14株H1N1亚型SIV的NP基因核苷酸序列与参考毒株SW/BJ/94/91保持相对最高的同源性,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为96.5~97.4﹪、97.8~99.0﹪;并且与类猪人流感病毒WIS/3523/88和NJ/8/76核苷酸序列的同源性也可分别达到95.5~96.5﹪、92.7~93.7﹪,推导氨基酸序列的同源性分别为96.8~99.0﹪、94.6~97.2﹪,相对较高.但是,SW/HLJ/395/01与类禽型H1N1猪谱系的代表毒株SW/GER/2/81同源性最高,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为93.9﹪和99.0﹪.经进化树分析可见,SW/HLJ/395/01属于类禽H1N1猪谱系,其它14株H1N1亚型SIV的NP基因皆属于古典型H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒核蛋白序列分析分子演化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株神经氨酸酶基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株神经氨酸酶基因分子演化的研究

引用

第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕陈化兰杨焕良李泽君于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京) 华南农业大学动物科学学院(广州)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸.15株H1N1亚型SIV的NA... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的神经氨酸酶(NA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1亚型SIV的NA基因核甘酸全长为1458bp,共编码477个氨基酸.15株H1N1亚型SIV的NA蛋白在58、63、68、88、146位都存在糖基化位点;但是,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01在50位存在一糖基化位点,为"-NQS-",其余13株H1N1亚型SIV在50位无糖基化位点,却在44位存在"-NHS-"的糖基化位点;而且,SW/GD/714/01、SW/GD/771/01和其余13株H1N1亚型SIV的NA蛋白头部抗原位点,在328、332、334、339、340位的氨基酸不同;但是,15株H1N1亚型SIV在366位的氨基酸均为N,与所有参考毒株在此位的S不同.经同源性比较结果和进化树分析可见,SW/GD/714/01和SW/GD/771/01的NA基因明显属于类禽型H1N1猪谱系,其余13株H1N1亚型SIV的NA基因皆属于古典型H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒神经氨酸酶序列分析分子演化正粘病毒科

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗对商品鸡的免疫效力

H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗对商品鸡的免疫效力

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：乔传玲井波于康震田国彬陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京)

将共表达禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖,制备成冻干疫苗,经翅下刺种途径接种商品鸡,免疫3周后用100LD的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)进行攻击.结果重组鸡... 详细信息

将共表达禽流感病毒(AIV)HA与NA基因的重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖,制备成冻干疫苗,经翅下刺种途径接种商品鸡,免疫3周后用100LD<,50>的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)进行攻击.结果重组鸡痘病毒疫苗免疫鸡后诱导产生了高水平的HI抗体,能够完全抵抗H5N1亚型病毒的致死性攻击,对雏鸡禽流感母源抗体的消长情况进行了检测,结果母源抗体HI效价的峰值在7日龄时出现,而后随雏鸡日龄的增大而下降,在35日龄时趋于消失.雏鸡母源抗体对重组疫苗的免疫效力有一定的干扰.

关键词：禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力 H5亚型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中国H5亚型禽流感病毒2004年分离株HA基因的序列分析

中国H5亚型禽流感病毒2004年分离株HA基因的序列分析

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：邓国华王劭余丹丹李雁冰田国彬杨汉春于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 中国农业大学动物医学院

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行HA基因序列测定和分析发现,HA基因的裂解位点有部分毒株比其他毒株少1了一个碱性氨基酸,其编码的可能糖基化位点有较大差异,除了有7个共有的糖基化位点以外... 详细信息

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行HA基因序列测定和分析发现,HA基因的裂解位点有部分毒株比其他毒株少1了一个碱性氨基酸,其编码的可能糖基化位点有较大差异,除了有7个共有的糖基化位点以外,还有16个毒株在170位多了一个潜在的糖基化位点,DK/HuNYY/7004毒株在156多了一个糖基化位点,但是所有毒株的受体结合位点完全一致,而在受体结合部的两侧有一定的差异.从遗传进化树上来看,我国2004年H5亚型禽流感病毒分离株的HA基因和我国早期毒株CKNX/48/02,DKHUN/40/02和DKZJ/52/00有较为密切关系,而与香港以及东南亚国家毒株的基因有着较大的差异.

关键词： H5N1禽流感病毒序列分析分子演化分离鉴定

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

引用

第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕申之义陈化兰于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京) 华南农业大学动物科学学院(广州)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋白在10、11、23、87、287位都存在高度保守的糖基化位点,此外,在276位多了一个"-NTT-"糖基化位点,与参考毒株SW/IW/930/01一致,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征.本研究进一步发现,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G,具有非高致病力毒株分子特征;而其受体结合位点在HA蛋白上第226位是Q,第228位为G,可能具有感染禽的潜力.经同源性比较,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/4754/94的同源性相对最高,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到95.7~96.1﹪和96.5~97.2﹪.由同源性比较结果和进化树分析可见,15株H1N1亚型SIV的HA基因皆属于古典型的H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒血凝素序列分析分子演化正粘病毒科流感病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达禽流感病毒核蛋白基因重组禽痘病毒的构建及其免疫保护性研究

引用

中国农业科学 2003年第6期36卷 704-708页

作者：乔传玲于康震姜永萍张建林邓国华孟庆文田国斌唐秀英中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感研究中心农业部动物流感研究中心农业部动物流感研究中心哈尔滨150001 农业部动物流感研究中心哈尔滨150001现在农业部畜牧兽医局工作

从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克... 详细信息

从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96 (H5N1)核蛋白 (NP)基因的质粒pUCNP中切下NP基因片段 ,将其亚克隆到pSY5 38质粒 ,再将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因也平端克隆到pSY5 38质粒 ,然后切下同时含有NP及LacZ基因的片段 ,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY6 81,从而构建出表达核蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体pSY(NP +LacZ)。应用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽痘病毒S FPV 0 17的鸡胚成纤维细胞 ,在X gal存在的条件下 ,利用蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化以及PCR、Western blot鉴定 ,结果证明 ,获得了能高效表达AIVNP蛋白的重组禽痘病毒rFPV NP。SPF鸡体内的免疫保护试验结果表明 ,它能够诱导机体产生较高水平的NP特异性抗体 ,并对H5N1和H7N1这 2种亚型高致病力禽流感病毒的攻击提供一定的保护。

关键词：禽流感病毒重组禽痘病毒核蛋白基因免疫保护性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

DNA微阵列与基因表达研究概况

引用

动物医学进展 2003年第6期24卷 15-18页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DN... 详细信息

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DNA微阵列的基本原理、DNA微阵列制备技术、杂交信号检测以及数据分析。 c DNA微阵列与细胞周期相关基因表达、细菌基因表达、病毒基因表达、肿瘤基因表达进行了概述。

关键词： DNA微阵列基因表达技术原理杂交信号检测基因功能基因突变多态性分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因芯片的研究进展

基因芯片的研究进展

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

基因芯片(gene chip)又称DNA微阵列(DNA microarray),DNA芯片。它是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于支持物上,然后与待测的荧光素或放射性同位素标记的核酸样品按碱基配对原理进行杂交,再通过激光共聚焦荧... 详细信息

基因芯片(gene chip)又称DNA微阵列(DNA microarray),DNA芯片。它是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于支持物上,然后与待测的荧光素或放射性同位素标记的核酸样品按碱基配对原理进行杂交,再通过激光共聚焦荧光检测系统等对芯片进行扫描,对每一探针上的荧

关键词：寡核苷酸阵列基因芯片基因表达图谱人类基因组杂交信号酿酒酵母

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：