检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2014年第3期36卷 243-245页

作者：孔晖晖张乾义张莹谷春阳姜永萍关云涛陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 甘肃农业大学甘肃兰州730070

为研究NS基因对流感病毒致病力的影响,本实验以一株H5N1禽流感病毒(AIV)A/duck/Guangxi/35/2001(DK/35)为亲本病毒株,利用反向遗传技术,以我国首例甲型H1N1流感病毒分离株A/Sichuan/01/2009(SC/01)的NS基因对DK/35株进行单基因替换,拯... 详细信息

为研究NS基因对流感病毒致病力的影响,本实验以一株H5N1禽流感病毒(AIV)A/duck/Guangxi/35/2001(DK/35)为亲本病毒株,利用反向遗传技术,以我国首例甲型H1N1流感病毒分离株A/Sichuan/01/2009(SC/01)的NS基因对DK/35株进行单基因替换,拯救出一株重组H5N1 AIV。动物实验表明,SC/01株的NS基因能够使DK/35株对小鼠的致病力减弱。我们推测SC/01株的NS基因主要是通过调节宿主干扰素的产生致弱DK/35株的毒力。进一步对致弱机制进行系统研究,为生产弱毒活疫苗提供一种新的策略。

关键词： H5N1禽流感病毒重组致病性 NS基因

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H5亚型禽流感病毒LAMP快速检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2014年第2期36卷 107-110页

作者：包红梅李一经王秀荣陈化兰东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为建立快速检测H5亚型禽流感病毒(AIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H5亚型AIV HA基因序列,设计了一套特异识别HA基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,建立了基于LAMP技术检测H5亚型AIV的检测方法。结果表明,该方法... 详细信息

为建立快速检测H5亚型禽流感病毒(AIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H5亚型AIV HA基因序列,设计了一套特异识别HA基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,建立了基于LAMP技术检测H5亚型AIV的检测方法。结果表明,该方法对H5 AIV RNA的最小检测限为0.1 pfu,灵敏度高于普通一步法RT-PCR 10倍;扩增反应可以在30 min内完成;在反应体系中添加钙黄绿素(FD)荧光染料后,可以通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。灵敏性及特异性试验表明,该方法灵敏度高、特异性好,能够作为H5亚型AIV的病原学快速检测方法。

关键词：禽流感病毒 LAMP方法 H5亚型禽流感病毒

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H5N1亚型禽流感病毒感染SPF鸡脾脏蛋白质组分析

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中国预防兽医学报 2014年第7期36卷 519-523页

作者：赵玉辉陈普成包红梅王秀荣李广兴东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为鉴定H5N1亚型禽流感病毒(AIV)感染鸡脾脏的差异表达蛋白,本研究利用双向电泳(2-DE)和质谱(MS)技术相结合的蛋白质组学方法对AIV感染的鸡脾脏蛋白进行检测。通过2-DE图谱分析,获得37个差异表达蛋白点,经MS鉴定出36个差异蛋白点;GO软件... 详细信息

为鉴定H5N1亚型禽流感病毒(AIV)感染鸡脾脏的差异表达蛋白,本研究利用双向电泳(2-DE)和质谱(MS)技术相结合的蛋白质组学方法对AIV感染的鸡脾脏蛋白进行检测。通过2-DE图谱分析,获得37个差异表达蛋白点,经MS鉴定出36个差异蛋白点;GO软件注释分析显示差异蛋白参与多种重要的生物学过程,包括代谢、合成、运输、生物调节和免疫反应等;荧光定量PCR(qPCR)验证表明感染组中组织转谷氨酰胺酶(TGM2)、结蛋白(DES)、β-2微球蛋白(B2M)基因呈现上调趋势,而P40核糖体相关蛋白(RPSA)、肌动蛋白相关蛋白(ACTR3)基因与对照组相比表达水平下调,这些基因表达趋势均与2-DE结果一致。本研究结果为进一步研究宿主与病毒相互作用和抗病毒感染的机制奠定了基础。

关键词：禽流感病毒脾脏双向凝胶电泳蛋白质组

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表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

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中国预防兽医学报 2014年第7期36卷 515-518页

作者：李奇蒙陈普成柳金雄姜永萍王笑梅田雨胡永浩陈化兰甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR方法扩增IBDV的VP2基因构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并采用限制性内切酶将携带Pec复合启动子和CMV增强子的VP2基因表达盒(Pec-VP2)切下,连... 详细信息

为构建表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(rHVT-VP2),本研究利用RT-PCR方法扩增IBDV的VP2基因构建了重组真核表达质粒pCAGG-VP2,并采用限制性内切酶将携带Pec复合启动子和CMV增强子的VP2基因表达盒(Pec-VP2)切下,连接于Gateway系统入门质粒pENTR构建pENTR-VP2。采用Gateway LR克隆技术将pENTR-VP2与构建的重组粘粒f5354ccdBK+共同参与基因片段互换反应,构建重组粘粒f5354-VP2。f5354-VP2与其他4个相互重叠覆盖HVT全基因组的粘粒经酶切线性化后共同转染CEF细胞,并拯救出重组病毒rHVT-VP2。将重组病毒在CEF细胞中连续传代20次,每隔5代采用PCR、western blot和间接免疫荧光进行检测,结果表明VP2蛋白均得到稳定地表达。rHVT-VP2的构建为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病毒火鸡疱疹病毒 VP2

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2012年-2013年我国养猪重点省份猪流感的血清学调查

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中国预防兽医学报 2014年第6期36卷 431-434页

作者：刘丽萍乔传玲杨焕良隋金钰王昌建陈艳邱立新唐小明何世成陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410002

为进一步了解我国猪流感病毒（SIV）的流行现状，本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份，以类禽型H1N1（EA H1N1）、2009甲型H1N1（pdm/09 H1N1）和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗... 详细信息

为进一步了解我国猪流感病毒（SIV）的流行现状，本研究于2012年10月至2013年12月从全国养猪重点省份的养殖场、屠宰场采集猪血清样品共计5 856份，以类禽型H1N1（EA H1N1）、2009甲型H1N1（pdm/09 H1N1）和H3N2亚型SIV 抗原作为标准抗原，采用血凝抑制（HI）试验方法进行抗体检测。结果显示，我国猪群中SIV抗体阳性率分别为55.52 %、13.92 %和2.00 %，其中EA H1N1 SIV抗体平均阳性率高于其它亚型。2013年1月和3月份，又集中在广东和湖南两个省份的部分养殖场和屠宰场采集猪血清样品共计9 910份，采用ELISA进行抗体检测。结果共检出阳性血清3 518份，平均阳性率分别为36.14 %和34.89 %。本实验结果表明2012年～2013年我国猪群中SIV感染比较普遍。

关键词：猪流感血清学抗体血凝抑制 ELISA

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1株H12N7亚型禽流感病毒全基因组测定及遗传演化分析

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畜牧兽医学报 2014年第11期45卷 1844-1850页

作者：谭丹崔鹏飞黄建龙王昌建李文辉范仲鑫张芳何世成唐小明刘道新邓国华湖南省动物疫病预防控制中心长沙410014 长沙市动物疫病预防控制中心长沙410013 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

2011年冬对湖南环洞庭湖地区散养鸭群进行禽流感病毒(AIV)感染情况调查时从一鸭场环境粪便拭子中分离一株H12N7亚型AIV,命名为A/Environment/Hunan/S4484/2011(H12N7),对其进行全基因序列测定及分析。结果显示该毒株HA基因裂解位点无多... 详细信息

2011年冬对湖南环洞庭湖地区散养鸭群进行禽流感病毒(AIV)感染情况调查时从一鸭场环境粪便拭子中分离一株H12N7亚型AIV,命名为A/Environment/Hunan/S4484/2011(H12N7),对其进行全基因序列测定及分析。结果显示该毒株HA基因裂解位点无多个连续的碱性氨基酸(PQAQDR↓GLF),具有低致病性AIV的特征,对其全基因进行遗传进化分析表明8个基因片段来源非常复杂,与周边国家野禽中分离的毒株相似性很高,可能有共同的祖先来源,同时提示该毒株可能是不同亚型禽流感毒株之间基因交换所形成的重组体。

关键词：禽流感病毒 H12N7亚型序列测定与分析

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2株H9N2亚型禽流感病毒的致病性

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江苏农业科学 2014年第5期42卷 187-188页

作者：谭丹黄建龙王昌建刘道新邓国华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129

为了解从我国洞庭湖地区鸡和鸭中分离的H9N2亚型禽流感病毒的生物学特性,本研究选用具有代表性的2株病毒对SPF鸡及BALB/c小鼠进行致病性试验。结果显示：2株毒株均能使鸡感染并排毒,并且使同居鸡感染排毒,但不引起鸡明显的临床症状及死... 详细信息

为了解从我国洞庭湖地区鸡和鸭中分离的H9N2亚型禽流感病毒的生物学特性,本研究选用具有代表性的2株病毒对SPF鸡及BALB/c小鼠进行致病性试验。结果显示：2株毒株均能使鸡感染并排毒,并且使同居鸡感染排毒,但不引起鸡明显的临床症状及死亡;2株毒株感染SPF鸡后能在鸡喉分离到高滴度病毒,明显高于泄殖腔,且排毒期主要集中于第1-7天;从感染鸡脏器中病毒复制情况看,供试的2株病毒均未在脑等组织脏器中复制,而2株病毒感染BALB/c小鼠后,在小鼠脏器中复制情况却不一致,A/CK/HuN/S4591/2011（H9N2）毒株在小鼠鼻甲及肺脏中均能检测到病毒,但是A/DK/HuN/S4111/2011（H9N2）毒株仅在小鼠鼻甲中检测到较高滴度的病毒。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒致病性 SPF鸡 BALB c小鼠

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环洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒监测

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畜牧与兽医 2014年第8期46卷 25-27页

作者：黄建龙谭丹王昌建范仲鑫朱春霞王伟国张朝阳刘道新邓国华湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410014 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

调查2009—2013年洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒的分布和流行情况,为该地区H4亚型禽流感的防控提供依据。结果显示:各年度均在环洞庭湖区活禽批发市场上分离到H4亚型禽流感病毒,总的分离率为3.14%;水禽场H4亚型禽流... 详细信息

调查2009—2013年洞庭湖地区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒的分布和流行情况,为该地区H4亚型禽流感的防控提供依据。结果显示:各年度均在环洞庭湖区活禽批发市场上分离到H4亚型禽流感病毒,总的分离率为3.14%;水禽场H4亚型禽流感病毒场间阳性率达到8.72%,拭子的H4亚型病毒分离率为1.12%。提示洞庭湖区活禽批发市场和水禽场H4亚型禽流感病毒带毒率比较高。

关键词：禽流感病毒 H4亚型监测洞庭湖区

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环洞庭湖区鸭场禽流感免疫调查及抗体检测情况

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中国兽医杂志 2014年第10期50卷 39-40页

作者：黄建龙王昌建朱春霞邓国华范仲鑫何世成王卫国唐小明汪洪冰刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410014 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒属A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类传染病,主要在鸡、鸭、鹅、鸽等家禽和野生禽中传播,是严重危害养禽业的重要病毒性疫病[1]。2003年以来,H5N1亚型高致病性禽流感在全球传播,导致大量家禽和野生... 详细信息

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒属A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类传染病,主要在鸡、鸭、鹅、鸽等家禽和野生禽中传播,是严重危害养禽业的重要病毒性疫病[1]。2003年以来,H5N1亚型高致病性禽流感在全球传播,导致大量家禽和野生鸟类死亡。在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制家禽禽流感发生与流行。但部分禽类（特别是水禽）疫苗接种后所诱导的免疫应答水平不高,其原因是什么尚不清楚。

关键词：免疫水平禽流感病毒环洞庭湖区抗体检测疫苗接种禽流行性感冒全球传播正黏病毒科养禽业免疫应答

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3株H3N8亚型禽流感病毒对SPF鸡和Balb/c小鼠致病性研究

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动物医学进展 2014年第4期35卷 77-80页

作者：谭丹关立铮王晶崔鹏飞施建忠黄建龙何世成王昌建刘道新邓国华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410129

为了解从洞庭湖区鸭子和环境中分离的3株H3N8亚型禽流感病毒的致病性。利用这3株毒株对SPF鸡及Balb／c小鼠进行致病性试验，结果显示，3株毒株均能使鸡感染并排毒，但不引起鸡明显的临床症状及死亡，感染鸡后第3天～第7天在泄殖腔排出... 详细信息

为了解从洞庭湖区鸭子和环境中分离的3株H3N8亚型禽流感病毒的致病性。利用这3株毒株对SPF鸡及Balb／c小鼠进行致病性试验，结果显示，3株毒株均能使鸡感染并排毒，但不引起鸡明显的临床症状及死亡，感染鸡后第3天～第7天在泄殖腔排出高滴度病毒，且持续至第11天（仅观察到该天），与以往的研究相比，排毒时间更长。3株H3N8亚型毒株感染小鼠后，能在小鼠鼻甲及肺脏内高滴度复制，但小鼠的体重变化不明显。结果说明3株H3亚型AIV对家禽及哺乳动物感染能力增强，因此加强该亚型的流行病学监测及致病性的研究非常重要。

关键词： H3N8亚型禽流感病毒致病性 SPF鸡 Balb c小鼠

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