检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：姜永萍张洪波张平静赵有淑乔传玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对SPF鸡具有良好的免疫保护效果,为探讨其对鸭的免疫保护效果,将pCAGGoptiHA5以i00μg剂量加强免疫4周龄金定鸭,同时设油苗免疫对照组和空白对照组,加强免疫2周后用100LD的HPAIV A/Duck/ShanghaiNan... 详细信息

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对SPF鸡具有良好的免疫保护效果,为探讨其对鸭的免疫保护效果,将pCAGGoptiHA5以i00μg剂量加强免疫4周龄金定鸭,同时设油苗免疫对照组和空白对照组,加强免疫2周后用100LD的HPAIV A/Duck/ShanghaiNanhui/16/2004（H5N1）[DK/SHNH/1604（H5N1）]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7、14、21、28天采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果表明,pCAGGoptiHA5免疫鸭后可以诱导较高水平的HI抗体,并可以保护免疫鸭不发生高致病性病毒攻击后的死亡。

关键词：禽流感 pCAGGoptiHA5 鸭 DNA疫苗免疫保护

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猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用

猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：陈艳乔传玲丁选亚杨焕良辛晓光韩庆功陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室

利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克隆到表达载体pET32a中,经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重... 详细信息

利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克隆到表达载体pET32a中,经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重组表达质粒pET-HA,将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,经终浓度为1mM的IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,HA蛋白获得了高效表达,经Westernblot检测证实表达产物具有良好的免疫学活性,经间接ELISA预试验表明具有良好的抗原反应性。本研究为以重组HA蛋白为抗原建立H1亚型猪流感抗体的ELISA检测方法奠定了基础。

关键词：猪流感病毒 HA基因原核表达

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real-time RT-PCR检测禽流感病毒的初步探讨

real-time RT-PCR检测禽流感病毒的初步探讨

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

用4个不同亚型的禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6h,12h,24h,48h,72h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene3000实时定量PCR仪对AIV型特异性基因-基质蛋白(M)基因的表达进行检测,试图建立快速检测A型流... 详细信息

用4个不同亚型的禽流感病毒(AIV)感染Madin-Darby canine kidney(MDCK)细胞,收集感染后6h,12h,24h,48h,72h的病毒,提取总RNA,利用Rotor Gene3000实时定量PCR仪对AIV型特异性基因-基质蛋白(M)基因的表达进行检测,试图建立快速检测A型流感病毒的real-time RT-PCR方法。结果表明:病毒感染MDCK细胞后6h,12h,24h表达水平很低,而48h和72h表达水平较高;我们建立的M基因的RRT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后6h的这4种流感病毒,比常规RT-PCR方法(只能检测到24h后)更灵敏,而且更廉价。

关键词：禽流感病毒 RT-PCR检测特异性基因基质蛋白基因 MDCK细胞

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H3N2亚型猪流感病毒进化分析及重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立

H3N2亚型猪流感病毒进化分析及重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：丁选亚乔传玲杨焕良陈艳辛晓光韩庆功陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室

对2004～2005年中国某些省市猪群进行猪流感血清学和病原学调查研究,从1238份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到5株H3N2亚型猪流感病毒。通过比较发现这5株病毒的HA基因同源性较高,达99%以上。对其中的一株病毒A/Swine/Guangd... 详细信息

对2004～2005年中国某些省市猪群进行猪流感血清学和病原学调查研究,从1238份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到5株H3N2亚型猪流感病毒。通过比较发现这5株病毒的HA基因同源性较高,达99%以上。对其中的一株病毒A/Swine/Guangdong/9/05(H3N2)(缩写SW/GD/9/05)的8个基因片段进行了序列测定与分析,基于HA、PB2及NP基因绘制了系统进化树。结果表明分离株属于近期人流感病毒分支,其某些氨基酸位点发生了突变。将RT-PCR扩增的全长HA基因克隆到pMD-18T载体,

关键词：猪流感病毒 HA1 ELISA

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长沙市活禽批发市场鸡鸭禽流感病毒H5抗体监测

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动物医学进展 2013年第5期34卷 131-133页

作者：黄建龙范仲鑫邓国华王辉王昌建何世成汪洪冰邱立新鲁杏华刘道新湖南省动物疫病预防控制中心湖南长沙410007 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 长沙市畜禽产品质量检测中心湖南长沙410013

为了解批发市场活禽禽流感病毒H5抗体水平,对长沙市2家批发市场活禽禽流感病毒H5抗体进行了监测。结果显示,2008年-2011年从长沙市活禽批发市场所采集的禽血清禽流感病毒H5抗体水平比较低,鸭血清抗体合格率为50.4%,鸡血清抗体合格率为58... 详细信息

为了解批发市场活禽禽流感病毒H5抗体水平,对长沙市2家批发市场活禽禽流感病毒H5抗体进行了监测。结果显示,2008年-2011年从长沙市活禽批发市场所采集的禽血清禽流感病毒H5抗体水平比较低,鸭血清抗体合格率为50.4%,鸡血清抗体合格率为58.1%。12月～3月份家禽血清禽流感病毒H5抗体平均水平比较低,这与禽流感易发于冬春季节这一流行病学特征一致,表明家禽的抗体水平与发病有一定的相关性。

关键词：活禽市场禽流感病毒 H5抗体

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禽流感病毒通用型RT-LAMP快速检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2015年第5期37卷 383-386页

作者：石霖王秀荣孙阮洋李雁冰程荣华于学武曹东薛树山赵培徐晓龙马勇郑世民东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 辽宁省动物疫病预防控制中心辽宁沈阳110164 吉林省畜牧兽医科学研究院吉林长春130062

为建立一种禽流感病毒（AIV）的快速检测方法,本研究根据环介导等温扩增技术（LAMP）原理,设计了针对AIV M基因4个不同区段的特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了AIV的RT-LAMP方法。结果表明,该方法对AIV H1~H16亚型的检... 详细信息

为建立一种禽流感病毒（AIV）的快速检测方法,本研究根据环介导等温扩增技术（LAMP）原理,设计了针对AIV M基因4个不同区段的特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了AIV的RT-LAMP方法。结果表明,该方法对AIV H1~H16亚型的检测结果均为阳性,而对其他禽类病毒的扩增均为阴性,具有良好的特异性。对AIV的最低检测限为13.43 EID50/m L,灵敏度为普通一步RT-PCR的10倍;扩增反应可以在恒温水浴内60 min内完成;在反应体系中添加荧光染料后,肉眼即可判定检测结果。该检测方法与RT-PCR方法和荧光定量RT-PCR方法对临床样品检测的符合率均为81.8%。该方法能够简便、快速、灵敏、特异地检测AIV。

关键词：禽流感 RT-LAMP 诊断方法

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鸡痘疫苗对禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力的影响

鸡痘疫苗对禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力的影响

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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

作者：乔传玲李呈军李泽君田国彬陈化兰于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

禽流感病毒(AIV)HA和NA双基因重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡本产生100％抵抗H5N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)的攻击.而当鸡群已进行鸡痘疫苗免疫或者感染了鸡痘病毒的情况下,此重组疫苗的免疫效力如何?还不为人知,本研究首先对SPF试... 详细信息

禽流感病毒(AIV)HA和NA双基因重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡本产生100％抵抗H5N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)的攻击.而当鸡群已进行鸡痘疫苗免疫或者感染了鸡痘病毒的情况下,此重组疫苗的免疫效力如何?还不为人知,本研究首先对SPF试验鸡接种商品化的鸡痘弱毒疫苗,既而在免疫后的不同间隔时间接种重组疫苗,免疫后检测鸡群的HI抗体水平,同时用100LD<,50>的HPAIV H5N1进行攻击.结果两种疫苗同时接种和间隔在内周(或以上)时,鸡痘疫苗对重组苗的免疫效力不构成影响,对禽流感的保护仍为100％,而两次免疫的间隔时间在职、2、3周时,重组疫苗的免疫保护效力则受到不同程度的影响.

关键词：鸡痘疫苗禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力 DNA重组

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2004年中国H5亚型禽流感病毒分离株NP基因序列分析

2004年中国H5亚型禽流感病毒分离株NP基因序列分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：邓国华于丹丹王劭李雁冰田国彬于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室和兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行NP基因序列测定和分析发现,我国2004年分离株可以分为两个大的类群,其中四个毒株与其它毒株之间的同源性差异较大,而其余毒株的核苷酸序列的同源性都在96... 详细信息

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行NP基因序列测定和分析发现,我国2004年分离株可以分为两个大的类群,其中四个毒株与其它毒株之间的同源性差异较大,而其余毒株的核苷酸序列的同源性都在96﹪以上,但是和1996年广东分离株GSGD/1/1996的同源性在90.7﹪~93.8﹪之间,有较大的差异性.从编码氨基酸的同源性来看,不同毒株间的同源性都在91.6﹪~99.6﹪之间,不同毒株在遗传进化树中所处的位置不同,可以分为2个相对独立的大进化分支.

关键词： H5N1禽流感病毒 NP基因序列分析分子演化高致病性禽流感

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基因芯片的研究进展

基因芯片的研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第十次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

阐述了基因芯片技术的基本原理,介绍了基因芯片在制备技术、杂交信号检测和数据分析方面的技术进展,并对CDNA芯片在基因表达中的应用进行了探讨.

关键词：基因芯片基因表达 CDNA芯片基因功能

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不同免疫途径及剂量接种禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的研究

不同免疫途径及剂量接种禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的研究

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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

作者：乔传玲李呈军刘志军李雁冰于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡体产生对H5N1和H7N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)攻击的100％保护力.本实验将不同剂量的重组疫苗分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴箅途径接种种周龄... 详细信息

表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡体产生对H5N1和H7N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)攻击的100％保护力.本实验将不同剂量的重组疫苗分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴箅途径接种种周龄SPF鸡.结果此疫苗经翅下刺种、肌肉和皮下注射途径接种,能够诱导产生血凝抑制(HI)抗体;用100LD<,50>的HPAIV A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)毒株攻击后,免疫鸡无一发病和死亡,疫苗的保护率为100％.点眼和滴箅途径免疫时,大剂量接种能够诱导一下的抗体生成,攻毒后的保护率分别为83.3％、66.7％;而小剂量接种,则不能够产生免疫反应,攻毒后疫苗的保护率为0.表明重组禽痘病毒疫苗经翅膀刺种、股份注射和皮下注射才能够诱导机体产生高效的免疫力.

关键词：禽流感重组禽痘病毒疫苗接种途径剂量免疫效力

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