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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

1引言猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病现已波及世界各地,给全球养猪业造成了重大经济损失。PCV2属于圆环病毒科圆环病毒属,是一种共价闭合、单股环状负链DNA病毒,呈二十面体对称,无囊膜。PCV2... 详细信息

1引言猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病现已波及世界各地,给全球养猪业造成了重大经济损失。PCV2属于圆环病毒科圆环病毒属,是一种共价闭合、单股环状负链DNA病毒,呈二十面体对称,无囊膜。PCV2病毒粒子直径为17nm,基因组约1.7kb,是迄今发现的最小的动物病毒。PCV2有2个主要的开放阅读框(ORFs),其中ORF1编码与病毒复制相关的蛋白Rep和Rep',ORF2编码病毒的结构蛋白Cap。Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋

关键词： PCV 抗体检测免疫增强作用 Cap 攻毒试验中和抗体滴度病毒血症猪圆环病毒淋巴细胞增殖试验免疫保护效力重组杆状病毒反应原性特异性反应

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β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：贺番凌理军廖亚金李素韩文赵碧波孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道。为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿... 详细信息

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道。为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主细胞蛋白-β-actin。通过免疫共沉淀、GST pulldown、激光共聚焦以及双分子荧光互补试验验证了E2蛋白与β-actin的相互作用。利用RNA干扰技术沉默β-actin的表达以及用细胞松弛素D在猪瘟感染后4h破坏感染细胞β-actin蛋白的丝状结构,均能显著降低培养上清中的病毒滴度与RNA拷贝数。综上所述,本研究表明β-actin在病毒复制周期的早期参与猪瘟病毒的生长调节。

关键词：猪瘟病毒酵母双杂交 E2蛋白 β-actin 细胞松弛素D

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东北地区野生鸟类B亚群禽白血病的分子流行病学调查及env基因的序列分析

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中国兽医科学 2013年第2期43卷 208-212页

作者：李德龙刘婉思杨波高奇曾祥伟秦立廷高宏雷刘思当高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性... 详细信息

为掌握我国东北地区野生鸟类感染禽白血病病毒(ALV)的情况,从黑龙江、吉林和辽宁三省采集了300份野生鸟类样品,经PCR检测,4份野生鸟类样品为ALV-B阳性,并扩增了这4份样品的env基因,对其序列进行了遗传进化分析。结果显示,4份ALV-B阳性样品的env基因与原型毒株RAV-2的同源性为99.1%～99.4%,与美国的另外2株代表毒株Schmidt-Ruppin B和Prague subgroup B的同源性为93.3%～98.4%,而与2株中国蛋鸡分离株SDAU09C2和SDAU09E3的同源性为90.2%～90.6%。以上结果表明,目前我国野生鸟类已经存在禽白血病。env基因序列分析结果表明,这4份阳性样品的env基因部分位点发生了变异,并且在多处位点存在突变。

关键词：野生鸟类 B亚群禽白血病流行病学调查序列分析

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我国东北地区野生鸟类A亚群禽白血病病毒分子流行病学调查及env基因序列分析

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中国预防兽医学报 2013年第3期35卷 245-247页

作者：杨波高玉龙高宏雷秦立廷刘婉思李德龙高奇曾祥伟王笑梅东北林业大学野生动物资源学院黑龙江哈尔滨150040 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 山东农业大学动物科技学院山东泰安271000

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV... 详细信息

为了解野生鸟类禽白血病病毒(ALV)的感染情况,本研究采集了300份野生鸟类样品,将样品处理后接种DF-1细胞,利用p27抗原ELISA、IFA、PCR等方法检测,其中两份样品为ALV阳性并对其env基因扩增。结果表明,其中gp85编码序列与已发表的A亚群ALV(ALV-A)的同源性最高,为91.1%～100%,而与已发表的鸡的B、C、D、E、J亚群ALV的gp85编码序列的同源性仅在28.0%～80.3%之间。遗传进化树分析也表明这两份ALV阳性样品的gp85编码序列属于ALV-A。本实验在我国野生鸟类群体中首次分离和鉴定出ALV-A,表明目前我国野生鸟类已经存在A亚群ALV的感染。

关键词：野生鸟类 A亚群禽白血病 gp85 序列分析

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猪圆环病毒2型及其相关疾病的流行趋势与防控对策

猪圆环病毒2型及其相关疾病的流行趋势与防控对策

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：刘建波张辉刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室哈尔滨150001

文章介绍了猪圆环病毒2型的相关疾病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征和猪呼吸道疾病综合征等及其流行趋势，指出对PCV2及PCVAD的防控，除了强化生物安全、加强饲养管理、改善猪场环境、控制营养结构等这些基本措施外，重要的是接种猪圆环... 详细信息

文章介绍了猪圆环病毒2型的相关疾病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征和猪呼吸道疾病综合征等及其流行趋势，指出对PCV2及PCVAD的防控，除了强化生物安全、加强饲养管理、改善猪场环境、控制营养结构等这些基本措施外，重要的是接种猪圆环病毒2型疫苗及引起PCVAD其他相关病原的疫苗。

关键词：猪圆环病毒2型流行病学分析疫苗研发疾病防控

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的效力评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的...

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：孙元秦华洋袁晋王春花赵碧波李素罗玉子仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。系统评价显示,该疫苗初步具备了理想猪瘟疫苗的特征。本研究对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV-SFV-E2以三种免疫途径(肌肉、皮下、滴鼻)在猪体上的免疫效果进行了比较。选取21头5周龄左右猪瘟抗体及抗原均为阴性的健康仔猪,将所有仔猪随机分成A、B、C和D四组,其中A、B、C三组分别经肌肉、皮下和滴鼻方式注射5×106 TCID50 rAdV-SFV-E2,D组分别经三种途径免疫5×106 TCID50 rAdV-SFV-empty.免疫后3周以同种疫苗、同样途径和剂量进行加强免疫。加强免疫后4周,所有猪用猪瘟病毒石门株进行攻毒。研究结果显示,皮下免疫组诱导的体液免疫水平较其他途径免疫组较高。在攻毒前,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为46.28％、51.66％和31.94％。皮下免疫组与滴鼻免疫组在攻毒前的抗体水平比较上差异显著(p＜0.05).攻毒后3 d,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为54.28％、62.39％和39.35％。皮下免疫组与肌肉免疫组、滴鼻免疫组间差异显著(p＜0.05).在细胞免疫方面,皮下免疫组诱导了高水平的特异性的淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4的分泌,与rAdV-SFV-empty免疫组及肌肉和滴鼻免疫组之间差异显著(p＜0.05).本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性,将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体疫苗免疫途径效力评价

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细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：唐青海李胜斌张辉危艳武黄立平吴洪丽刘建波王一平刘丹张志慧刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒...

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒的复制需要细胞内酶类分子参与.有学者推测PCV2的复制依赖宿主细胞周期S期相关酶类分子,但具体是那些酶类分子,目前尚不清楚.方法采用分子生物学方法克隆猪细胞周期S期的主要调控蛋白一一细胞周期蛋白A基因(CycA)和细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2),分别建立CycA或CDK2过表达细胞系及CycA或CDK2低表达细胞系.将PCV2a CL株或PCV2b YJ株接种这四种细胞系,免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和酶联免疫法(ELISA)检测病毒的复制水平,运用流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜分析蛋白定位.

关键词：

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鸭肠炎病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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中国兽医杂志 2013年第1期49卷 9-12页

作者：李慧昕刘胜旺韩宗玺邵昱昊刘晓丽华育平刘娣孔宪刚东北林业大学博士后流动站黑龙江省农业科学院博士后工作站黑龙江哈尔滨150086 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆... 详细信息

应用截短表达的鸭肠炎病毒(DEV)VP5-C蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合及筛选,获得4株稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞株,命名为1B5、3A1、4F9、6F6。抗体亚类鉴定表明,4株单克隆抗体均为IgG、k链。间接免疫荧光检测结果表明,4株单克隆抗体均能够与DEV感染CEF发生特异性反应,而不与CEF对照发生反应。Western blot检测,4株单克隆抗体均能够识别大小约为150kDa的蛋白,说明4株单抗隆抗体是特异性识别VP5蛋白的抗体。DEV VP5蛋白单克隆抗体的制备为进一步鉴定VP5蛋白B细胞抗原表位及VP5蛋白功能研究提供了有效工具。

关键词：鸭肠炎病毒 VP5蛋白单克隆抗体

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猪圆环病毒病防控技术的研究进展

猪圆环病毒病防控技术的研究进展

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福建省第七届猪病学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平郭龙军吴洪丽张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,统称为猪圆环病毒病。本文介绍了引起该疫病的临床症状，流行趋势与毒株变异等问题;探讨了国内外疫苗的研制情况;分析了国产疫苗的特点，免疫程序及注意事项;解决了疫苗使用中判断猪场是否该注射疫苗，如何判断免疫接种是否成功，疫苗最佳免疫程序、保护期的时间，注射后会不会再感染病毒，发病的猪能否使用疫苗等问题。

关键词：猪圆环病毒病病理机制疾病防控疫苗研制合理使用

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猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的...

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军唐青海危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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