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516 篇 期刊文献
306 篇 会议

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822 篇 电子文献
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学科分类号

782 篇 农学
- 736 篇 兽医学
- 62 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 林学
66 篇 工学
- 58 篇 生物工程
- 7 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
- 1 篇 风景园林学（可授工...
62 篇 理学
- 62 篇 生物学
16 篇 医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
65 篇 单克隆抗体
40 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 猪瘟病毒
37 篇 原核表达
34 篇 序列分析
30 篇 猪流行性腹泻病毒
30 篇 抗原表位
27 篇 分离鉴定
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
24 篇 新城疫病毒
21 篇 传染性法氏囊病病...
20 篇 鉴定
19 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 猪圆环病毒
16 篇 免疫原性
15 篇 分离
14 篇 生物学特性

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
153 篇 东北农业大学
115 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
29 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
21 篇 新疆农业大学
19 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 东北林业大学
17 篇 中国农业科学院哈...
15 篇 内蒙古农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
9 篇 中国农业科学院哈...
8 篇 华南农业大学

作者

166 篇 刘长明
141 篇 危艳武
115 篇 王笑梅
112 篇 高玉龙
108 篇 黄立平
98 篇 高宏雷
92 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
79 篇 童光志
77 篇 冯力
73 篇 吴洪丽
71 篇 陈建飞
69 篇 郭龙军
65 篇 时洪艳
61 篇 韩宗玺
59 篇 仇华吉
58 篇 秦立廷
58 篇 王云峰
55 篇 崔尚金
51 篇 石星明

语言

822 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室"

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2的系统评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2的系统评价

引用

2012第四届中国兽药大会

作者：孙元田大勇孟其麟赵碧波王春花李素仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，哈尔滨 150001

猪瘟是一种非常重要的猪传染病，对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实，构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV—SFV—E2在猪体... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病，对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前我们证实，构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV—SFV—E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答，免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。为了进一步评价该嵌合载体病毒的免疫效果及作为理想猪瘟疫苗的可能性，我们又从对靶动物及非靶动物安全性、不同免疫次数、不同免疫剂量、抗腺病毒载体抗体干扰、猪瘟母源抗体干扰及与其它疫苗联合免疫方面，对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV—SFV—E2进行了综合性评价。研究结果显示，该嵌合载体病毒对靶动物猪及非靶动物家兔和小鼠高度安全，免疫后没有任何副反应和组织病理学变化。rAdV-SFV-E2以6.25×105TCID50免疫后能够完全抵抗猪瘟病毒强毒的攻击;当存在猪瘟母源抗体，且抗体阻断率在60％以上时，嵌合载体猪瘟疫苗rAdV—SFV—E2正常免疫后，抗体水平逐渐上升，并于二免后4 w达到峰值，随后趋于稳定，攻毒后所有免疫猪均获得了完全保护，而猪瘟母源抗体阻断率在60％左右的非免疫猪，3～4 w抗体水平降到了阴性临界值以下(抗体阻断率30％以下)，攻毒后所有猪均未得到保护，并于攻毒后10 d左右全部死亡：rAdV—SFV—E2一次免疫后，于攻毒前一直没有检测到猪瘟特异性抗体，但是攻毒后所有猪均没有出现猪瘟临床症状，攻毒后6 d抗体迅速上升到80%左右，对猪瘟病毒的攻击提供了完全的保护;rAdV—SFV—E2与伪狂犬病疫苗同时免疫后相互不影响各自的免疫应答，所有免疫猪均产生了高水平的猪瘟抗体和伪狂犬病抗体，并对猪瘟病毒的攻击提供了完全的保护;rAdV—SFV—E2免疫后不影响再次免疫和其它腺病毒的免疫;BVDV抗体不影响该嵌合载体病毒的增殖。本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性，将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体病毒疫苗免疫免疫功能系统评价

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禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立

引用

第三届（2012）中国白羽肉鸡产业发展大会暨第二届全球肉鸡产业论坛

作者：负炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.... 详细信息

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/ML,且与禽类常见的病毒(IBV,MDV ILTV等)无交叉反应。动物感染实验结果表明该方法可在感染动物12天后有效检测泄殖腔分泌物中的ALV。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法符合率分别为96.5%和93.8%。结果表明,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。

关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA

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蛋鸡J亚群禽白血病病毒3'非编码区序列特征分析

蛋鸡J亚群禽白血病病毒3'非编码区序列特征分析

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：高玉龙贠炳岭秦立廷潘伟王永强高宏雷祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

前言从2004年开始,我国地方品种鸡出现ALV-J感染病例的报道,随后J亚型禽白血病在我国蛋鸡群中出现。尤其是自2007年开始,我国各地陆续报道一种严重危害蛋种鸡和商品蛋鸡的血管瘤型白血病。为了研究蛋鸡群感染ALV-J的来源及其变异趋势,... 详细信息

前言从2004年开始,我国地方品种鸡出现ALV-J感染病例的报道,随后J亚型禽白血病在我国蛋鸡群中出现。尤其是自2007年开始,我国各地陆续报道一种严重危害蛋种鸡和商品蛋鸡的血管瘤型白血病。为了研究蛋鸡群感染ALV-J的来源及其变异趋势,我们对国内多个鸡场进行调研采样,进行病毒分离鉴定,对2008-2010年分离的ALV-J流行株的3'非编码区(3'UTR)进行了系统分析。材料和方法2008-2009年,东北地区部分养禽场陆续出现J亚群禽白血病疑似病例,实验室对临床上同时见有增生性结节和血管瘤症状的病料接种DF-1细胞进

关键词：禽白血病病毒非编码区分离株编码区序列特征分析

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禽呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

禽呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：孙美玉秦立廷高玉龙祁小乐高宏雷王永强王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室兽医生物技术国家重点实验室

前言禽呼肠孤病毒(Avian Reovirus,ARV)感染鸡主要引起病毒性关节炎、腱鞘炎、矮小综合症、呼吸道病、肠道疾病、吸收障碍综合征等,可造成养禽业的重大损失。该病毒既可以水平传播也可以垂直传播,其临床表现与病毒毒株、毒力或感染宿主... 详细信息

前言禽呼肠孤病毒(Avian Reovirus,ARV)感染鸡主要引起病毒性关节炎、腱鞘炎、矮小综合症、呼吸道病、肠道疾病、吸收障碍综合征等,可造成养禽业的重大损失。该病毒既可以水平传播也可以垂直传播,其临床表现与病毒毒株、毒力或感染宿主有关。目前常用于ARV的实验室诊断方法主要有病毒分离、ELISA、RT-PCR、病毒中和实验等,但这些方法操作麻烦、实验周期长且不能实现对病毒的定量检测。随着分子生物学技术的快速发展,出现许多新的检测方法,其中荧光定量PCR技术具有快速、灵敏、特异性强、可定量等优点。本研究根据GenBank中发表的S1基因组序列设计了1对针对ARV sigmaC基

关键词：禽呼肠孤病毒 RT-PCR TaqMan 检测方法标准品

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猪圆环病毒(PCV)2a/2b亚型毒株病毒灭活疫苗及其重组Cap蛋白亚单位疫苗的交互免疫试验

猪圆环病毒(PCV)2a/2b亚型毒株病毒灭活疫苗及其重组Cap蛋白亚单...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：付玉洁郭龙军黄立平危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为评价猪圆环病毒(PcV)2a／2b两种基因型毒株及其重组cap蛋白(rCap)之间的交互免疫效果，本研究采用PCV2a-LG和PCv2b-YJ株制备了2种病毒灭活疫苗，及其重组杆状病毒表达的2种C印蛋白(PCv2a-rap和PCv2b-rap)亚单位疫苗。选用8周龄BALB／c... 详细信息

为评价猪圆环病毒(PcV)2a／2b两种基因型毒株及其重组cap蛋白(rCap)之间的交互免疫效果，本研究采用PCV2a-LG和PCv2b-YJ株制备了2种病毒灭活疫苗，及其重组杆状病毒表达的2种C印蛋白(PCv2a-rap和PCv2b-rap)亚单位疫苗。选用8周龄BALB／c鼠165只，随机分成11组，每组15只，用上述4种疫苗各免疫2组，以Pcv2a或Pcv2b毒株攻毒。攻毒后，所有鼠均未见肉眼可见的临床症状和病理变化。采用IPMA法检测抗体，4种疫苗于免疫第3周抗体转阳，第5周抗体效价达到1：200～1：800倍，其中Pcv2a-rCap免疫组抗体效价最高。2种灭活苗和Pcv2a-rCap免疫组攻击同型或异型毒株均可获得完全保护。以Pcv2a和Pcv2b各为指示毒对病毒抗血清和r(=印蛋白抗血清进行交叉中和试验，同型毒株与同型血清的中和抗体效价均高于异型毒株。病理观察显示，免疫鼠均未见明显病理变化，攻毒对照鼠肺脏出现一定程度的病理损伤。本研究表明，病毒灭活疫苗及其rap亚单位疫苗对PcV2a和PcV2b可提供交叉保护。

关键词：猪圆环病毒病毒灭活疫苗重组Cap蛋白交互免疫

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抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

抗猪输血传播病毒1型(PTTV1)Cap蛋白单克隆抗体制备及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：张龙刘建波黄立平郭龙军危艳武唐青海吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not ... 详细信息

为表达猪输血传播病毒1型(PTTV1)cap蛋白用于单克隆抗体(MAb)的制备，以含PTTV1全长基因组的质粒(pMD18-TTV1-SY13)为模板，用高保真PCR法扩增PTTV1-ORF1(1501～2475 nt)编码的Cap蛋白C末端截短序列(324 aa)，引物两端设计了salI和Not I酶切位点，将PcR产物克隆到pGEx-6P-1载体，构建的重组质粒命名为pGEx-TTV1-ORF1-c1。将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后进行诱导表达，获得了含GST标签的PTTv1-rCap重组融合蛋白，经SDS-AGE电泳分析和western blOt鉴定，目的蛋白获得了高效表达，分子量约为64．0kDa，以包涵体形式存在。用纯化的重组蛋白免疫Balb／c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术获得了8株稳定分泌抗PTTv1rCap蛋白的杂交瘤细胞株，依次命名为1H4、1E9、1E11、4G12、5c5、788、8c2、8G2，MAb亚类鉴定均为IgG1，轻链为K型;MAb培养上清效价为400～3200倍，腹水为4．0×105～6．4×1 06倍;有7株单抗与PTTVl=Cap蛋白产生特异性反应，另1株MAb(1E11)呈阴性，可能针对构象表位。为验证8株单抗与真核表达的cap蛋白的免疫反应性，将全长与截短的PTTV1-0RF-基因片段克隆到pcDNA3-1/V5-His TOPO表达载体，转染293T细胞进行蛋白表达，采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测表明，这8株MAb均能够与表达的c印蛋白产生特异性反应。本研究表达的PTTV1-Cap蛋白及制备的MAb，为该病毒诊断方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础。

关键词：猪输血传播病毒重组cap蛋白单克隆抗体抗性鉴定

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非洲猪瘟病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

非洲猪瘟病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

引用

中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛

作者：崔尚金胡泉博刘业兵中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室中国兽医药品监察所

将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒Ⅱ型.典型猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合... 详细信息

将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒Ⅱ型.典型猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪捷申病毒、猪脑心肌炎病毒等,结果只有ASFV能够扩增出552bp的目的片段。敏感性试验表明纳米PCR检测技术是常规PCR检测技术敏感性的1000倍以上,最低核酸拷贝数检出量可以达到10 copy。采用该方法对中国黑龙江、吉林和河南3个省份的8个地区临床送检的69份样品进行检测,检测结果显示均为阴性,在以上3个地区均未发现ASFV病毒感染情况。

关键词：纳米PCR 非洲猪瘟 P54基因

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猪瘟病毒E2蛋白和猪RACK1相互作用的鉴定

猪瘟病毒E2蛋白和猪RACK1相互作用的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：凌理军仇华吉李素董泓贺番冯烁廖亚金申梁孙元翁长江中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为筛选和鉴定与猪瘟病毒(csFv)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白，采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与猪瘟病毒csFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RAcKl蛋白，经共转化试验和GsTpull-down试验进一步证实两者可以特异性结合，且... 详细信息

为筛选和鉴定与猪瘟病毒(csFv)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白，采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与猪瘟病毒csFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RAcKl蛋白，经共转化试验和GsTpull-down试验进一步证实两者可以特异性结合，且共聚焦试验表明两者共定位于细胞的细胞浆。本研究证实E2蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用，RACK1在CSFV感染过程中所发挥的功能有待进一步研究。

关键词：猪瘟病毒E2蛋白猪宿主蛋白酵母双杂交猪巨噬细胞表达文库

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稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

稳定表达猪瘟病毒Npro蛋白PK-1 5细胞系的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：凌理军李素李永锋杨硕廖亚金孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418... 详细信息

为构建稳定表达猪瘟病毒(CSFV)Npro蛋白的PK-15细胞系，本研究采用PCR方法，以pOKl2／F1-9质粒为模板扩增Npro基因，并引入Flag标签序列，将其连到plRES2-EGFP载体，构建重组质粒pGFP-Npro;通过脂质体将***转染至PK-15细胞中，利用G418加压筛选、纯化得到稳定表达Npro蛋白的细胞系;连续传代30代后，进行RT—PCR、Western blot和激光共聚焦试验，结果表明获得了稳定表达CSFV Npro蛋白的PK—15细胞系。该细胞系可应用于免疫共沉淀与N印蛋白相互作用的宿主蛋白，为进一步研究CSFV N印的功能奠定了基础。

关键词：猪瘟病毒细胞系蛋白表达基因定位

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR株不同代次水平的毒力比较试验

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：危艳武范培虎郭龙军吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征... 详细信息

为了阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HBR毒株在体外传代过程中发生的毒力及遗传变异情况，本试验采用第5代、10代和125代PRRSV-HBR株病毒进行了人工感染试验。结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征”为特点的症候群，第5代毒株感染组死亡率达40％(2／5)，第10代感染组症状明显减轻且无死亡，第125代毒株感染组基本无临床症状。这3个代次的毒株感染组于第3 d检测病毒血症呈阳性，第7～14 d到达高峰，第125代于21 d消失，较第5和10代毒株提前1 w。病毒感染后抗原检测主要分布于脾脏、扁桃体、淋巴结等组织，第5和10代毒株感染组脏器出现严重的病理损伤，第125代毒株感染组仅见轻微病理损伤。对3个代次毒株的ORF5、ORF6和ORF7测序显示，仅在ORF5出现了3个氨基酸位点突变，第29位：第5、10代为缬氨酸一第125代为丙氨酸;第32位：第5、125代为丝氨酸，第10代为甘氨酸;第196位：第5、10代为谷氨酰胺→第125代为精氨酸。研究表明，低代次毒株能够完全复制出典型的“猪高热综合征”，而高代次毒株无明显临床症状，证明该毒株经细胞传代后毒力下降。鉴于高代次毒株感染动物仍能够引起毒血症和持续感染，表明其仍具一定毒力，作为疫苗种毒需要进一步毒力弱化。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株代次水平毒力分析

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