检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李国新田志军周艳君于海童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(SI virus,SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前,包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。猪流感的控制不仅有经济上的意义,更有其深远的公共卫生学意

关键词：猪流感病毒 DNA疫苗分子佐剂 C3d

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质粒DNA与rPRV-HA联合免疫增强了小鼠对猪流感病毒攻击的保护效力

质粒DNA与rPRV-HA联合免疫增强了小鼠对猪流感病毒攻击的保护效力

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首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛

作者：李国新周艳君于海田志军闫丽萍童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(SI virus,SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前,包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。而且,猪是禽、猪、人流感病毒的易感宿主,可最大限度地被人等

关键词：猪流感病毒 DNA疫苗 C3d Prime-boost免疫策略

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IBDV强、弱毒VP2诱饵载体构建及在酵母双杂交系统中自激活作用的检测

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中国预防兽医学报 2008年第1期30卷 1-4页

作者：李铁强高玉龙高宏雷邓小芸王笑梅王立群中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室东北农业大学生命科学学院微生物系黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学生命科学学院微生物系

采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。... 详细信息

采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST-32-Gxvp2和pDEST-32-Gtvp2,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用。为下一步利用酵母双杂交方法从鸡法氏囊B淋巴细胞和鸡胚成纤维细胞cDNA表达文库中筛选与强、弱毒VP2诱饵载体作用的分子奠定了基础。

关键词： IBDV 酵母双杂交诱饵载体自激活

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鸡传染性喉气管炎研究进展

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兽医导刊 2008年第11期 26-29页

作者：王云峰石星明王玫童光志杨桂花孙鹏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院上海兽医研究所上海200232

鸡传染性喉气管炎（ILT）是一种由α-疱疹病毒，即鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的鸡的急性上呼吸道传染病。本病的特征为呼吸困难、喘气、咳出带血分泌物、喉部和气管黏膜肿胀、出血，并形成糜烂，该病急性暴发时的发病率为90％～... 详细信息

鸡传染性喉气管炎（ILT）是一种由α-疱疹病毒，即鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的鸡的急性上呼吸道传染病。本病的特征为呼吸困难、喘气、咳出带血分泌物、喉部和气管黏膜肿胀、出血，并形成糜烂，该病急性暴发时的发病率为90％～100％，死亡率为5％～70％（平均20％），蛋鸡的产蛋量明显下降，是危害养禽业的重要疫病之一，被国际兽医局在《国际动物卫生法典》1999年版中列为B类疾病。

关键词：鸡传染性喉气管炎病毒《国际动物卫生法典》呼吸道传染病疱疹病毒呼吸困难 B类疾病分泌物发病率

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传染性法氏囊病病毒血清2型23/82株VP5蛋白的原核表达及多克隆血清的制备

传染性法氏囊病病毒血清2型23/82株VP5蛋白的原核表达及多克隆血...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：秦立廷祁小乐高宏雷高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

本实验构建传染性法氏囊病病毒(IBDV)血清2型23/82株非结构蛋白vp5基因的原核表达质粒,在大杆菌中进行了有效表达,并制备多克隆血清。利用EcoRⅠ和XhoⅠ双切PUC57-23/82VP5质粒,获得23/82株vp5基因片段,连接到同样处理的原核表达质粒pET... 详细信息

本实验构建传染性法氏囊病病毒(IBDV)血清2型23/82株非结构蛋白vp5基因的原核表达质粒,在大杆菌中进行了有效表达,并制备多克隆血清。利用EcoRⅠ和XhoⅠ双切PUC57-23/82VP5质粒,获得23/82株vp5基因片段,连接到同样处理的原核表达质粒pET-28a,经酶切鉴定获得重组质粒pET28a-23/82-vP5,转化到宿主BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot表明目的蛋白获得表达,分子量大小为23 kDa。利用Ni-NTA柱纯化,复性后免疫8周龄BALB/c小鼠,3次免疫后采血,间接ELISA检测血清抗体效价为1:1×105;Western blot分析能够与纯化蛋白发生特异性反应,具有良好的免疫原性。23/82株VP5蛋白的表达和多克隆血清的制备为研究不同血清型VP5蛋白在致病性中的差异提供有力工具,同时为深入研究VP5蛋白的结构和功能奠定基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP5 原核表达多克隆血清

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鸡传染性法氏囊病病毒Gt株vp5基因缺失株感染性克隆的构建

鸡传染性法氏囊病病毒Gt株vp5基因缺失株感染性克隆的构建

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：秦立廷祁小乐高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Birnaviridae)禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组由A、B两个节段组成,编码4个结果VP1-VP4和非结构蛋白VP5。已有报道,VP5蛋白在病毒复制和体内外致病性中发挥重要作用,其... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(IBDV)是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Birnaviridae)禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组由A、B两个节段组成,编码4个结果VP1-VP4和非结构蛋白VP5。已有报道,VP5蛋白在病毒复制和体内外致病性中发挥重要作用,其分子机制至今不清楚。本研究利用体外定点突变法,缺失IBDVGt株VP5基因。在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGG的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtA△VP5HRT,该感染性克隆与pCAGGmGtBHRT共转染DFⅠ细胞。RT-PCR、间接免疫荧光、均显示拯救出了重组IBDV。IBDV非结构蛋白VP5基因缺失感染性克隆的成功构建为从分子水平上深入研究5基因功能奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP5 核酶结构病毒拯救

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DNA疫苗免疫增强技术的比较研究

DNA疫苗免疫增强技术的比较研究

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第六届全国免疫学学术大会

作者：曾伟伟石星明王云峰王玫黄婷婷高宏博中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

自1990首次发现肌肉注射DNA盐溶液后可自发转染肌细胞以来,DNA免疫已经有了巨大的发展。然而,简单的肌肉注射被认为是一种低效的免疫途径,现已有各种改进方法,其中最常用和最有效的就是电穿孔法和基因枪投递法。然而,这两者都受到条件... 详细信息

自1990首次发现肌肉注射DNA盐溶液后可自发转染肌细胞以来,DNA免疫已经有了巨大的发展。然而,简单的肌肉注射被认为是一种低效的免疫途径,现已有各种改进方法,其中最常用和最有效的就是电穿孔法和基因枪投递法。然而,这两者都受到条件的限制。纹身法是DNA多种免疫方法中一种较为经济实用的方法,改良的纹身机已在医学研究上广泛应

关键词： DNA 抗体水平疫苗免疫比较研究

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9株鸡马立克氏病毒野毒株在鸭胚成纤维细胞上的培育及鉴定

9株鸡马立克氏病毒野毒株在鸭胚成纤维细胞上的培育及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张艳萍刘长军李晶梅刘爱玲施维松闫福海秦运安中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓,无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF),蚀斑克隆纯化后,随机选1个单克隆,再接种DEF增殖,获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株,分别命名为ZY、FY、SY、YC... 详细信息

2006年～2007年我们从现地暴发鸡马立克氏病(MD)鸡场采集发病鸡羽髓,无菌处理后分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF),蚀斑克隆纯化后,随机选1个单克隆,再接种DEF增殖,获得9株适应DEF生长的鸡马立克氏病毒(MDVs)野毒株,分别命名为ZY、FY、SY、YC、CZ、MS、CGZ、QQHE和DH株。应用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增这9株的132bp重复序列,发现这9株MDVs基因组的132bp重复序列的拷贝数均为2个拷贝,符合MDVS强毒株的特点。从分离的9株MDVS中选择5株人工感染5日龄白来航SPF鸡,感染鸡60d后剖杀,发病鸡大多可见内脏肿瘤;其中3株MD阳性率达100%。我们培育并鉴定了9株适应DEF生长的MDVs流行野毒株,为监测我国现地MD毒株的变异和评价现有疫苗对MD保护效果提供有价值的研究材料。

关键词：马立克氏病毒培育及鉴定 meq基因 132bp重复序列

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新城疫流行病学变化及综合防制进展概况

新城疫流行病学变化及综合防制进展概况

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：刘怀然孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施,如对强

关键词：基因型综合防制新城疫弱毒苗母源抗体疫苗毒紧急免疫接种反向遗传技术流行病

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猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定

猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：张超范崔尚金戚亭陈长木苗岚飞谢红玲周盛华岳丰雄刘长明刘霓虹中国农业科学院哈尔滨兽医院所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到一株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-B02007株。免疫过氧化物酶单... 详细信息

从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到一株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-B02007株。免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PPV阳性血清中和。免疫电镜可清晰见到聚集成团的,大小不一的病毒粒子,近似圆形,无囊膜,直径大小约20～22nm。该分离株经ST细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第30代后毒价达107.0 TCID50/mL以上,且毒价和血凝价稳定.测序结果表明PPV-BQ2007株VP2基因与NCBI公布的皮炎型毒株Kresse株的同源性最高,同源性高达99.8%,在系统进化分支上处于同一个分支。PPV-BQ2007株传代细胞培养适应株的成功培育和鉴定,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究等奠定了良好基础。

关键词：猪细小病毒分离鉴定毒株培育

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