检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会2007年学术年会

作者：崔红玉王云峰石星明童光志兰德松何来仇华吉刘长军王玫中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001 河北北方学院动物科技学院动物医学系张家口 075131 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨 150001

本研究通过构建表达Eco-gpt(Xanthine-guaninephosphoribosyl transferase，XGPRT，gpt)的哺乳动物细胞基因转移遗传选择标记(1.3kb)和带有细菌人工染色体(BacterialArtificial Chromosome，BAC)基本功能基因序列的鸡马立克氏病病毒重组病毒转移载体pUAB-gpt-BAC11，将重组病毒转移栽体与鸡马立克氏病病毒细胞总DNA共转染鸡胚成纤维细胞，在选择培养基中经过加压筛选，获得并纯化重组病毒;将重组病毒细胞总DNA电转化大肠杆菌，筛选共获得38个BAC分子克隆化病毒，提取BAC-DNA转染鸡胚成纤维细胞以拯救重组病毒。结果，再次启动病毒感染，拯救了重组鸡马立克氏病病毒。本研究成功构建了鸡马立克氏病病毒814株基因组全长感染性细菌人工染色体，为病毒的反向遗传操作提供技术平台。

关键词：鸡马立克氏病病毒细茵人工染色体分子克隆化病毒病毒感染分子克隆

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鸡贫血病毒结构蛋白单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

鸡贫血病毒结构蛋白单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：王晓艳高宏雷高玉龙程宇王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病实验室新疆农业大学

鸡贫血病毒（Chicken anemia virus,CAV）为圆环病毒科（Circoviridae）环形病毒属（Gyrovirus）的代表成员,也是引起鸡群免疫抑制的一个重要病原体。该病毒可以由种蛋垂直传播给子代,从而导致2周龄以内无母源抗体的幼鸡患病,该病以淋...

鸡贫血病毒（Chicken anemia virus,CAV）为圆环病毒科（Circoviridae）环形病毒属（Gyrovirus）的代表成员,也是引起鸡群免疫抑制的一个重要病原体。该病毒可以由种蛋垂直传播给子代,从而导致2周龄以内无母源抗体的幼鸡患病,该病以淋巴萎缩、贫血为特征,主要损害中枢免疫器官,从而导致免疫抑制。该病感染成年鸡,一般不引起临床症状,但可以导致疫苗免疫失败及鸡群对其它烈性传染病（如新城疫、禽流感等）易感性增加,从而给养禽业带来巨大经济损失。目前,该病几乎遍.布世界上所有养禽国家,给养禽业带来巨大经济损失。

关键词：

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我国传染性法氏囊病病毒新型变异株分析研究

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中国预防兽医学报 2019年第11期41卷 1164-1169页

作者：范林进王雨龙吴甜甜李凯姜楠高玉龙高立刘长军崔红玉潘青张艳萍刘玉凤孙先本刘俊启王笑梅祁小乐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150069 世界动物卫生组织传染性法氏囊病参考实验室黑龙江哈尔滨150069 法国诗华动物保健公司北京100102 江苏高校动物重要疫病与人畜共患病协同创新中心江苏扬州225009

近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7... 详细信息

近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7个省的32个IBDV代表株的VP2基因高变区进行了遗传演化分析,结果显示,IBDV新型变异株虽然属于变异株分支,但却不同于美国早期变异株,其形成了一个独立的亚群。动物回归试验结果显示,IBDV新型变异株不致死鸡,但造成其中枢免疫器官法氏囊严重萎缩,B淋巴细胞崩解坏死,复制出了非典型IBD的症状。本研究测定了IBDV新型变异株的最低致病剂量,并依据病毒自身特殊性状,首次提出用法氏囊半数萎缩量(BAD50)作为IBDV新型变异株的病毒效价单位。本研究为IBDV新型变异株的流行规律监测和综合防控提供了数据支撑。

关键词：非典型传染性法氏囊病传染性法氏囊病病毒新型变异株法氏囊半数萎缩量

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鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性

鹅β-防御素3基因的分离、鉴定及其表达产物的生物学特性

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中国林牧渔业经济学会饲料经济专业委员会第八届学术交流大会

作者：张名岳周财源韩宗玺邵昙昊刘胜旺马得莹东北农业大学动物营养研究所哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001 东北农业大学动物营养研究所哈尔滨150030

为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因，并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白，进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性，本研究利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段，其cDNA片段大小为182bp，编码60个氨基酸残基。经同源性分析... 详细信息

为了克隆鹅β-防御素(AvBD)3基因，并在原核表达重组鹅AvBD3蛋白，进一步研究鹅AvBD3蛋白的生物学特性，本研究利用RT-PCR方法从鹅脾脏和法氏囊组织中扩增到鹅AvBD3基因片段，其cDNA片段大小为182bp，编码60个氨基酸残基。经同源性分析发现鹅AvBD3氨基酸序列与鸡AvBD3氨基酸序列同源性最高，为100％。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEx-6p-1的BamH Ⅰ和Sa l Ⅰ双酶切位点上，构建重组表达质粒pGEX-goose AvBD3。将重组质粒转化大肠杆菌BL21，于37℃用IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳表明，重组鹅AvBD3蛋白在原核高效表达(分子量约31 kDa)。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性，结果显示，重组鹅AvBD3蛋白具有广谱的抗菌活性，对12种细菌，包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用。高盐离子浓度显著降低重组鹅AvBD3蛋白的抗菌活性。此外，该重组蛋白的溶血活性极低，并对酸碱度具有较高的稳定性。

关键词：鹅β-防御素3基因融合蛋白生物学特性抗菌活性溶血活性

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猪传染性胃肠炎病毒NSP8蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的初步鉴定

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中国畜牧兽医 2015年第2期42卷 358-364页

作者：董慧张鑫陈建飞时洪艳石达常铁城谷凤丽徐天王智琴刘明春冯力沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 首都医科大学基础医学院北京100069

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经... 详细信息

为鉴定猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)NSP8蛋白的抗原表位,本研究对GST-NSP8重组蛋白进行了原核表达,并用纯化后的重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾脏,采用常规杂交瘤细胞融合方法,经3次亚克隆后制备了1株稳定分泌抗NSP8蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。分泌的单克隆抗体亚类鉴定其重链为IgG1型,轻链为κ链;杂交瘤细胞培养上清的效价为1∶3 200。Western blotting试验结果表明该单克隆抗体能识别原核及真核表达的NSP8重组蛋白。利用截短表达的方法对NSP8蛋白进行抗原表位的鉴定,初步确定了单克隆抗体针对的抗原表位序列为31SPQILKQLTKAFNIAKSDFEREASV55。本研究制备的单克隆抗体及对抗原表位的鉴定,为TGEV NSP8蛋白相关功能的研究奠定了基础。

关键词：猪传染性胃肠炎病毒 NSP8基因单克隆抗体抗原表位

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多重PCR方法用于检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断方法的建立

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养猪 2010年第3期 41-44页

作者：岳丰雄崔尚金冉多良戚亭周盛华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-... 详细信息

本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的多重PCR方法(mPCR)。借助于Oligo6.0引物设计软件,设计了4对引物分别用于扩增PCV2ORF2基因353bp片段、PPVNS-1基因271bp片段、PRRSVMN基因美洲型434bp片段、PRVgB基因194bp片段。通过人为混合以上4种病毒进行特异性及敏感性试验,结果表明,该方法具有很好的特异性和敏感性。对猪瘟病毒、大肠杆菌和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性;该mPCR方法对PPV的最低检测量为8.64×10-3μg,PRV的最低检测量为2.36×10-3μg,PRRSV的最低检测量为3.68×10-3μg,PCV2的最低检测量为2.90×10-4μg。该方法的建立对临床上PCV2、PPV、PRV、PRRSV的鉴别诊断以及以上这4种病毒的流行病学调查具有十分重要的意义。

关键词：多重PCR方法猪圆环病毒2型猪细小病毒猪伪狂犬病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒

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PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会

作者：苗岚飞崔尚金张超范胡守萍陈长木周盛华岳丰雄戚亭谢红玲张垚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室东北农业大学动物医学学院

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID=10～7/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于... 详细信息

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID=10～7/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0、7、14、28、35天进行PCV2接种。阴性对照组和一次性攻毒组分别在接种后7、14、28和42天处死,连续攻毒组在首次接种后42天处死。试验过程中每天观察、记录小鼠生活状态并在处死前进行体重测量。脱颈椎法分批处死小鼠并采集心、肝、脾、肺、肾、胸腺、淋巴、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、舌、脑等组织进行病理切片观察。用PCR方法对机体中PCV2病毒的分布和含量进行分析,用ELISA试剂盒检测血清中的抗PCV2抗体水平。通过试验发现:三组试验小鼠体重均有增加,其中阴性对照组小鼠体重增长比率大于一次性攻毒组和连续攻毒组,而一次性攻毒组又明显高于连续攻毒组。PCR检测结果显示一次性攻毒组和连续攻毒组体内存在病毒复制并有其特定的转归规律,对照组体内无病毒复制。ELISA方法证实一次性攻毒组和连续攻毒组均产生抗PCV2抗体,但连续攻毒组抗体水平要明显高于一次性攻毒组,整个实验过程中对照组未检测到抗PCV2抗体。将采集的病料进行组织切片观察发现一次性攻毒组和连续攻毒组有明显的微观病理损伤,损伤最严重的器官是淋巴结,对照组未发现明显病理损伤。据此,根据攻毒组小鼠体重增长比率的差异、淋巴结内持续的病毒复制、血清PCV2抗体阳性、明显的微观病理损伤得到小鼠已经感染了PCV2的结论,并初步探讨了小鼠感染PCV2的检测标准。本试验成功建立了PCV2感染SPF昆明小鼠的动物模型,为PCV2的致病机理研究、疫苗研究等奠定了理论基础。

关键词： SPF昆明小鼠 PCV2 微观病理损伤动物模型

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猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：袁婧刘长明魏萍东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)于1997年首先被发现,并被确认为是断奶仔猪多系统衰竭综合征(Post-weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的重要病原。各国学者相继对PCV2病原学进行深入研究发现,除PMWS外,PCV2感染... 详细信息

关键词：混合感染 PRRSV 猪圆环病毒猪肺炎支原体断奶仔猪多系统衰竭综合征

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重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

重组猪圆环病毒2型Rep/Rep’和Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护性研究

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动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：刘丹王一平吴洪丽危艳武唐青海刘建波李胜斌魏萍刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学动物医学院

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核... 详细信息

1引言猪圆环病毒(Porcine circovirus type,PCV)分为PCV1和PCV2两个血清型,其中PCV1广泛存在于猪群不引起临床疾病,PCV2是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。PCV2又分为PCV2a、PCV2b和PCV2c亚型,其基因组全长1766～1768核苷酸(nt),由2个大的反义开放阅读框架(ORF1和ORF2)构成。PCV2-ORF2由702nt编码233个氨基酸(aa),Cap蛋白构成病毒核衣

关键词：亚单位疫苗 Cap Rep/Rep PCV 猪圆环病毒免疫保护性

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PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只.阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID50=107/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第... 详细信息

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只.阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID50=107/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0、7、14、28、35天进行PCV2接种。阴性对照组和一次性攻毒组分别在接种后7、14、28和42天处死,连续攻毒组在首次接种后42天处死.试验过程中每天观察、记录小鼠生活状态并在处死前进行体重测量。脱颈椎法分批处死小鼠并采集心、肝、脾、肺、肾、胸腺、淋巴、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、舌、脑等组织进行病理切片观察。用PCR方法对机体中PCV2病毒的分布和含量进行分析,用ELISA试剂盒检测血清中的抗PCV2抗体水平。通过试验发现:三组试验小鼠体重均有增加,其中阴性对照组小鼠体重增长比率大于一次性攻毒组和连续攻毒组,而一次性攻毒组又明显高于连续攻毒组。PCR检测结果显示一次性攻毒组和连续攻毒组体内存在病毒复制并有其特定的转归规律,对照组体内无病毒复制。ELISA方法证实一次性攻毒组和连续攻毒组均产生抗PCV2抗体,但连续攻毒组抗体水平要明显高于一次性攻毒组,整个实验过程中对照组未检测到抗PCV2抗体。将采集的病料进行组织切片观察发现一次性攻毒组和连续攻毒组有明显的微观病理损伤,损伤最严重的器官是淋巴结,对照组未发现明显病理损伤。据此,根据攻毒组小鼠体重增长比率的差异、淋巴结内持续的病毒复制、血清PCV2抗体阳性,明显的微观病理损伤得到小鼠已经感染了PCV2的结论,并初步探讨了小鼠感染PCV2的检测标准。本试验成功建立了PCV2感染SPF昆明小鼠的动物模型,为PCV2的致病机理研究、疫苗研究等奠定了理论基础。

关键词： SPF昆明小鼠 PCV2 微观病理损伤动物模型

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