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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

516 篇 期刊文献
306 篇 会议

馆藏范围

822 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

782 篇 农学
- 736 篇 兽医学
- 62 篇 作物学
- 19 篇 畜牧学
- 1 篇 园艺学
- 1 篇 林学
66 篇 工学
- 58 篇 生物工程
- 7 篇 化学工程与技术
- 1 篇 林业工程
- 1 篇 风景园林学（可授工...
62 篇 理学
- 62 篇 生物学
16 篇 医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 6 篇 公共卫生与预防医...
- 4 篇 临床医学
- 4 篇 药学(可授医学、理...
- 2 篇 医学技术（可授医学...
1 篇 法学
- 1 篇 政治学

主题

76 篇 猪圆环病毒2型
65 篇 单克隆抗体
40 篇 猪繁殖与呼吸综合...
38 篇 猪瘟病毒
37 篇 原核表达
34 篇 序列分析
30 篇 猪流行性腹泻病毒
30 篇 抗原表位
27 篇 分离鉴定
26 篇 抗菌活性
25 篇 重组蛋白
24 篇 新城疫病毒
21 篇 传染性法氏囊病病...
20 篇 鉴定
19 篇 猪细小病毒
18 篇 遗传变异
18 篇 猪圆环病毒
16 篇 免疫原性
15 篇 分离
14 篇 生物学特性

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
153 篇 东北农业大学
115 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
38 篇 中国农业科学院哈...
29 篇 中国农业科学院哈...
25 篇 黑龙江八一农垦大...
24 篇 中国农业科学院上...
21 篇 新疆农业大学
19 篇 中国农业科学院哈...
19 篇 东北林业大学
17 篇 中国农业科学院哈...
15 篇 内蒙古农业大学
13 篇 中国农业科学院哈...
12 篇 中国农业科学院
10 篇 哈尔滨师范大学
9 篇 中国农业科学院哈...
8 篇 华南农业大学

作者

166 篇 刘长明
141 篇 危艳武
115 篇 王笑梅
112 篇 高玉龙
108 篇 黄立平
98 篇 高宏雷
92 篇 刘胜旺
85 篇 祁小乐
79 篇 童光志
77 篇 冯力
73 篇 吴洪丽
71 篇 陈建飞
69 篇 郭龙军
65 篇 时洪艳
61 篇 韩宗玺
59 篇 仇华吉
58 篇 秦立廷
58 篇 王云峰
56 篇 liu sheng-wang
54 篇 崔尚金

语言

822 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室"

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猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫荧光诊断方法的建立及其应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫荧光诊断方法的建立及其应用

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：袁婧刘长明魏萍危艳武张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学动物医学院

以临床"高热综合征"病例中分离的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)-HBR变异株接种试验猪制备抗血清,采用硫酸铵盐析法提取血清中免疫球蛋白(IgG),异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG,建立了一种直接免疫荧光诊断方法(DIFA),... 详细信息

以临床"高热综合征"病例中分离的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)-HBR变异株接种试验猪制备抗血清,采用硫酸铵盐析法提取血清中免疫球蛋白(IgG),异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG,建立了一种直接免疫荧光诊断方法(DIFA),用于病毒感染单层细胞及动物脏器组织切片中抗原检测。本试验对PRRSV感染MARC-145细胞增殖动力学检测结果表明,接种后16h检测到抗原阳性细胞,于60h～72h达到病毒增殖高峰;对病毒人工感染猪脏器组织抗原分布检测结果显示,以腹股沟淋巴结、空肠、睾丸、脾脏、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结和扁桃体抗原阳性检测率较高;对临床10个猪场送检的38份病料平均阳性检出率为63.2%(24/38)。该方法具有特异性强、敏感性和重复性好等特点,与RT-PCR法检测结果符合率为96.3%,对几种已知猪病毒抗原无交叉反应,标记的荧光抗体于4℃保存6个月稳定。DIFA为PRRSV的临床诊断提供了一种快速、便捷、敏感和特异的检测方法。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光抗原检测

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PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

PCV2感染SPF昆明小鼠动物模型的建立

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：苗岚飞崔尚金张超范胡守萍陈长木周盛华岳丰雄戚亭谢红玲张垚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学动物医学学院

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0d分别接种1640培养液1mL和PCV2细胞培养毒1mL(107TCID50/mL),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0... 详细信息

本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只。阴性对照组和连续攻毒组于第0d分别接种1640培养液1mL和PCV2细胞培养毒1mL(107TCID50/mL),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0d、7d、14d、28d、35d进行PCV2接种。阴性对照组和一次性攻毒组分别在接种后7d、14d、28d和42d迫杀,连续攻毒组在首次接种后42d迫杀。试验过程中每天观察、记录小鼠生活状态并在迫杀前进行体重测量。脱颈椎法分批处死小鼠并采集心、肝、脾、肺、肾、胸腺、淋巴、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、舌、脑等组织进行病理切片观察。用PCR方法对机体中PCV2病毒的分布和含量进行分析,用ELISA试剂盒检测血清中的抗PCV2抗体水平。通过试验发现:三组试验小鼠体重均有增加,其中阴性对照组小鼠体重增长比率大于一次性攻毒组和连续攻毒组,而一次性攻毒组又明显高于连续攻毒组。PCR检测结果显示一次性攻毒组和连续攻毒组体内存在病毒复制并有其特定的转归规律,对照组体内无病毒复制。ELISA方法证实一次性攻毒组和连续攻毒组均产生抗PCV2抗体,但连续攻毒组抗体水平要明显高于一次性攻毒组,整个实验过程中对照组未检测到抗PCV2抗体。将采集的病料进行组织切片观察发现一次性攻毒组和连续攻毒组有明显的微观病理损伤,损伤最严重的器官是淋巴结,对照组未发现明显病理损伤。据此,根据攻毒组小鼠体重增长比率的差异、淋巴结内持续的病毒复制、血清PCV2抗体阳性、明显的微观病理损伤得到小鼠已经感染了PCV2的结论,并初步探讨了小鼠感染PCV2的检测标准。本试验成功建立了PCV2感染SPF昆明小鼠的动物模型,为PCV2的致病机理研究、疫苗研究等奠定了理论基础。

关键词： SPF昆明小鼠 PCV2 微观病理损伤动物模型

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PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及应用

PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及应用

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：谭斌刘长明危艳武张超范冉多良刘永刚陆月华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室新疆农业大学动物医学院

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法,研制成PRRSV-IPMA试剂盒。对试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等指标进行了试验,并与进口试剂盒进行了对比。用IPMA法检测PRRS... 详细信息

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体方法,研制成PRRSV-IPMA试剂盒。对试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等指标进行了试验,并与进口试剂盒进行了对比。用IPMA法检测PRRSV试验接种猪血清抗体,第一周抗体检出率为50%,于第二周起抗体检出率为100%,未接种病毒对照组猪血清抗体检测均呈阴性。组装的PRRSV-IPMA试剂盒与国外IDEXX-ELISA试剂盒对42份血清进行平行检测的符合率为83.3%。用本试剂盒对黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场520份血清和6个发病猪场送检的80份血清进行了PRRS抗体检测,8/13猪场抗体阳性率大于50%,2/13猪场为阴性;6个发病场抗体阳性率分布在57.1%～100%;PRRS对我国猪群危害严重。PRRSV-IPMA试剂盒可为流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供一种可靠的技术手段。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA) 抗体检测试剂盒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)持续感染与保护性免疫应答机制

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)持续感染与保护性免疫应答机制

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：谭斌刘长明冉多良危艳武张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室新疆农业大学动物医学院

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是以母猪生殖障碍和仔猪严重呼吸困难导致的高死亡率为特征的一种高度接触性传染病。本病于1987年首次在美国发现,又称"蓝耳病",已流行于世界许多国家和地区,在我国也呈地方流行,对

关键词： PRRSV 保护作用功能区中和抗体滴度抗体依赖性增强作用保护性免疫中和表位猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫应答机制

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猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

猪圆环病毒2型与多病原混合感染的致病性研究进展

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：袁婧刘长明魏萍东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)于1997年首先被发现,并被确认为是断奶仔猪多系统衰竭综合征(Post-weaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的重要病原。各国学者相继对PCV2病原学进行深入研究发

关键词：混合感染 PRRSV PCVAD 猪圆环病毒

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表达猪圆环病毒2型Rep/Rep'蛋白的重组杆状病毒的构建及其鉴定

表达猪圆环病毒2型Rep/Rep'蛋白的重组杆状病毒的构建及其鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：刘丹陆月华吴洪丽危艳武唐青海王一平李胜斌刘建波魏萍刘长明东北农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

摘要猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1编码的Rep蛋白与病毒复制相关,其与转录中剪切所得的小Rep'蛋白是病毒复制所必须的。为了构建表达PCV2-Rep和Rep'蛋白的重组杆状病毒,采用PCR法从病毒感染细胞中扩增Rep和Rep'蛋白基因,并克隆... 详细信息

摘要猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1编码的Rep蛋白与病毒复制相关,其与转录中剪切所得的小Rep'蛋白是病毒复制所必须的。为了构建表达PCV2-Rep和Rep'蛋白的重组杆状病毒,采用PCR法从病毒感染细胞中扩增Rep和Rep'蛋白基因,并克隆到杆状病毒转移载体(pBlueBac4.5/V5-His-TOPO)。将重组质粒与线性化杆状病毒DNA共转染昆虫细胞(Sf-21),经同源重组和蚀斑筛选,获得2株高效表达PCV2-Rep和Rep'蛋白的重组杆状病毒。经3次克隆的重组毒株毒价达7.0×10～7和3.0×10～7pfu/mL。蛋白表达分析表明,PCV2-Rep和Rep'蛋白分子量为36.0 ku和20.4ku,占总蛋白含量的6.2%和10.1%;这两种重组蛋白均可与PCV2抗体产生特异性反应,具有良好的免疫活性。用Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,其纯度达到92.5%和93.6%。本研究获得的PCV2-Rep和Rep'蛋白,为PCV2疫苗免疫与野毒感染之间鉴别诊断及病毒复制机制的研究奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型 Rep/Rep'蛋白杆状病毒表达

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A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

A群猪轮状病毒JS株VP6基因序列分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力东北农业大学生命科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRV JS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约113kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1320bp全基因序列;将其ORF与国内外9... 详细信息

参考GenBank中发表PRV OSU毒株VP6序列ORF两端保守区,设计1对特异引物,以PRV JS株反转录cDNA为模板,通过PCR方法获得约113kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:获得了VP6的1320bp全基因序列;将其ORF与国内外9株PRV VP6基因的ORF进行核苷酸和氨基酸同源性比较,核苷酸同源性在77.11%～91.11%之间,氨基酸的同源性在89.17%～99.15%之间;在氨基酸系统发育进化树中,JS毒株与A131、OSU、CN86毒株亲缘关系较近,为一个进化群。

关键词： PRV VP6基因序列分析

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A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

A群猪轮状病毒JS株VP7基因序列分析

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室东北农业大学生命科学院

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有... 详细信息

根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,VP7基因全长1062bp,含有1个981bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与已知的15个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为74.5%～78.5%和75.2%～83.1%,核苷酸系统发育进化树结果表明,JS毒株与轮状病毒G9型参考毒株ICB2185、O-1亲缘关系较近,分为1个群,表明JS毒株血清型为G9型。目前,我国尚未见猪及其它动物轮状病毒G9型流行株的报道。

关键词：猪轮状病毒 VP7基因序列分析

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实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒

实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：许红喜符芳鲁晶红李曦黑龙江八一农垦大学大庆163319 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

本试验建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测PCV-2.分析表明,10倍系列稀释的标准质粒9个点均在一条直线上,二者相关系数R2＞0.999,扩增效率达到97％.敏感性、特异性及重复性实验证明,批间、批内重复试验的变异系数均小于1.5％;... 详细信息

本试验建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测PCV-2.分析表明,10倍系列稀释的标准质粒9个点均在一条直线上,二者相关系数R2＞0.999,扩增效率达到97％.敏感性、特异性及重复性实验证明,批间、批内重复试验的变异系数均小于1.5％;可检测10-5.5TCID50.40份被检样品,SyReTi-PCR检测阳性率为87.5％,与普通PCR检测的符合率为94.6％,其敏感性是普通PCR 100倍.本研究建立的SyReTi-PCR检测PCV-2的方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性.

关键词： Ⅱ型猪圆环病毒 SyReTi-PCR检测标准曲线 PCV-2方法

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PEDV N蛋白亚细胞定位信号的鉴定

PEDV N蛋白亚细胞定位信号的鉴定

引用

第九届全国病毒学学术研讨会

作者：石达陈建飞时红艳张莎王璐刘随新刘孝珍冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨 150001 东北农业大学生命科学院哈尔滨150030

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