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动物医学进展 2006年第10期27卷 11-14页

作者：孙东波冯力时洪艳陈建飞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得... 详细信息

猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。

关键词：猪流行性腹泻病毒分子生物学分子结构特征病原学血清学诊断技术体液免疫

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抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析

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2006中国科协年会

作者：程宇王笑梅高玉龙高宏雷付朝阳简子健中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室新疆农业大学动物医学院

鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科(Birnaviridae), 禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组包括A、B两个节段,主要结构功能蛋白为VP2和VP3,VP2是其主要的保护性抗原,VP3含群特异性的线性依赖性抗原表位,只能诱导产生微弱的中和性抗体。IBD是一种危害鸡的急性、高度接触性、高死亡率的传染病,感染IBD后能致使其他鸡病疫苗免疫失败,继发或并发细菌病或病毒病的感染,从而造成养鸡业的严重经济损失。此外,IBDV基因组还在不断变异,使得研究者们对其倍加关注,从而更有效地防控该病。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 单克隆抗体(McAb) 抗原表位

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鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

鸡传染性法氏囊病病毒全基因组序列分析及感染性分子克隆构建

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：祁小乐高玉龙高宏雷邓小芸张宁王晓艳王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变...

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的危害世界养禽业的主要传染病之一。本研究采用一步法长距离RT-PCR克隆了IBDV Gt株全基因组,对其核苷酸和氨基酸序列进行了系统分析。A节段同源性95.7%,共有146个核苷酸突变,其中有约37.67%的核苷酸突变发生在VP2,这些突变又主要集中在高变区,占VP2突变总数的58.18%。非编码区相对保守,5’非编码区的前44个核苷酸以及3,非编码区的后36个核苷酸均没有发生突变。Gt与Gx相比,VP2蛋白氨基酸有11处突变,有90.91%（10/11）集中在高变区,第一亲水区1个,七肽区1个,其中Q253H、D279N、A284T和S330R等突变被认为与IBDV超强毒致弱紧密相关。为了进一步研究IBDV的基因功能,本研究在IBDV Gt株全基因组中引入分子标签（A节段:EcoRV酶切位点;B节段:PstI酶切位点）。在基因组两端分别引入锤头状核酶结构（HamRz）和丁肝病毒核酶结构（HdvRz）。将带有分子标签和核酶结构的IBDV基因组插入载体pCAGGS的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGmGtAHRT和pCAGGmGtBHRT,该感染性克隆共转染可高效感染DFⅠ细胞,RT-PCR、间接免疫荧光、电镜检查均显示拯救出了IBDV,且存在分子标签。拯救毒可在CEF上产生CPE,且TCID与Gt毒差异不显著。该感染性克隆转染Vero/E6和Vero/P12,也能成功拯救IBDV。IBDV感染性分子克隆的成功构建为从分子水平上深入研究该病毒的基因功能奠定了基础。

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传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：邓小芸高玉龙高宏雷祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病。IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节...

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病。IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码五种病毒蛋白:VP1、VP2、VP3、VP4和VP5。VP1由B节段编码,具有依赖RNA的RNA聚合酶活性。

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传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：何来王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV）,属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus 1。ILTV能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义。已...

传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV）,属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus 1。ILTV能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义。已有的研究证明ILTV是非常有潜力的禽呼吸道病毒疫苗载体,且gE基因又是疱疹病毒重要的毒力相关基因,将gE蛋白的主要抗原性片段表达于大肠杆菌中,为进一步研究gE基因缺失标记疫苗和病毒感染的监测奠定基础。

关键词：

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传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗免疫鸡对LHLJ04XⅠ株病毒攻击的免疫保护作用

传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗免疫鸡对LHLJ04XⅠ株病...

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志木古丽何来崔红玉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

将表达鸡IFN-γ基因和传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)活载体疫苗接种SPF鸡,用2005年黑龙江分离到的传染性支气管炎病毒LHLJ04XⅠ株进行攻击,该毒株与S1基因的亲本毒株具有相同的致病型,均为肾型,并且二者的遗传... 详细信息

将表达鸡IFN-γ基因和传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)活载体疫苗接种SPF鸡,用2005年黑龙江分离到的传染性支气管炎病毒LHLJ04XⅠ株进行攻击,该毒株与S1基因的亲本毒株具有相同的致病型,均为肾型,并且二者的遗传关系较近,对其进行S1基因系统发育进化树分析时发现,二者可以划分到一个基因群,这提示他们可能有共同的起源,相互之间有可能产生交叉保护,据此评价重组疫苗对异源病毒攻击后的保护率。结果显示,重组疫苗在免疫后1周即可检出ELISA抗体,重组疫苗免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞含量均有显著上升。当用LHLJ04XⅠ株病毒攻击后,免疫鸡的肝脏、肾脏、脾脏及肺脏等脏器的病理损伤程度明显轻于非免疫对照组,排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后的发病率为27.3%(3/11),死亡率为9.1%(1/11),而非免疫对照组的发病率和死亡率分别为100%(11/11)和45.5%(5/11),说明重组疫苗对免疫鸡具有较好的保护效果。体重结果表明攻毒前重组疫苗免疫组和非免疫对照组的体重差异不显著(P>0.05),攻毒以后免疫组体重的增加幅度高于非免疫对照组。以上结果说明,共表达鸡IFN-Y基因和传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒活载体疫苗能对异源毒株的攻击产生较好的免疫保护,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。

关键词：传染性支气管炎重组禽痘病毒免疫保护

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表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒与表达禽流感病毒HA和NA基因重组鸡痘病毒联合免疫对疫苗免疫效果的影响

表达传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒与表达禽流感病毒HA和...

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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：王云峰童光志石星明王玫杨春富徐灵龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室哈尔滨150001

在中国,禽流感重组鸡痘病毒疫苗(H5N1)和传染性喉气管炎重组鸡痘病毒疫苗已经得到中华人民共和国的批准,开始进行商业化生产,用于临床H5N1亚型禽流感、传染性喉气管炎和鸡痘的免疫预防,两种疫苗同时在临床上推广应用要求制定一个合理的... 详细信息

在中国,禽流感重组鸡痘病毒疫苗(H5N1)和传染性喉气管炎重组鸡痘病毒疫苗已经得到中华人民共和国的批准,开始进行商业化生产,用于临床H5N1亚型禽流感、传染性喉气管炎和鸡痘的免疫预防,两种疫苗同时在临床上推广应用要求制定一个合理的免疫程序,以便发挥重组鸡痘病毒载体疫苗的临床效应.本研究就相隔4周接种rFPV-AI和rFPV-ILT的免疫效果,rFPV-AI和rFPV-ILT混合和分两点同时接种的免疫应答进行了研究.结果表明,试验鸡接种rFPV-AI后4周接种rFPV-ILT,对传染性喉气管炎病毒WG株攻击的保护率为60％(6/10),低于rFPV-ILT单独接种组100％(10/10)的保护率;rFPV-AI和rFPV-ILT混合后接种(rFPV-AI*rFPV-ILT)对禽流感病毒强毒攻击的保护率为80％(8/10),对传染性喉气管炎病毒强毒攻击的保护率为70％(7/10),而rFPV-AI和rFPV-ILT分两点同时接种、rFPV-AI单独免疫、rFPV-ILT单独免疫对相应病毒的攻击均能产生完全保护.尽管单纯从疫苗的攻毒保护率上看,上述的接种程序和接种方法获得的保护率之间没有显著差异,但是从临床保护和免疫对象的安全性上考虑还是建议将这两种疫苗分两点同时接种,以避免两种疫苗之间的相互干扰.

关键词：喉气管炎病毒 gB基因重组鸡痘病毒禽流感病毒HA NA基因重组疫苗免疫

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传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：邓小芸高玉龙高宏雷祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码五种病毒蛋白:VP1、VP2、VP3、VP4和***1由B节段编码,具有依赖RNA的RNA聚合酶活性.其它四种病毒蛋白由A节段编码,VP4为病毒自身蛋白酶,VP5的功能尚不明确,VP2和VP3是病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳.虽然VP2是IBDV主要的毒力基因,也是构象表位的集中区,但越来越多的证据佐证了VP3也是IBDV重要的毒力基因.VP3基因位于IBDV A节段的2390-3169位,全长780bp.这个内衣壳蛋白有两个相互作用域:与基因组双链RNA的相互作用域在该蛋白的上游,与VP1结合域在该蛋白的C末端,这些相互作用对病毒的组装十分重要.本文对传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定进行了探讨.

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的...

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中国农业生物技术学会动物生物技术分会第二届全国动物生物技术学术研讨会

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用.结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异.用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30﹪(3/10),死亡率为10﹪(1/10),非免疫对照组的发病率为100﹪(10/10),死亡率为40﹪(4/10).体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组.从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用.

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白基因工程疫苗

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传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

传染性喉气管炎病毒WG株gE蛋白主要抗原性片段在大肠杆菌中的表达

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：何来王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV),属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus ***能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义.已有的研... 详细信息

传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV),属于疱疹病毒科的a-疱疹病毒亚科,在分类学上被确定为Gallid herpesvirus ***能引起感染鸡的死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失,具有重要的兽医公共卫生意义.已有的研究证明ILTV是非常有潜力的禽呼吸道病毒疫苗载体,且gE基因又是疱疹病毒重要的毒力相关基因,将gE蛋白的主要抗原性片段表达于大肠杆菌中,为进一步研究gE基因缺失标记疫苗和病毒感染的监测奠定基础.

关键词：传染性喉气管炎病毒 gE基因抗原性片段大肠杆菌

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