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- 25 篇 生物学
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- 2 篇 医学技术（可授医学...
- 1 篇 药学(可授医学、理...
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主题

76 篇 猪圆环病毒2型
40 篇 猪繁殖与呼吸综合...
37 篇 猪瘟病毒
29 篇 单克隆抗体
28 篇 猪流行性腹泻病毒
20 篇 原核表达
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18 篇 猪细小病毒
17 篇 猪圆环病毒
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10 篇 免疫过氧化物酶单...
10 篇 猪伪狂犬病病毒
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9 篇 灭活疫苗
9 篇 cap蛋白

机构

180 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
69 篇 中国农业科学院哈...
61 篇 东北农业大学
16 篇 黑龙江八一农垦大...
15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
13 篇 中国农业科学院哈...
8 篇 华南农业大学
8 篇 哈尔滨师范大学
7 篇 新疆农业大学
7 篇 西北农林科技大学
6 篇 中国农业科学院
5 篇 吉林农业大学
5 篇 内蒙古农业大学
4 篇 延边大学
4 篇 青岛农业大学
4 篇 中国兽医药品监察...
4 篇 黑龙江省动物卫生...
4 篇 中国农业科学院哈...

作者

163 篇 刘长明
139 篇 危艳武
106 篇 黄立平
73 篇 吴洪丽
68 篇 郭龙军
64 篇 冯力
60 篇 陈建飞
57 篇 时洪艳
53 篇 仇华吉
53 篇 崔尚金
47 篇 刘建波
43 篇 孙元
40 篇 陆月华
37 篇 唐青海
36 篇 张超范
34 篇 童光志
33 篇 田志军
33 篇 张朝霞
32 篇 王一平
29 篇 刘丹

语言

401 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物国家重点实验室猪传染病学研究室"

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猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

利用PCR技术扩增PPV LXB-PPV020-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET=32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPVLXB-PPV-20-06... 详细信息

利用PCR技术扩增PPV LXB-PPV020-06株NS1基因全序列,将目的基因与原核表达载体pET=32a(+)进行连接并转化,重组质粒经PCR和双酶切鉴定并测序。测序结果表明,目的基因正确地插入到重组质粒当中。通过对表达宿主菌的选择,PPVLXB-PPV-20-06株NS1基因在Rosetta(DE)plysS菌中的到良好的表达,并确定了NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.6mmol/L、诱导时间为3.5h、诱导温度为37℃。表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为97kDa的重组蛋白,除了包涵体形式表达外,一部分重组蛋白以可溶性形式表达。重组蛋白经Western blot检测,可与PPV阳性血清反应。这为NS1蛋白在临床诊断中的应用打下基础。

关键词：猪细小病毒LXB-PPV-20-06株 NS1基因原核表达鉴定

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猪细小病毒LXB-PPV-20-06株VP2蛋白原核表达载体的构建与表达

猪细小病毒LXB-PPV-20-06株VP2蛋白原核表达载体的构建与表达

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：戚亭崔尚金张超范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

根据GenBank上登陆的猪细小病毒基因组序列,设计一对引物用于扩增和表达猪细小病毒LXB-PPV-20-06株VP2蛋白。经过PCR、酶切及测序鉴定,成功地构建了PPV VP2蛋白原核表达载体,将重组质粒转入表达宿主菌,进行表达条件的优化,用PPV猪阳性... 详细信息

根据GenBank上登陆的猪细小病毒基因组序列,设计一对引物用于扩增和表达猪细小病毒LXB-PPV-20-06株VP2蛋白。经过PCR、酶切及测序鉴定,成功地构建了PPV VP2蛋白原核表达载体,将重组质粒转入表达宿主菌,进行表达条件的优化,用PPV猪阳性血清为一抗进行抗原性的分析。测序结果表明猪细小病毒LXB-PPV-20-06株VP2基因与皮炎型毒株Kresse株的同源性最高,编码氨基酸序列完全一致。PPVLXB-PPV-20-06株VP2基因在Rosetta (DE)plysS中得到良好的表达,经SDS-FAGE分析表明,重组蛋白在82kDa处出现特异的表达条带,表达以可溶性成分和包涵体形式存在。Western blot检测结果表明,PPV LXB-PPV-20-06株VP2蛋白能够与PPV阳性血清发生反应,表明表达的蛋白具有良好的免疫性。这为该蛋白的应用研究,特别是在临床诊断上的应用奠定了基础。

关键词：猪细小病毒LXB-PPV-20-06株 VP2基因原核表达鉴定

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猪流行性腹泻病毒S蛋白中和表位区单克隆抗体的制备与鉴定

猪流行性腹泻病毒S蛋白中和表位区单克隆抗体的制备与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：孙东波冯力时洪艳陈建飞崔晓辰佟有恩中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

以纯化的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S蛋白中和表位(S1D)重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了6株稳定分泌抗S1D区特异性的单克隆抗体细胞株,分别命名为2C4、3G3、5F8、3G5、6E6和3C... 详细信息

以纯化的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S蛋白中和表位(S1D)重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了6株稳定分泌抗S1D区特异性的单克隆抗体细胞株,分别命名为2C4、3G3、5F8、3G5、6E6和3C3。6株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价分别为1:51200、1:6400、1:12800、1:6400、1:51200和1:25600。免疫球蛋白类型均为IgG1型,轻链均为κ链。Western blot试验结果显示,6株单克隆抗体均能特异性地识别天然PEDV中的S蛋白。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白中和表位区单克隆抗体

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实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107～101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997... 详细信息

根据发表的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107～101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997,扩增效率E=0.920,对质粒标准品检测下限值为8.2拷贝/μL,检测变异系数低于2.0%;该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),其敏感性提高103倍以上。用本法对PCV2人工感染猪心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明,多种脏器均可检测到病毒,但以腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高,表明病毒主要在免疫器官增殖,导致淋巴细胞耗损。用实时定量PCR对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测,有半数以上病例病毒载量持在109～10拷贝/g数量级。实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测,为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR 病毒体内分布规律

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猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：张朝霞刘长明危艳武袁婧黄立平中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7... 详细信息

利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化。制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%(143/150),特异性为91.2%(31/34),敏感性为96.5%(112/116);与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%～4.8%和8.9%～9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8～9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型重组蛋白间接ELISA 抗体检测试剂盒

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实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

实时定量PCR对猪圆环病毒2型感染猪体内病毒分布规律的研究

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：危艳武刘长明袁婧黄立平张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室

根据发表的猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107-101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.9... 详细信息

根据发表的猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因序列设计了一对特异引物,并以克隆重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR-GreenⅠ嵌合荧光染料建立了一种用于检测PCV2的实时定量PCR方法。该方法在107-101范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.997,扩增效率E=0.920,对质粒标准品检测下限值为8.2拷贝/μL,检测变异系数低于2.0%;该方法与常规PCR及过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）,其敏感性提高10～3倍以上。用本法对PCV2人工感染猪心、肝、脾、肺、肾、腹股沟淋巴结等组织中病毒核酸载量检测结果表明,多种脏器均可检测到病毒,但以腹股沟淋巴结、扁桃体和脾脏中病毒含量较高,表明病毒主要在免疫器官增殖,导致淋巴细胞耗损。用实时定量PCR对来自国内不同地区的28份临床发病猪病料进行病毒DNA定量检测,有半数以上病例病毒载量持在10拷贝/g数量级.实时定量PCR可用于PCV2核酸定量检测,为该病毒体内外定量检测提供了一种技术手段。

关键词：猪圆环病毒2型实时定量PCR 病毒体内分布规律

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PRV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用

PRV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：张超范刘长明危艳武田志军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验法(Immunoperoxidase monoIayer assay,IPMA),用于猪伪狂犬病病毒(PRV)血清抗体检测。通过对IPMA反应条件的优化,组装成PRV-IPMA诊断试剂盒,并对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期... 详细信息

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验法(Immunoperoxidase monoIayer assay,IPMA),用于猪伪狂犬病病毒(PRV)血清抗体检测。通过对IPMA反应条件的优化,组装成PRV-IPMA诊断试剂盒,并对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验。结果表明,IPMA检测相对于SN的敏感性为96.2%(50/52),特异性为97.7%(43/44),二者的总符合率为96.9%(93/96);该试剂盒重复性好,可在-20℃保存12个月,与其它病毒参考血清无交叉反应。用该试剂盒检测PRV人工感染猪血清,于感染后2w抗体全部阳转(12/12),健康对照组猪血清抗体检测均为阴性结果(24/24)。对来自黑龙江、吉林、上海、内蒙古、河北采集的五个猪场后备母猪150份血清样本进行检测,PRV血清抗体阳性检出率为16.7%～50%,表明这些猪场后备猪群仍需加强疫苗免疫。该试剂盒的研制为我国PRV流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

关键词：猪伪狂犬病病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒

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分子佐剂C3d与HA融合表达增强了猪流感病毒的保护性免疫

分子佐剂C3d与HA融合表达增强了猪流感病毒的保护性免疫

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首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛

作者：李国新田志军周艳君于海童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(SI virus,SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前,包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。猪流感的控制不仅有经济上的意义,更有其深远的公共卫生学意

关键词：猪流感病毒 DNA疫苗分子佐剂 C3d

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质粒DNA与rPRV-HA联合免疫增强了小鼠对猪流感病毒攻击的保护效力

质粒DNA与rPRV-HA联合免疫增强了小鼠对猪流感病毒攻击的保护效力

引用

首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛

作者：李国新周艳君于海田志军闫丽萍童光志中国农业科学院上海兽医研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(SI virus,SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前,包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。而且,猪是禽、猪、人流感病毒的易感宿主,可最大限度地被人等

关键词：猪流感病毒 DNA疫苗 C3d Prime-boost免疫策略

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分子佐剂C3d与HA融合表达增强了猪流感病毒的保护性免疫

分子佐剂C3d与HA融合表达增强了猪流感病毒的保护性免疫

引用

首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会

作者：李国新田志军周艳君于海童光志中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200232 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨 150001 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200232

猪流感(swineinfluenza，SI)是由猪流感病毒(SIvirus，SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前，包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。猪流感的控制不仅有经济上的意义，更有其深远的公共卫生学意义... 详细信息

猪流感(swineinfluenza，SI)是由猪流感病毒(SIvirus，SIV)引起的一种急性高度传染性呼吸道疾病。目前，包括H1N1、H3N2和H1N2亚型在内的SI已成为危害许多国家猪群的疾病。猪流感的控制不仅有经济上的意义，更有其深远的公共卫生学意义。DNA疫苗因为能够同时诱导体液免疫应答和细胞免疫应答而受到青睐。但由于DNA疫苗蛋白表达量低，激发的免疫应答较弱，从而限制了它的应用。因此，提高DNA疫苗的免疫效力已成为基因免疫研究的热点。本文探讨了分子佐剂C3d对猪流感病毒HA-DNA疫苗免疫原性的影响，并评价了表达不同形式的HA的DNA疫苗在小鼠模型中对不同亚型的猪流感病毒攻击的保护效力。

关键词：猪流感病毒 DNA疫苗分子佐剂 C3d HA融合表达保护性免疫免疫原性

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