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- 25 篇 生物学
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10 篇 免疫过氧化物酶单...
10 篇 猪伪狂犬病病毒
10 篇 鉴定
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9 篇 灭活疫苗
9 篇 cap蛋白

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180 篇 中国农业科学院哈...
99 篇 中国农业科学院哈...
69 篇 中国农业科学院哈...
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15 篇 中国农业科学院上...
15 篇 中国农业科学院哈...
13 篇 中国农业科学院哈...
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5 篇 内蒙古农业大学
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4 篇 中国兽医药品监察...
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作者

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53 篇 崔尚金
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401 篇 中文

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猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-γ、IL-2及GM-CSF对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白亚单位疫苗...

引用

第二届免疫学博士生论坛

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

背景:猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工程疫苗的理想靶抗原。研究表明,IFN-γ、IL-2及GM-CSF等细胞因子佐剂能增强疫苗的免疫保护效力,因此可采用细... 详细信息

背景:猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能诱导产生PCV2特异性中和抗体和保护性免疫力,是研制PCV2基因工程疫苗的理想靶抗原。研究表明,IFN-γ、IL-2及GM-CSF等细胞因子佐剂能增强疫苗的免疫保护效力,因此可采用细胞因子与抗原组合的策略研制PCV2新型亚单位疫苗,以验证这3种细胞因子对PCV2-Cap蛋白的免疫增强作用。方法 :采用杆状病毒表达系统表达PCV2-Cap蛋白、猪IFN-γ(Po IFN-γ)、猪IL-2(Po IL-2)、猪GM-CSF(Po GM-CSF)及这3种细胞因子与PCV2-Cap蛋白的融合蛋白Cap-Po IFN-γ、Cap-Po IL-2和Cap-Po GM-CSF,制备几种不同形式的PCV2亚单位疫苗,并经鼠体模型鉴定其免疫原性;采用IPMA和阻断ELISA方法测定免疫及攻毒后PCV2特异性抗体滴度,通过监测淋巴细胞增殖反应和细胞因子分泌水平评价细胞免疫应答;采用常规PCR检测PCV2病毒血症,并经定量PCR检测攻毒后鼠肺脏中PCV2病毒载量。结果 :采用杆状病毒表达系统成功地表达了PCV2-Cap蛋白、Po IFN-γ及CapPo IFN-γ融合蛋白,制备了3种PCV2亚单位疫苗:Cap-Po IFN-γ疫苗、PCV2-Cap+Po IFN-γ疫苗及PCV2-Cap疫苗,并经鼠体试验证实,PCV2-Cap+Po IFN-γ疫苗能诱导产生更高水平的PCV2特异性IPMA抗体和中和抗体滴度,明显提高T淋巴细胞的增殖能力,并显著降低攻毒后鼠肺脏中PCV2病毒核酸载量。以杆状病毒表达系统成功地表达了Po IL-2、Po GM-CSF、Cap-Po IL-2融合蛋白及Cap-Po GM-CSF融合蛋白,制备了5种PCV2亚单位疫苗:Cap-Po IL-2疫苗、PCV2-Cap+Po IL-2疫苗、Cap-Po GM-CSF疫苗、PCV2-Cap+Po GM-CSF疫苗及PCV2-Cap疫苗,并经鼠体试验证实,PCV2-Cap+Po IL-2疫苗、Cap-Po GM-CSF疫苗和PCV2-Cap+Po GM-CSF疫苗均可明显提高T淋巴细胞的增殖能力,刺激淋巴细胞分泌更高水平的IFN-γ和IL-2,并显著降低攻毒后鼠肺脏中PCV2病毒核酸载量。结论 :研究表明,用Po IFN-γ与PCV2-Cap蛋白混合免疫时,Po IFN-γ能显著增强PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的免疫保护效力,但以Cap-Po IFN-γ融合蛋白免疫时,Po IFN-γ对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用;用Po IL-2或Po GM-CSF与PCV2-Cap蛋白混合免疫或以Cap-Po GM-CSF融合蛋白免疫时,Po IL-2和Po GM-CSF对PCV2-Cap蛋白亚单位疫苗的抗体应答均无增强作用,但可促进免疫应答向Th1型免疫应答转变,从而增强疫苗的免疫保护效力,然而以Cap-Po IL-2融合蛋白免疫时,Po IL-2对PCV2-Cap蛋白无免疫增强作用。

关键词：猪圆环病毒2型 Cap蛋白亚单位疫苗 IFN-γ、IL-2及GM-CSF 免疫增强

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猪γ-干扰素对猪圆环病毒2型Cap蛋白的免疫增强作用

猪γ-干扰素对猪圆环病毒2型Cap蛋白的免疫增强作用

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

1引言猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病现已波及世界各地,给全球养猪业造成了重大经济损失。PCV2属于圆环病毒科圆环病毒属,是一种共价闭合、单股环状负链DNA病毒,呈二十面体对称,无囊膜。PCV2... 详细信息

1引言猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病现已波及世界各地,给全球养猪业造成了重大经济损失。PCV2属于圆环病毒科圆环病毒属,是一种共价闭合、单股环状负链DNA病毒,呈二十面体对称,无囊膜。PCV2病毒粒子直径为17nm,基因组约1.7kb,是迄今发现的最小的动物病毒。PCV2有2个主要的开放阅读框(ORFs),其中ORF1编码与病毒复制相关的蛋白Rep和Rep',ORF2编码病毒的结构蛋白Cap。Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋

关键词： PCV 抗体检测免疫增强作用 Cap 攻毒试验中和抗体滴度病毒血症猪圆环病毒淋巴细胞增殖试验免疫保护效力重组杆状病毒反应原性特异性反应

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β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

β-actin与猪瘟囊膜蛋白E2相互作用并参与病毒复制

引用

动物生态养殖、疫病防控、食品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：贺番凌理军廖亚金李素韩文赵碧波孙元仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道。为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿... 详细信息

猪瘟囊膜蛋白E2介导病毒感染并诱导机体产生中和抗体,但尚未有关E2蛋白与宿主细胞蛋白相互作用的报道。为了研究猪瘟病毒复制过程中与其相互作用的宿主细胞蛋白,将猪瘟E2蛋白作为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到一种与E2存在相互作用的宿主细胞蛋白-β-actin。通过免疫共沉淀、GST pulldown、激光共聚焦以及双分子荧光互补试验验证了E2蛋白与β-actin的相互作用。利用RNA干扰技术沉默β-actin的表达以及用细胞松弛素D在猪瘟感染后4h破坏感染细胞β-actin蛋白的丝状结构,均能显著降低培养上清中的病毒滴度与RNA拷贝数。综上所述,本研究表明β-actin在病毒复制周期的早期参与猪瘟病毒的生长调节。

关键词：猪瘟病毒酵母双杂交 E2蛋白 β-actin 细胞松弛素D

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猪圆环病毒2型及其相关疾病的流行趋势与防控对策

猪圆环病毒2型及其相关疾病的流行趋势与防控对策

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：刘建波张辉刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室哈尔滨150001

文章介绍了猪圆环病毒2型的相关疾病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征和猪呼吸道疾病综合征等及其流行趋势，指出对PCV2及PCVAD的防控，除了强化生物安全、加强饲养管理、改善猪场环境、控制营养结构等这些基本措施外，重要的是接种猪圆环... 详细信息

文章介绍了猪圆环病毒2型的相关疾病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征和猪呼吸道疾病综合征等及其流行趋势，指出对PCV2及PCVAD的防控，除了强化生物安全、加强饲养管理、改善猪场环境、控制营养结构等这些基本措施外，重要的是接种猪圆环病毒2型疫苗及引起PCVAD其他相关病原的疫苗。

关键词：猪圆环病毒2型流行病学分析疫苗研发疾病防控

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腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的效力评价

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2不同免疫途径的...

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：孙元秦华洋袁晋王春花赵碧波李素罗玉子仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室哈尔滨150001

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导... 详细信息

猪瘟是一种非常重要的猪传染病,对养猪业危害极大。具有标记特性的新型猪瘟疫苗及相应的鉴别诊断方法将会对猪瘟的防控起到重要的作用。先前证实,构建的表达猪瘟病毒E2基因的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体病毒rAdV-SFV-E2在猪体上可诱导高水平的猪瘟特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫攻毒的保护效果与猪瘟兔化弱毒疫苗C株相当。系统评价显示,该疫苗初步具备了理想猪瘟疫苗的特征。本研究对该腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒rAdV-SFV-E2以三种免疫途径(肌肉、皮下、滴鼻)在猪体上的免疫效果进行了比较。选取21头5周龄左右猪瘟抗体及抗原均为阴性的健康仔猪,将所有仔猪随机分成A、B、C和D四组,其中A、B、C三组分别经肌肉、皮下和滴鼻方式注射5×106 TCID50 rAdV-SFV-E2,D组分别经三种途径免疫5×106 TCID50 rAdV-SFV-empty.免疫后3周以同种疫苗、同样途径和剂量进行加强免疫。加强免疫后4周,所有猪用猪瘟病毒石门株进行攻毒。研究结果显示,皮下免疫组诱导的体液免疫水平较其他途径免疫组较高。在攻毒前,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为46.28％、51.66％和31.94％。皮下免疫组与滴鼻免疫组在攻毒前的抗体水平比较上差异显著(p＜0.05).攻毒后3 d,A组、B组和C组免疫猪的平均抗体阻断率分别为54.28％、62.39％和39.35％。皮下免疫组与肌肉免疫组、滴鼻免疫组间差异显著(p＜0.05).在细胞免疫方面,皮下免疫组诱导了高水平的特异性的淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4的分泌,与rAdV-SFV-empty免疫组及肌肉和滴鼻免疫组之间差异显著(p＜0.05).本研究进一步证实了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗作为一种理想猪瘟疫苗的可能性,将会对猪瘟的防控起到重要的作用。

关键词：猪瘟嵌合载体疫苗免疫途径效力评价

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细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

细胞周期蛋白A表达水平与猪圆环病毒2型复制效率的关系

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2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：唐青海李胜斌张辉危艳武黄立平吴洪丽刘建波王一平刘丹张志慧刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒...

背景猪圆环病毒2型(PCV2)为非囊膜病毒,基因组为1.7 kb左右的单链环状DNA,包含两个主要开放阅读框(ORFs):ORF1编码PCV2 DNA复制所必须的复制酶(Rep和Rep′),ORF2编码核衣壳蛋白(Cap).普遍认为PCV2基因组很小,其编码蛋白能力有限,病毒的复制需要细胞内酶类分子参与.有学者推测PCV2的复制依赖宿主细胞周期S期相关酶类分子,但具体是那些酶类分子,目前尚不清楚.方法采用分子生物学方法克隆猪细胞周期S期的主要调控蛋白一一细胞周期蛋白A基因(CycA)和细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDK2),分别建立CycA或CDK2过表达细胞系及CycA或CDK2低表达细胞系.将PCV2a CL株或PCV2b YJ株接种这四种细胞系,免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和酶联免疫法(ELISA)检测病毒的复制水平,运用流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜分析蛋白定位.

关键词：

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猪圆环病毒病防控技术的研究进展

猪圆环病毒病防控技术的研究进展

引用

福建省第七届猪病学术研讨会

作者：刘长明危艳武陆月华黄立平郭龙军吴洪丽张朝霞中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,... 详细信息

猪圆环病毒2型(PCV2)主要引起以患猪全身性淋巴结肿大为特征的多系统功能衰竭性疾病,临床上表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾炎综合征、猪呼吸道疾病综合征、母猪繁殖障碍、坏死性淋巴结炎、肉芽肿性肠炎和渗出性表皮炎等,统称为猪圆环病毒病。本文介绍了引起该疫病的临床症状，流行趋势与毒株变异等问题;探讨了国内外疫苗的研制情况;分析了国产疫苗的特点，免疫程序及注意事项;解决了疫苗使用中判断猪场是否该注射疫苗，如何判断免疫接种是否成功，疫苗最佳免疫程序、保护期的时间，注射后会不会再感染病毒，发病的猪能否使用疫苗等问题。

关键词：猪圆环病毒病病理机制疾病防控疫苗研制合理使用

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与PCV2基因组茎环结构相互作用宿主细胞蛋白的筛选与鉴定

与PCV2基因组茎环结构相互作用宿主细胞蛋白的筛选与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：张辉唐青海危艳武黄立平张志慧刘建波吴洪丽刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

利用酵母单杂交技术对猪圆环病毒2型(PCV2)基因组复制起始处茎环结构序列与PK-15细胞中的互作蛋白进行了筛选和鉴定。首先将合成的PCV2复制起始处的茎环结构序列整合到酵母染色体中构建诱饵酵母菌株;采用SMART技术合成PK-15细胞cDNA文库... 详细信息

利用酵母单杂交技术对猪圆环病毒2型(PCV2)基因组复制起始处茎环结构序列与PK-15细胞中的互作蛋白进行了筛选和鉴定。首先将合成的PCV2复制起始处的茎环结构序列整合到酵母染色体中构建诱饵酵母菌株;采用SMART技术合成PK-15细胞cDNA文库,将总cDNA与pGADT7-Rec表达载体共同转化酵母诱饵菌株,通过同源重组在酵母细胞内同步进行cDNA文库的构建,以药物筛选阳性克隆;通过酵母菌落PCR得到阳性克隆中的cDNA插入片段,序列分析确认。本实验成功地构建了酵母单杂交文库,筛选出1.01×106个酵母克隆,其中196个为阳性克隆,经PCR产物测序,并通过NCBI Blast法进行序列比对,确定有4种蛋白可与PCV2基因组茎环序列发生作用。本研究为进一步阐明这些宿主蛋白对PCV2复制的调节作用奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒2型茎环结构宿主细胞蛋白鉴定

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高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

高致病性PRRSV与PCV2共感染协同致病性试验

引用

2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：范培虎危艳武郭龙军吴洪丽黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

背景猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是猪繁殖与呼吸综合征的病原体,猪圆环病毒2型(PCV2)与断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)有关.高致病性PRRSV (HP-PRRSV)和PCV2在临床上中混合感染在全球范围内存在.有研究表明,PCV2和PRRSV共感染具有...

背景猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是猪繁殖与呼吸综合征的病原体,猪圆环病毒2型(PCV2)与断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)有关.高致病性PRRSV (HP-PRRSV)和PCV2在临床上中混合感染在全球范围内存在.有研究表明,PCV2和PRRSV共感染具有协同致病作用,但这两种病毒感染的先后顺序造成的影响尚不清楚.方法选用35日龄仔猪随机分成6组,(每组5头):HP-PRRSV/PCV2组(组l,先接种HP-PRRSV,lw后接种PCV2),HP-PRRSV/PCV2组,(组2,先接种PCV2,lw后接种HP-PRRSV),HP-PRRSV+PCV2组(组3,同时接种PCV2和HP-PRRSV),HP-PRRSV组(组4,仅接种HP-PRRSV),PCV2组(组5,仅接种PCV2),空白对照组(未接种空白对照组).攻毒后每天记录临床症状和直肠温度,每周称量体重并采血,用于病毒核酸的定量检测及抗体效价测定.此外,流式细胞术测定CD3+CD4+CD8细胞、CD3+CD4-CD8+细胞、γδT细胞,NK粒细胞和单核细胞含量的变化.测定血清内IFN-γ、 TNF-α、IL-10、IL-2、GM-CSF等细胞因子的含量变化.迫杀时,观察试验猪不同组织的病理变化.

关键词：

来源：评论

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猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的研究

猪IFN-Y对猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白亚单位疫苗免疫增强作用的...

引用

2013国际猪繁殖与呼吸综合征学术研讨会

作者：王一平刘丹郭龙军唐青海危艳武吴红丽刘建波李胜斌黄立平刘长明中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

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