检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2022年第11期62卷 4517-4528页

作者：邢向川李坤付元芳包慧芳李冬卢曾军刘在新曹轶梅中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州7300462 天津威特生物医药有限公司天津300301

[目的]为评价O型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)灭活疫苗免疫后中和抗体(neutralizing antibodies,NA)水平,建立检测中和抗体的固相阻断ELISA(neutralizing antibodies solid-phase blocking ELISA,NA-SPBE)方法。[方法]本研究以本实验室前期制备的FMDV广谱反应性牛源单克隆抗体E32作为捕获抗体,以生物素标记的FMDV O型型内广谱中和牛源单克隆抗体C4作为检测抗体,经过条件优化建立了检测FMDV O型中和抗体的固相阻断ELISA方法,并对该方法进行了敏感性、特异性、重复性、交叉反应性与病毒中和试验(virus neutralization test,VNT)相关性等试验。[结果]抗体E32最佳包被浓度为0.5μg/mL,O型FMDV灭活抗原最佳稀释浓度为0.25μg/mL,生物素标记抗体C4-Bio最佳工作浓度为0.06μg/mL,链霉亲和素-HRP的最佳稀释度为1:40000。以1.35 log10作为效价判定临界值时,敏感性和特异性分别为97.14%和98.84%。利用该方法分别检测FMDV A型、FMDV Asia1型、BVDV、PRRSV、CSFV、PPRV抗体阳性血清时,均为阴性,未出现交叉反应。该方法批内和批间重复试验的变异系数均<10%,表明其重复性较好。利用该方法与VNT分别对160份血清样品进行检测,二者的相关系数r为0.8075,P<0.0001,相关性显著。[结论]该方法可以检测FMDV O型中和抗体,为FMDV O型灭活疫苗免疫效果评价提供有力技术支撑。

关键词：口蹄疫病毒牛源单克隆抗体中和抗体固相阻断ELISA

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猪细小病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用

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中国兽医科学 2025年第1期55卷 80-85页

作者：帅文娜郭子强李佳乐罗梦李丽薇周艳君姜一峰童武童光志李兆龙高飞中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 上海市兽医生物技术重点实验室上海200240 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013

本研究通过对猪细小病毒(PPV)1型非结构蛋白NS1基因保守序列进行设计,建立了PPV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,实现了对PPV1的快速检测。结果显示,该检测方法的Ct值与标准品质粒在1.0×10^(10)copies/μL~1.0×10^(4)copies/μL... 详细信息

本研究通过对猪细小病毒(PPV)1型非结构蛋白NS1基因保守序列进行设计,建立了PPV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,实现了对PPV1的快速检测。结果显示,该检测方法的Ct值与标准品质粒在1.0×10^(10)copies/μL~1.0×10^(4)copies/μL范围内具有良好的线性关系,曲线回归方程为y=-3.6186x+42.01,R^(2)=0.99,扩增效率为189%;重复性好,组内与组间变异系数均低于1.0898%;敏感性好,最低检测限为1.0×10^(1)copies/μL;特异性强,不与猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、非洲猪瘟病毒发生交叉反应,并用该方法对临床样品与病毒拷贝数进行了检测。表明本研究建立的方法重复性好、敏感性高、特异性强,适用于对PPV进行临床检测与诊断。

关键词：猪细小病毒 NS1蛋白 TaqMan实时荧光定量PCR

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铁蛋白纳米颗粒在生物领域的应用

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生物工程学报 2024年

作者：张越茹毅郝荣增李亚军赵陇和杨洋卢炳州刘华南郑海学中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃农业大学动物医学院

铁蛋白广泛存在于生物体内，具有存储和转化铁、维持细胞铁代谢平衡的功能。由于铁蛋白可以在体外自组装形成独特的纳米笼状结构且具有特殊的理化性质，在生物医药领域广泛应用。本文简要介绍了铁蛋白的结构和货物装载策略，重点对其在... 详细信息

铁蛋白广泛存在于生物体内，具有存储和转化铁、维持细胞铁代谢平衡的功能。由于铁蛋白可以在体外自组装形成独特的纳米笼状结构且具有特殊的理化性质，在生物医药领域广泛应用。本文简要介绍了铁蛋白的结构和货物装载策略，重点对其在纳米药物、生物成像和纳米颗粒疫苗载体等生物领域应用研究进行综述，旨在为基于铁蛋白纳米颗粒的相关研究提供参考。

关键词：铁蛋白纳米药物生物成像纳米颗粒疫苗

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基于SourceTracker分析牧场环境对乳房炎乳菌群的影响

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畜牧兽医学报 2023年第9期54卷 3872-3883页

作者：孟璐胡海燕董蕾郑楠王加启中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室北京100193

乳房炎是奶牛常见的疾病之一,通常是由牧场环境中的病原微生物引起,因此,开展乳房炎病原微生物溯源研究对乳房炎防治具有重要意义。本研究从中国天津某牧场收集了乳房炎乳、牧场环境(空气、饮用水、饲料、粪便、垫料、新垫料及喷淋水)... 详细信息

乳房炎是奶牛常见的疾病之一,通常是由牧场环境中的病原微生物引起,因此,开展乳房炎病原微生物溯源研究对乳房炎防治具有重要意义。本研究从中国天津某牧场收集了乳房炎乳、牧场环境(空气、饮用水、饲料、粪便、垫料、新垫料及喷淋水)和挤奶厅(前药浴液、后药浴液、前药浴杯、后药浴杯、奶杯、乳头皮肤)样品共计74份,提取可培养微生物DNA和总DNA,进行16S rDNA扩增测序和SourceTracker分析。在采集的74份样品中,共检测到50个不同科水平上的细菌。Beta多样性和ANOSIM分析表明,样品间细菌群落相似性低。乳房炎乳和乳头皮肤及卧床样品的细菌群落结构相似。此外,SourceTracker结果发现,乳头皮肤是奶牛乳房炎的主要污染源,其次是空气、奶杯和粪便,这表明牧场管理会影响奶牛感染乳房炎的情况。因此,牧场应加强管理控制措施,减少或消除牧场中病原微生物的传播风险。

关键词：奶牛乳房炎牧场挤奶厅 16S rDNA测序 SourceTracker

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嵌杯病毒主要衣壳蛋白的研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3354-3361页

作者：谈晓梅徐彦召刘光清孟春春中国农业科学院上海兽医研究所伴侣动物生物安全与防控技术团队上海200241 河南科技学院新乡453003

嵌杯病毒(calicivirus)是无囊膜的单股正链RNA病毒,具有广泛的宿主范围因而严重威胁着人和许多其他脊椎动物的健康。由于该病毒种属流行株多变、极易传播且呈现区域性感染,致使全球范围内因杯状病毒引起的公共卫生疾病频繁暴发,近年来,... 详细信息

嵌杯病毒(calicivirus)是无囊膜的单股正链RNA病毒,具有广泛的宿主范围因而严重威胁着人和许多其他脊椎动物的健康。由于该病毒种属流行株多变、极易传播且呈现区域性感染,致使全球范围内因杯状病毒引起的公共卫生疾病频繁暴发,近年来,其感染发病率呈明显增加的趋势。不同属成员虽然感染不同种类的宿主,但其主要衣壳蛋白的结构类似。嵌杯病毒主要衣壳蛋白中含有免疫原性关键区域,能与宿主受体结合并可能介导感染过程,且氨基酸相关的免疫原性及受体结合位点的变异是公认的病毒进化的驱动力。本文就嵌杯病毒主要衣壳蛋白的基因组结构、免疫原性、受体结合情况以及遗传演化规律等方面的研究进展进行综述,以期为后续科学研究以及该病的有效防控提供参考。

关键词：嵌杯病毒主要衣壳蛋白结构功能

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围产期奶牛瘤胃微生物菌群结构与功能变化研究进展

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动物营养学报 2023年第10期35卷 6146-6153页

作者：赵小伟张养东郑楠王加启中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所畜禽产品安全工程安徽省重点实验室合肥230031 新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052

围产期是奶牛整个泌乳周期中十分重要的阶段,也是多种代谢性和传染性疾病高发的时期。本文从围产期奶牛瘤胃微生物菌群结构与功能的角度进行综述,旨在揭示围产期奶牛瘤胃微生物菌群结构与功能变化的潜在规律,以期为改善我国围产期奶牛... 详细信息

围产期是奶牛整个泌乳周期中十分重要的阶段,也是多种代谢性和传染性疾病高发的时期。本文从围产期奶牛瘤胃微生物菌群结构与功能的角度进行综述,旨在揭示围产期奶牛瘤胃微生物菌群结构与功能变化的潜在规律,以期为改善我国围产期奶牛的健康,尤其是改善围产期奶牛的瘤胃功能提供参考。

关键词：围产期奶牛瘤胃微生物瘤胃功能

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基于GEO数据库筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因及生物信息学分析

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中国畜牧兽医 2023年第11期50卷 4359-4369页

作者：梁莎莎于农淇卢瑛李厅厅鄢胜飞黄健谭正准黄荣春李辉潘伟军覃广胜中国农业科学院广西水牛研究所广西水牛遗传繁育重点实验室南宁530001

【目的】筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的关键基因,为挖掘改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供参考。【方法】通过GEO数据库下载GSE19586数据集,使用limma R语言程序包筛选广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌的差异表达基因(differentially... 详细信息

【目的】筛选与水牛肌内脂肪沉积相关的关键基因,为挖掘改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供参考。【方法】通过GEO数据库下载GSE19586数据集,使用limma R语言程序包筛选广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),使用clusterProfiler R语言程序包分别对上调、下调的DEGs进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用STRING在线软件对DEGs进行蛋白互作(PPI)网络分析,并使用Cytoscape 3.9.1软件对其结果进行可视化,筛选排名前二十的枢纽基因。【结果】本研究共筛选出254个DEGs,其中61个上调,193个下调。GO功能富集结果显示,上调DEGs主要富集于肌动蛋白-肌球蛋白细丝滑动、肌球蛋白复合体、肌球蛋白结合、甘油三酯代谢、酰基甘油代谢、中性脂代谢、细胞凋亡信号通路调控等过程;下调DEGs主要富集于短链脂肪酸代谢、不饱和脂肪酸代谢、细胞对酮的反应、细胞基质连接、脂蛋白合成及蛋白质的成熟、加工、聚合等过程。KEGG通路富集结果显示,上调DEGs主要参与代谢途径、脂肪细胞因子、胰岛素抵抗、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、甲状腺激素信号转导途径和碳水化合物消化吸收等信号通路;下调DEGs主要参与代谢途径、吞噬体、溶酶体、黏着斑和细胞凋亡等信号通路。PPI网络中共有116个节点和205条连线,其中上调蛋白26个,下调蛋白90个;筛选出的前20个枢纽基因分别为ACTB、PPARGC 1、NR3C 1、FOS、GOT 2、SERPINE 1、RAC 1、LEP、STAT 5 B、HPRT 1、DDC、FABP 1、HDAC 1、RHOA、EEF 1 A 1、PCK 1、SOD 2、PRKCB、GPX 1和CTGF。【结论】本研究共筛选出广西水牛和青海牦牛36月龄背最长肌DEGs 254个,挖掘到可能与水牛肌内脂肪沉积相关的候选基因MYH 3、GPX 1、LDLR、LEP和PCK 1,为寻找改善水牛肌内脂肪沉积的分子标记提供了理论基础。

关键词：水牛肌内脂肪沉积差异表达基因蛋白互作

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口蹄疫O型重组病毒的构建及其免疫原性分析

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微生物学报 2024年第7期64卷 2493-2501页

作者：黄书伦查晶晶孙普章兴赜李冬曹轶梅白兴文付元芳马雪青李坤袁红卢曾军刘在新李平花中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

【目的】利用反向遗传操作技术,构建含O型口蹄疫病毒(food-and-mouth disease virus,FMDV)3个拓扑型免疫优势结构蛋白基因的重组FMDV,评估其作为猪O型口蹄疫(food-and-mouth disease,FMD)疫苗候选株的潜力。【方法】通过基因合成,在FMD... 详细信息

【目的】利用反向遗传操作技术,构建含O型口蹄疫病毒(food-and-mouth disease virus,FMDV)3个拓扑型免疫优势结构蛋白基因的重组FMDV,评估其作为猪O型口蹄疫(food-and-mouth disease,FMD)疫苗候选株的潜力。【方法】通过基因合成,在FMD疫苗株O/HN/CHA/93(古典中国拓扑型)的基因中嵌合流行株O/NXYCh/CHA/2018(东南亚拓扑型)VP1结构蛋白的重组病毒骨架上,用O/TUR/5/2009疫苗株(中东-南亚拓扑型)VP1蛋白的G-H环基因替换其对等基因,构建含O型3个拓扑型FMDV结构蛋白基因的重组全长质粒,Not I线性化后转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,拯救重组病毒。通过RT-PCR、序列测定、间接免疫荧光鉴定重组病毒;噬斑试验和一步生长曲线分析重组病毒的生物学特性。重组病毒制备疫苗免疫猪,用病毒中和试验分析其对当前流行的O型3个拓扑型FMDV的交叉反应性。【结果】成功拯救到含O型3个拓扑型FMDV结构蛋白基因的重组病毒,重组病毒与亲本病毒具有相似的生物学特性。亲本病毒和重组病毒制备的疫苗免疫猪,均能够对中东-南亚型(Middle East-South Asia,ME-SA)拓扑型和东南亚型(South-East Asia,SEA)拓扑型病毒株产生保护性平均中和抗体(>1.65log10);均不能对古典中国型(Cathay)拓扑型流行株产生保护性平均中和抗体(<1.65log10),但与亲本病毒相比,O/TUR/5/2009疫苗株G-H环基因的替换显著提高了对ME-SA和SEA拓扑型病毒株的交叉反应性(P<0.05)。【结论】本研究对未来FMD疫苗的设计具有重要的指导意义。

关键词：口蹄疫(FMD) 重组病毒构建免疫原性

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蛋白质动态平衡网络维稳机制的研究进展

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生物工程学报 2024年第2期40卷 434-445页

作者：高明阳吴玉湖杨宣叶王进千胡欣妍周建华西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730010 中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

蛋白质是构成生命体的基础,其在体内有多种存在形式,而这些形式之间如何维持动态平衡对细胞发挥正常功能来说至关重要。诸多因素会影响蛋白质稳态,包括一些内外源性的刺激、翻译过程中出现的问题以及一些调控因子的作用等。当错误折叠... 详细信息

蛋白质是构成生命体的基础,其在体内有多种存在形式,而这些形式之间如何维持动态平衡对细胞发挥正常功能来说至关重要。诸多因素会影响蛋白质稳态,包括一些内外源性的刺激、翻译过程中出现的问题以及一些调控因子的作用等。当错误折叠的蛋白在细胞中不断积累时,会导致蛋白质稳态失衡并无法发挥正常功能进而引发相关疾病。同时在错误发生后,机体的许多“监控”就会感知这些异常,并通过多种途径来帮助蛋白质维持稳态。本文旨在综述蛋白质动态平衡网络之间错综复杂的关系,以及各种因素在其中发挥的主要作用,并为一些由蛋白合成异常导致疾病的研究等提供新的思路。

关键词：蛋白质稳态失衡动态平衡疾病

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复合酶制剂对肉羊生长性能、屠宰性能、肉品质以及消化代谢的影响

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动物营养学报 2022年第7期34卷 4530-4539页

作者：成思源马涛杨东王文义柏映国马友记刁其玉甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京100081 巴彦淖尔市农牧业科学研究所巴彦淖尔015000 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

本试验旨在研究饲粮中添加不同剂量复合酶制剂对肉羊生长性能、屠宰性能、肉品质和消化代谢的影响。选取体重在(21.0±0.2)kg的寒杂羊公羔72只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复6只。4组羔羊分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组)、0.... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中添加不同剂量复合酶制剂对肉羊生长性能、屠宰性能、肉品质和消化代谢的影响。选取体重在(21.0±0.2)kg的寒杂羊公羔72只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复6只。4组羔羊分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组)、0.5(M1组)、1.0(M2组)和2.0 kg/t(M3组)复合酶制剂(蛋白酶∶脂肪酶∶淀粉酶=1∶1∶1)的试验饲粮。预试期10 d,正试期90 d。每天记录1次采食量,每隔30 d进行1次称重;正试期第70~80天采用全收粪尿法进行消化代谢试验;正试期结束后,每组选取8只羊进行屠宰,测定其屠宰性能、肉品质指标。结果显示:1)各组全期平均日增重、干物质采食量和料重比差异不显著(P>0.05)。2)M3组胴体重显著高于M1组、M2组和对照组(P<0.05),其他屠宰性能指标各组间无显著差异(P>0.05)。3)各组背最长肌肉色、滴水损失以及pH0 h、ΔpH无显著差异(P>0.05);M2组和M3组羊只背最长肌的pH24 h显著高于对照组(P<0.05)。4)各试验组粗脂肪表观消化率显著高于对照组(P<0.05);M2组和M3组的粗蛋白质表观消化率显著高于对照组(P<0.05);代谢能以及中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙、磷表观消化率各组间差异不显著(P>0.05)。综上所述,本试验条件下,在肉羊生长育肥饲粮中添加2.0 kg/t的复合酶制剂(蛋白酶∶脂肪酶∶淀粉酶=1∶1∶1)可改善肉羊的屠宰性能、肉品质以及养分表观消化率。

关键词：肉羊复合酶制剂生长性能屠宰性能肉品质养分表观消化率

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