检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 341-350页

作者：汪磊梁琳罗润琪梁瑞英胡丹丹司红彬丁家波邸文达汤新明广西大学动物科技学院南宁541000 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)北京100193

鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia, CIA)是临床上最常见的免疫抑制性传染病之一,尚无特异性治疗方法,严重威胁动物健康和养殖业的经济效益。虽然已有部分地区以活疫苗进行CIA的临床预防,但其安全性问题及病毒培养和生产效率低... 详细信息

鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia, CIA)是临床上最常见的免疫抑制性传染病之一,尚无特异性治疗方法,严重威胁动物健康和养殖业的经济效益。虽然已有部分地区以活疫苗进行CIA的临床预防,但其安全性问题及病毒培养和生产效率低是制约活疫苗推广应用的主要瓶颈。笔者从引起CIA的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus, CIAV)的病原学与流行特征、传统疫苗与新型疫苗激发宿主的免疫应答特征与免疫保护力等方面进行全面分析,剖析现有疫苗的优缺点,结合新型疫苗的理论与技术优势,提出CIA高效疫苗的研发方向,为CIA疫苗的研发提供新的思路和科学依据。

关键词：鸡传染性贫血病鸡传染性贫血病毒(CIAV) 感染与免疫疫苗研发

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基于非靶向代谢组学探究水牛唾液和血清中的发情标志物

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中国草食动物科学 2024年第5期44卷 11-23页

作者：余洲杨柏高李崇阳曹建华牛一凡覃广胜王旭光万鹏程梁淦赵学明阿布力孜·吾斯曼新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 中国农业科学院广西壮族自治区水牛研究所南宁530001 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832099

在现代化规模养殖中,水牛发情不明显的问题日益突出。研究旨在利用高通量非靶向代谢组学分析不同发情阶段水牛唾液和血清中代谢物的差异。在相同的饲养管理条件下,选择15头尼里-拉菲水牛,每头注射氯前列醇4 mL,注射当天计为第0天。分别... 详细信息

在现代化规模养殖中,水牛发情不明显的问题日益突出。研究旨在利用高通量非靶向代谢组学分析不同发情阶段水牛唾液和血清中代谢物的差异。在相同的饲养管理条件下,选择15头尼里-拉菲水牛,每头注射氯前列醇4 mL,注射当天计为第0天。分别在水牛发情前期(第1天)、发情期(第3天)、发情后期(第6天)早上饲喂之前(08:00-11:00)采集唾液和血清,样品处理后采用非靶向代谢组学检测。结果显示,不同发情阶段水牛的唾液和血清中均存在差异代谢物,发情期/发情前期水牛唾液中共鉴定出30种显著差异代谢物,血清中共鉴定出85种显著差异代谢物;发情期/发情后期水牛唾液中共鉴定出8种显著差异代谢物,血清中共鉴定出66种显著差异代谢物。这些差异代谢物主要富集在胰高血糖素信号通路、磷酸戊糖途径、甘油酯代谢等通路上。唾液代谢物与血清代谢物之间存在相关性。唾液中的差异代谢物D-2-磷酸甘油酸、L-丙酰肉碱、白三烯d4和8-异前列腺素a1可能作为水牛发情生物标志物的关键代谢物。

关键词：水牛发情鉴定血清唾液代谢组学

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不同含水量和糖蜜添加量对青贮杂交构树发酵品质、营养成分和瘤胃降解特性的影响

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动物营养学报 2024年第3期36卷 2010-2021页

作者：郭升岚毕小兵毕研亮郭春华王茜史海涛西南民族大学畜牧兽医学院青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室成都610041 平凉市崆峒区动物疫病预防控制中心平凉744000 中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京100081

本试验旨在研究不同含水量和糖蜜添加量对青贮杂交构树发酵品质、营养成分和瘤胃降解特性的影响。采用2×4两因素试验设计,其中含水量分别为73%(新鲜构树)和60%(萎蔫构树),糖蜜添加量分别为0(对照)、2.5%、5.0%和7.5%。将全株杂交... 详细信息

本试验旨在研究不同含水量和糖蜜添加量对青贮杂交构树发酵品质、营养成分和瘤胃降解特性的影响。采用2×4两因素试验设计,其中含水量分别为73%(新鲜构树)和60%(萎蔫构树),糖蜜添加量分别为0(对照)、2.5%、5.0%和7.5%。将全株杂交构树切短至1~2 cm,按照试验设计混匀后装入透明聚乙烯袋中,密封后于室温避光发酵90 d。选用3头装有永久性瘤胃瘘管的健康泌乳荷斯坦奶牛(体重约650 kg)测定青贮样品的瘤胃降解率,并采用体外法测定瘤胃未降解残渣养分的小肠消化率。结果表明:1)所有糖蜜添加组的青贮杂交构树感官评价均达到德国农业协会评价等级1级(优良)标准。2)随着含水量的降低和糖蜜添加量的升高,乳酸含量显著升高(P<0.05),pH和氨态氮(NH3⁃N)含量显著降低(P<0.05),且上述指标随着糖蜜添加量的升高呈二次变化(P<0.05);除2个对照组和73%含水量+2.5%糖蜜组外,其余组均为未检出丙酸和丁酸。3)随着含水量的降低和糖蜜添加量的升高,粗蛋白质(CP)、非纤维性碳水化合物(NFC)和可溶性碳水化合物(WSC)含量显著升高(P<0.05),中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性洗涤木质素(ADL)、纤维素、半纤维素、中性洗涤不溶性粗蛋白质(NDICP)和酸性洗涤不溶性粗蛋白质(ADICP)含量显著降低(P<0.05),且上述指标随糖蜜添加量的升高呈二次变化(P<0.05)。4)降低含水量和添加糖蜜可显著提高青贮杂交构树养分瘤胃降解率和过瘤胃CP小肠消化率(P<0.05)。综上可知,降低含水量和添加糖蜜有利于提高杂交构树青贮品质,改善青贮杂交构树营养价值,在60%含水量条件下添加2.5%~5.0%糖蜜即可获得优质的杂交构树青贮饲料。

关键词：杂交构树青贮发酵品质营养价值瘤胃降解

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山羊FAM135A和STK3基因多态性与产羔性能的关联分析

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特产研究 2024年

作者：余平狄冉储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽生物育种全国重点实验室

研究旨在分析序列相似性家族135成员A(Family With Sequence Similarity 135 Member A,FAM135A)基因和丝/酪氨酸蛋白激酶3(Serine/Threonine Protein Kinase 3,STK3)基因的多态性位点与山羊产羔数的关联。基于Sequenom MassARRAY?SNP技术对FAM135A和STK3基因的4个候选位点进行分型,并分析了云上黑山羊(n=544)、济宁青山羊(n=133)和辽宁绒山羊(n=91)3个群体中4个候选位点的遗传学特征,同时将这些突变位点与云上黑山羊的繁殖性能(包括产羔数、初生窝重和断奶窝重)作了关联分析。结果显示,在不同繁殖力品种(济宁青山羊和辽宁绒山羊)中,FAM135A基因的g.91260230G> T和g.91261141G> A位点以及STK3基因的g.16434985 C> T位点基因型的分布存在着极显著差异(P<0.01);而不同繁殖力品种中STK3基因的g.16648187C> T位点的基因型分布却没有明显差异(P>0.05)。关联分析结果表明,g.91260230G>T位点的各基因型在云上黑山羊的产羔数、初生窝重和断奶窝重上都没有明显差异(P> 0.05);但g.91261141 G> A位点与产羔数和初生窝重显著相关,GG型产羔数和窝重均显著高于AG型(P <0.05):g.16434985 C> T位点TT型的初生窝重显著高于CT型(P <0.05),但该位点的各基因型对山羊的产羔数和断奶窝重并没有显著影响(P> 0.05);g.16648187 C> T位点与山羊的产羔数和初生窝重之间都没有显著关联(P> 0.05)。综上,本研究发现FAM135A基因的g.91261141 G> A位点是云上黑山羊产羔数与初生窝重选择的潜在遗传标记。STK3基因的g.16434985 C> T位点适合初生窝重的选择。

关键词：山羊产羔数窝重 FAM135A基因 STK3基因

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外泌体的生物学功能及牛乳源性外泌体资源开发进展

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动物营养学报 2022年第3期34卷 1416-1425页

作者：杜春梅权素玉南雪梅熊本海中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193 天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384

外泌体是一种天然存在于动物体液中的纳米颗粒,能够包裹丰富的核酸、蛋白质和脂质等生物活性物质,是介导细胞间通讯的有力载体。牛乳源性外泌体可抵御摄入者或犊牛胃肠道消化酶的降解,将其包裹的活性内容物传递至靶器官发挥信号传递作... 详细信息

外泌体是一种天然存在于动物体液中的纳米颗粒,能够包裹丰富的核酸、蛋白质和脂质等生物活性物质,是介导细胞间通讯的有力载体。牛乳源性外泌体可抵御摄入者或犊牛胃肠道消化酶的降解,将其包裹的活性内容物传递至靶器官发挥信号传递作用。近期研究表明,牛乳源性外泌体含有大量免疫相关RNA和蛋白质,可调控犊牛的生长发育,尤其是免疫系统的完善。然而,牛乳源性外泌体也可能通过其内含miRNA向人类引入新的病原体,增加巨大胎儿、肥胖、心血管疾病等一系列疾病发生的风险。因此,本文综述了外泌体的分子组成、分选机制、分离技术及其生物学功能,为进一步探索牛乳源性外泌体的潜在应用提供参考。

关键词：牛乳外泌体组成生物学功能

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猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡

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中国农业科学 2024年第1期57卷 216-226页

作者：王海燕张珍珍倪博刘蓓蓓冯志新江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸... 详细信息

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白，被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手，分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用，揭示Mhp引起炎性损伤的新机制，为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞（porcine bronchial epithelial cells,PBECs）感染模型和猪体感染模型，通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法，分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定，构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时，设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭，通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中，通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因，后感染Mhp，利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法，明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变，主要组织病理表现为肺脏炎性损伤，同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后，体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明，Mhp可诱导肺脏炎性反应，抑制SPLUNC1表达。另一方面，体外PBECs中过表达SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少；siRNA干扰SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加，表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程，本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明：无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育，还是SPLUNC1抗体体内封闭，Mhp的体内外生长均未受影响；SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响；过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活，相反SPLUNC1 siRNA干扰后，可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附，而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达，维护宿主炎性平衡；与此同时，Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控，进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。

关键词：猪肺炎支原体支原体-宿主相互作用炎性反应 SPLUNC1

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牛结节性皮肤病病毒ORF006蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

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中国兽医科学 2023年第5期53卷 588-593页

作者：马小琴王莎莎胡林杰姚凯慎任善会王相伟孙跃峰殷相平中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

为探究牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF006蛋白的生物学功能,制备了ORF006基因的多克隆抗体,用PCR技术获得LSDV ORF006的基因片段克隆至pET-28a原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)后进行IPTG诱导表达,将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔... 详细信息

为探究牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF006蛋白的生物学功能,制备了ORF006基因的多克隆抗体,用PCR技术获得LSDV ORF006的基因片段克隆至pET-28a原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)后进行IPTG诱导表达,将纯化后的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,LSDV ORF006基因全长约696 bp;pET-28a-ORF006重组质粒在大肠杆菌中于37℃经1 mmol/L的IPTG诱导12 h,成功表达约28.0 ku目的蛋白;ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价为1∶102400;Western-blot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别ORF006蛋白;间接免疫荧光试验表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别LSDV感染MDBK细胞表达的ORF006蛋白。本研究为进一步探究LSDV ORF006蛋白生物学功能奠定了基础。

关键词：牛结节性皮肤病病毒 ORF006基因原核表达多克隆抗体

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非洲猪瘟病毒p34蛋白重组纳米颗粒的制备及免疫原性评价

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 228-236页

作者：张荣茹毅蒋成辉张越赵冬梅郝荣增李亚军郑海学刘学荣杨进才安兰芳魏彦明甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室中农威特生物科技股份有限公司

铁蛋白纳米颗粒具有可展示多抗原的表面，能更好的促进细胞摄取和抗原呈递，进而增强免疫效力而被广泛应用于疫苗研究。本研究旨在利用铁蛋白制备携带非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) p34蛋白的纳米颗粒抗原，并评价其免... 详细信息

铁蛋白纳米颗粒具有可展示多抗原的表面，能更好的促进细胞摄取和抗原呈递，进而增强免疫效力而被广泛应用于疫苗研究。本研究旨在利用铁蛋白制备携带非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) p34蛋白的纳米颗粒抗原，并评价其免疫原性，为非洲猪瘟纳米疫苗研究提供参考。首先，将编码p34蛋白和SpyTag(ST)标签的基因序列串联后插入pET-28a(+)载体得到pET-p34-ST重组质粒，将编码Spycatcher(SC)与铁蛋白(ferritin, F)的基因序列串联后插入pET-28a(+)载体得到pET-SC-F重组质粒，并分别在大肠杆菌(Escherichia coli)中诱导表达。然后通过亲和层析法纯化2种重组蛋白p34-ST和SC-F后，进行体外偶联得到重组纳米颗粒F-p34。利用SDS-PAGE、Western blot、动态光散射(dynamic light scattering, DLS)、投射电子显微镜(transmission electron microscopy, TEM)等方法对制备的F-p34进行鉴定和形态表征，最后通过免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)进行体内免疫原性评价。结果显示，本研究成功设计并构建了pET-28a-p34-ST和pET-28a-SC-F原核表达载体，经过体外表达、纯化和偶联，成功制备出偶联非洲猪瘟病毒p34蛋白的铁蛋白纳米颗粒F-p34，其与ASFV阳性血清能够发生特异性反应，DLS和TEM体外表征发现，F-p34粒径大约为21 nm，且具有均一的纳米颗粒结构；F-p34免疫小鼠后7 d即可诱导机体产生特异性免疫应答，在42 d时抗体滴度达到最高且显著高于单体抗原p34免疫组(P<0.05)。Fp34免疫组脾淋巴细胞的增殖水平和血清中细胞因子白细胞介素4(interleukin 4, IL-4)、IL-10、IL-2和干扰素γ(interferon, IFN-γ)的分泌水平显著高于p34免疫组(P<0.05)。综上，本研究成功制备了具有良好免疫原性的携带非洲猪瘟病毒p34蛋白的纳米颗粒抗原，拓宽了非洲猪瘟亚单位疫苗的研究思路。

关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV) p34蛋白铁蛋白纳米颗粒偶联免疫原性

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基于脱氧核酶的荧光生物传感器快速检测奶牛血清铜离子的研究

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中国畜牧杂志 2024年第12期60卷 354-359页

作者：孙超群王辉贺越余志雪梁兴伟熊本海唐湘方广西大学动物科学技术学院广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室广西南宁530004 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽营养与饲养全国重点实验室北京100193

铜离子作为奶牛生长发育阶段的必需金属元素发挥着极为重要作用,其缺乏或过量都会影响奶牛生理健康及养殖场经济效益,因此实时快速检测铜离子对于调节饲料中含铜添加剂具有重要意义。荧光生物传感器具有高灵敏度、高选择性、实时监测、... 详细信息

铜离子作为奶牛生长发育阶段的必需金属元素发挥着极为重要作用,其缺乏或过量都会影响奶牛生理健康及养殖场经济效益,因此实时快速检测铜离子对于调节饲料中含铜添加剂具有重要意义。荧光生物传感器具有高灵敏度、高选择性、实时监测、易操作、低成本、大规模生产等优点,非常适合奶牛养殖场现场快速检测。本试验旨在将对铜离子选择性和灵敏性高的脱氧核酶作为生物敏感材料,设计在脱氧核酶的5'端和特异性底物链的3'端分别标记标荧光染料Cy5和猝灭剂BHQ3,制备荧光生物传感器,对生物敏感材料浓度与pH环境进行优化,并对钙、镁、锌等金属离子进行特异性检测。当铜离子存在时,铜离子与脱氧核酶特异性结合,进而切割特异性底物链的rA位点,导致Cy5重新暴露,荧光信号增强。通过试验表明,该方法构建的荧光生物传感器可以在pH 6.0~6.5对1~1000 nmol/L的铜离子具有良好的线性关系,最低检测限为0.67 nmol/L,该方法可快速检测奶牛血清铜离子。

关键词：血清铜脱氧核酶分子信标荧光奶牛

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H9N2亚型禽流感病毒NP蛋白纳米抗体的筛选与鉴定

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中国兽医科学 2023年第10期53卷 1216-1222页

作者：梁世蕊吉艳红王丹朱启运中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

以H9N2亚型禽流感病毒(AIV)为研究对象,将病毒灭活纯化后免疫羊驼,测得其血清抗体效价为1∶128000;提取羊驼外周血淋巴细胞RNA,获得单个重链可变区(VHH)基因,成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库,文库库容量为1.3×10^(9)c... 详细信息

以H9N2亚型禽流感病毒(AIV)为研究对象,将病毒灭活纯化后免疫羊驼,测得其血清抗体效价为1∶128000;提取羊驼外周血淋巴细胞RNA,获得单个重链可变区(VHH)基因,成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库,文库库容量为1.3×10^(9)cfu/mL,阳性率为100%;以H9N2亚型AIV-NP蛋白为靶向抗原,利用噬菌体展示技术进行筛选,获得3株靶向H9N2亚型AIV-NP蛋白的纳米抗体;构建纳米抗体真核表达重组质粒,表达纯化后收获3株纳米抗体;通过间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光试验对纳米抗体的亲和力、特异性等生物活性进行鉴定,最终得到1株广谱性高亲和力的H9N2亚型AIV-NP蛋白纳米抗体,可为检测方法的建立提供新的生物材料。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型核蛋白纳米抗体特性鉴定

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