检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2025年第1期56卷 74-81页

作者：孙同玉马涛中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京100081

反刍动物初乳中含有丰富的生物活性成分,其中microRNA是一类非编码RNA,可在转录后水平调节基因的表达,对于母体乳腺以及幼龄反刍动物肠道发育具有重要的调控作用。近年来,反刍动物初乳microRNA组成和功能的研究开始受到关注,本文综述了... 详细信息

反刍动物初乳中含有丰富的生物活性成分,其中microRNA是一类非编码RNA,可在转录后水平调节基因的表达,对于母体乳腺以及幼龄反刍动物肠道发育具有重要的调控作用。近年来,反刍动物初乳microRNA组成和功能的研究开始受到关注,本文综述了反刍动物初乳中microRNA的来源、组成及其影响因素、功能,以及目前研究的局限性和未来的研究方向,为生产高品质初乳,提高母仔一体化培育水平提供理论支撑。

关键词：反刍动物初乳 microRNA 胞外囊泡

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一种谷氨酸棒杆菌4-异丙基苯甲酸诱导型启动子的设计与应用

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生物技术通报 2024年第7期40卷 108-116页

作者：毋舒宁苏永平李冬雪柏映国刘波张志伟山西农业大学林学院太谷030801 中国农业科学院生物技术研究所北京100081 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

【目的】谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度。【方法】在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子P_(H10)上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱... 详细信息

【目的】谷氨酸棒杆菌是一种重要的工业微生物,挖掘可调控性元件可有效拓展谷氨酸棒杆菌研究和应用的广度和深度。【方法】在谷氨酸棒杆菌组成型强启动子P_(H10)上嵌入阻遏蛋白CymR结合的操纵序列CuO,构建了4-异丙基苯甲酸(Cumate)为诱导剂的启动子P_(H10-CuO)。【结果】绿色荧光蛋白作为报告基因的实验结果显示,无诱导剂时,谷氨酸棒杆菌工程菌相对荧光强度较低;以25μg/mL 4-异丙基苯甲酸诱导12 h时,谷氨酸棒杆菌工程菌荧光强度达62000,证明P_(H10-CuO)具有很好的严谨性和诱导表达强度。构建了以启动子P_(H10-CuO)调控recET和Cas12a表达的谷氨酸棒杆菌基因编辑质粒,实现谷氨酸棒杆菌染色体上靶标基因的精准编辑和外源基因插入。【结论】诱导型启动子P_(H10-CuO)具有表达强度高且渗漏表达低的特点,可用于谷氨酸棒杆菌中被其调控基因的时序性表达。

关键词：谷氨酸棒杆菌诱导型启动子阻遏蛋白CymR 4-异丙基苯甲酸

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生乳新鲜度评价指标研究进展

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动物营养学报 2023年第6期35卷 3499-3507页

作者：佀博学张养东郑楠王加启中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室北京100193 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

牛奶是最接近完美的食物,也是微生物生长繁殖的绝佳培养基。生乳在离开母体的那一刻便开始逐步走向腐败,其品质降低和风味变差,甚至危害人们的健康。本文综述了生乳腐败过程、新鲜度评价指标及相应的检测方法,为探索生乳新鲜度评价指标... 详细信息

牛奶是最接近完美的食物,也是微生物生长繁殖的绝佳培养基。生乳在离开母体的那一刻便开始逐步走向腐败,其品质降低和风味变差,甚至危害人们的健康。本文综述了生乳腐败过程、新鲜度评价指标及相应的检测方法,为探索生乳新鲜度评价指标和检测方法提供理论参考。

关键词：生乳新鲜度评价指标检测方法

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单细胞转录组测序技术在家养动物中的应用

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3276-3287页

作者：张肖旭李昊冯平捷杨豪李新月吕冉潘章源储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽生物育种全国重点实验室北京100193

单细胞转录组测序技术(single cell RNA sequencing, scRNA-seq)能够以高精度分辨率鉴定单个细胞类型和细胞状态,打破普通转录组测序(bulk RNA sequencing, RNA-seq)无法探究目标细胞具体表达特征的困境,在各个领域的探索中起到重要作用... 详细信息

单细胞转录组测序技术(single cell RNA sequencing, scRNA-seq)能够以高精度分辨率鉴定单个细胞类型和细胞状态,打破普通转录组测序(bulk RNA sequencing, RNA-seq)无法探究目标细胞具体表达特征的困境,在各个领域的探索中起到重要作用,目前广泛应用于人类及小鼠发育生物学、肿瘤学、免疫学、复杂疾病、肠道微生物组及临床应用等诸多领域。近年来,scRNA-seq在畜牧业领域也开展了一些开创性的研究并获得了一系列的成果,主要集中在动物繁殖性能、胚胎发育、关键性状解析等方面,但相较于在人类上的应用还较为薄弱,在其他领域的应用也仍有待深入。本文主要综述了scRNA-seq的工作流程及其在家养动物中应用的研究进展,以期为提高scRNA-seq分析效率以及在家养动物中的创新应用提供参考。

关键词：单细胞转录组测序家养动物

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不同FecB基因型和不同直径绵羊卵泡中BMP/SMAD通路活性及蛋白表达差异

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畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 3957-3967页

作者：龚一鸣贾一轩李佳骏王翔宇贺小云储明星狄冉中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽生物育种全国重点实验室北京100193

旨在探究不同FecB基因型对绵羊卵泡中BMP/SMAD通路活性和蛋白表达的影响;揭示成熟大卵泡和小卵泡之间BMP/SMAD通路活性和蛋白表达的差异。本研究采用TaqMan分型方法筛选出不同FecB基因型的母羊,同期发情后取卵泡期成熟卵泡和黄体期卵巢... 详细信息

旨在探究不同FecB基因型对绵羊卵泡中BMP/SMAD通路活性和蛋白表达的影响;揭示成熟大卵泡和小卵泡之间BMP/SMAD通路活性和蛋白表达的差异。本研究采用TaqMan分型方法筛选出不同FecB基因型的母羊,同期发情后取卵泡期成熟卵泡和黄体期卵巢表面小卵泡,利用免疫印迹法(Western blot)测定BMP/SMAD通路相关蛋白表达水平和通路活性。结果表明,对于小卵泡组,FecB突变型卵泡中骨形态发生蛋白1B型受体(bone morphogenetic protein receptor type 1B,BMPR1B)表达量显著高于野生型卵泡(P<0.05),但SMAD家族成员4(SMAD family member 4,SMAD4)表达量和SMAD1/5/9的磷酸化水平显著低于野生型卵泡(P<0.05);对于成熟大卵泡组,FecB突变型卵泡中FKBP脯氨酰异构酶1A(FKBP prolyl isomerase 1A,FKBP1A)和SMAD4表达量显著低于野生型卵泡(P<0.05),Ⅰ型受体(BMPR1B)和Ⅱ型受体(BMPR2)的蛋白表达量及SMAD1/5/9的磷酸化水平在两种基因型之间未显示出显著差异。另一方面,对比FecB突变型小卵泡和成熟大卵泡发现:成熟大卵泡中BMPR1B和SMAD4蛋白表达量和SMAD1/5/9磷酸化程度显著高于小卵泡(P<0.05)。上述结果表明,由于SMAD4表达量的下降,FecB突变型大、小卵泡中结合到基因组靶区域的SMAD4-SMAD1/5/9蛋白复合物均相对较少,将导致通路活性降低,而且由于小卵泡中较低的SMAD1/5/9磷酸化水平,其通路活性更低。另外,绵羊突变型卵泡生长发育成熟后BMP/SMAD通路活性显著增强。

关键词：绵羊 FecB突变卵泡 BMP/SMAD通路 SMAD4

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免疫沉淀联合LC-MS/MS筛选猪肝星状细胞中葡萄糖调节蛋白GRP94的互作蛋白

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中国农业科学 2023年第15期56卷 3020-3031页

作者：王枭鸿邢明杰顾宪红郝月中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/畜禽营养与饲养全国重点实验室

【背景】随着规模化、集约化生产程度的不断提高，养殖过程中饲养空间受限、冷热环境不适等因素常使猪处于应激状态。内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）可能是最早期的应激反应，与细胞凋亡、代谢等方面有密切联系。肝... 详细信息

【背景】随着规模化、集约化生产程度的不断提高，养殖过程中饲养空间受限、冷热环境不适等因素常使猪处于应激状态。内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）可能是最早期的应激反应，与细胞凋亡、代谢等方面有密切联系。肝脏是机体的主要代谢器官，猪养殖过程中由于人工操作（如断奶）、饲料霉变、温度变化和吸入有害气体等因素都会造成猪肝脏的ERS，不仅会造成肝脏损伤，还会引发肝脏的脂肪代谢紊乱和广泛的炎症反应，影响生产性能和繁殖性能。因此，深入探讨缓解ERS的有效措施，有助于减少猪养殖过程中的隐性损失。【目的】利用免疫沉淀联合质谱技术，从猪肝星状细胞中筛选在ERS条件下与葡萄糖调节蛋白94(GRP94)相互作用的细胞蛋白，为进一步探讨GRP94对猪肝星状细胞生物学功能的保护作用机理奠定基础。【方法】首先将GRP94抗体固定在谷胱甘肽亲和磁珠上，用亲和磁珠与ERS条件下或正常条件下猪肝星状细胞总蛋白进行孵育，与GRP94诱饵蛋白结合的蛋白复合物洗脱收集后，进行SDS-PAGE凝胶电泳验证。将验证成功的样品洗脱液进行液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测，鉴定出正常条件和ERS条件下GRP94的互作蛋白。运用生物信息学在线软件对筛选的互作细胞蛋白进行GO富集、KEGG信号通路注释和蛋白互作网络分析，并对其中的互作蛋白之一波形蛋白（vimentin）进行免疫共沉淀验证。【结果】筛选到正常条件下与GRP94存在互作关系的蛋白146个，ERS条件下与GRP94存在互作关系的蛋白76个，在两种情况下都存在互作关系的蛋白44个。ERS条件下有互作关系的76个蛋白质主要参与凋亡过程负调控、肽段交联、泛素依赖型ERAD(endoplasmic reticulum associated degradation)过程和过氧化氢分解代谢等过程。其中参与凋亡过程负调控的GRP94互作蛋白有albumin、catalase、filament A、heat shock protein family A member 5、keratin 18和prohibin 2，说明GRP94可能与这些蛋白共同发挥抗凋亡作用。除此之外组成中间丝纤维的vimentin蛋白参与多个GO富集的通路，可能与GRP94有重要的互作关系。进一步的免疫共沉淀试验也证实，ERS条件下vimentin和GRP94之间确实存在互作关系。此外，某些ERS条件下特异性表达的GRP94互作蛋白（如peroxiredoxin、death inducer obliterator 1、catalase、glandular kallikrein、pyruvate kinase等）与抗凋亡有密切联系。【结论】ERS条件下，猪肝脏GRP94互作蛋白主要参与抗凋亡、对未折叠蛋白进行折叠和维护细胞内稳态相关的信号通路。该结论为下一步开展GRP94参与肝脏ERS调控机制的研究打下基础。

关键词： ERS 肝细胞 GRP94 互作蛋白猪

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基于蛋白智能模型提升溶菌酶RPL187的热稳定性

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生物技术通报 2025年

作者：王辉范灵熙孙纪录王苑伍宁丰田健关菲菲河北农业大学食品科技学院中国农业科学院生物技术研究所中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

【目的】溶菌酶可作为抑菌剂而广泛应用于食品、生物、医药等领域。但溶菌酶作为一种生物活性物质，其稳定性受温度影响较大，难以满足不同行业的需求。因此采用一种结合人工智能模型设计并筛选蛋白质突变体的改造策略，提高溶菌酶的热... 详细信息

【目的】溶菌酶可作为抑菌剂而广泛应用于食品、生物、医药等领域。但溶菌酶作为一种生物活性物质，其稳定性受温度影响较大，难以满足不同行业的需求。因此采用一种结合人工智能模型设计并筛选蛋白质突变体的改造策略，提高溶菌酶的热稳定性，扩大溶菌酶的实际应用范围。【方法】研究材料为瘤胃原虫基因组来源的溶菌酶RPL187，通过大肠杆菌异源表达蛋白质进行后续实验，利用国标法检测溶菌酶RPL187在不同温度（37、45、50、55℃）处理不同时间（0、1、2、4、8 h）下剩余酶比活的变化情况；基于人工智能模型生成并筛选RPL187的多点突变体，同样利用国标法检测溶菌酶突变体在不同温度处理不同时间下剩余酶比活的变化情况，并通过测定野生型与突变体Tm值、自由能、氢键数量、二级结构含量等变化进而研究热稳定性提高的机制。【结果】RPL187在37℃和pH 6.5条件下的酶比活为（142 000±2 000） U/mg，比蛋清溶菌酶高5倍；RPL187在37℃和45℃条件下较稳定，但随着温度升高和热处理时间延长，酶比活出现明显下降的情况，在55℃条件下孵育1 h，酶比活下降88%左右；为了提高RPL187的热稳定性，基于人工智能模型共筛选11个RPL187多点突变体；有7个突变体成功在大肠杆菌中可溶性表达，其中RPL187-592和RPL187-209具有抑制藤黄微球菌的活性；进一步热稳定性的检测结果显示，RPL187-592和RPL187-209在50℃下经热处理8 h后剩余酶比活较野生型分别高4.43倍和2.29倍，Tm值较野生型分别提高2.06℃和2.41℃，并且自由能较野生型分别降低1.57 kcal/mol和0.43 kcal/mol，表现出较野生型更稳定的构象和更高的热稳定性。与野生型相比，突变体RPL187-592的分子内氢键增加了3个，且氨基酸由亲水向疏水的转变（K2V和K137V）均有助于提高蛋白质的热稳定性；而在RPL187-209中，可能是由于氨基酸由柔性向刚性（K78P和K108P）以及由亲水向疏水（K137A）的转变而增加热稳定性。【结论】本改造策略可以有效提高蛋白质热稳定性，对于扩大溶菌酶应用范围的实际需求有着重要意义，同时也为相关研究提供可参考的依据。

关键词：溶菌酶藤黄微球菌酶比活热稳定性改造人工智能模型

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生物营养强化鸡蛋研究进展

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中国科学:生命科学 2025年第3期55卷 489-507页

作者：余雅男马可涵杨佳韩昊洋 DieudonnéMDansou 赵丽媛赵青余秦玉昌汤超华张军民中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽营养与饲养全国重点实验室北京100193

鸡蛋作为一种营养全面、全球居民接受度较高的食物之一,在全球具有重要地位,同时其作为营养素的有效载体,可以通过调节蛋鸡日粮进而调控鸡蛋营养物质组成,因此,生物营养强化鸡蛋成为一种有巨大潜力的功能性食品.我国居民宏量营养素摄入... 详细信息

鸡蛋作为一种营养全面、全球居民接受度较高的食物之一,在全球具有重要地位,同时其作为营养素的有效载体,可以通过调节蛋鸡日粮进而调控鸡蛋营养物质组成,因此,生物营养强化鸡蛋成为一种有巨大潜力的功能性食品.我国居民宏量营养素摄入充足,但是部分重点地区、重点人群,如婴幼儿、育龄妇女和高龄老年人摄入的重要微量营养素仍旧缺乏,而生物营养强化鸡蛋是解决这一问题的有效途径之一.因此,本文综述了ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)、维生素类(维生素A和叶酸等)、微量元素类(硒等)以及类胡萝卜素(虾青素和叶黄素)等生物营养强化鸡蛋生产的研究进展,重点围绕营养素的生物活性功能及其生产方式,以期为生物营养强化鸡蛋生产提供科学依据.

关键词：生物营养强化鸡蛋多不饱和脂肪酸维生素微量元素类胡萝卜素

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褪黑素通过改善线粒体动力学缓解棕榈酸诱导的牛子宫内膜上皮细胞损伤

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畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 3978-3987页

作者：王忆巩建飞衡诺胡樱凡王蕊王欢朱妮何维胡智辉郝海生朱化彬赵善江中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部畜禽生物育种重点实验室北京100193

旨在探究褪黑素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的牛子宫内膜上皮细胞(bovine endometrial epithelial cells,BEECs)线粒体动力学的影响及机制。本试验以BEECs为研究对象,分为3组:对照组、PA组和褪黑素组,其中,对照组添加0.2 mmol·... 详细信息

旨在探究褪黑素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的牛子宫内膜上皮细胞(bovine endometrial epithelial cells,BEECs)线粒体动力学的影响及机制。本试验以BEECs为研究对象,分为3组:对照组、PA组和褪黑素组,其中,对照组添加0.2 mmol·L^(-1)BSA溶剂,PA组添加0.2 mmol·L^(-1)PA,褪黑素组同时添加0.2 mmol·L^(-1)PA和100 nmol·L^(-1)褪黑素。本研究通过CCK8法(n=4)和Annexin V-FITC/PI双染法(n=3)检测细胞活力和凋亡情况;利用细胞流式术检测细胞线粒体内的ROS水平(n=3);进一步使用Seahorse XFe96细胞代谢呼吸动态分析仪检测耗氧率、基础呼吸值、ATP合成能力等线粒体呼吸功能的相关指标(n=4);qRT-PCR法检测线粒体动力学相关基因MFN1、DRP 1和PGC1-α的mRNA表达变化量(n=3);最后通过Western-Blot法检测线粒体动力学相关蛋白MFN1、p-DRP1、DRP1和PGC1-α的表达变化量(n=3)。结果显示:与PA组相比,1)添加褪黑素能显著降低BEECs线粒体ROS水平(P<0.05),并显著提高BEECs活力和显著降低BEECs凋亡率(P<0.05);2)Seahorse结果提示,添加褪黑素能显著提高线粒体基础呼吸值、ATP产量和最大耗氧量(P<0.05),此结果表明褪黑素能改善线粒体功能,促进线粒体有氧呼吸,增加ATP产量;3)qRT-PCR结果表明,添加褪黑素能显著降低MFN1、DRP 1的mRNA表达量,显著提高PGC1-α的mRNA表达量(P<0.05);4)Western-Blot检测发现褪黑素组中MFN1蛋白表达量显著下降(P<0.05),p-DRP1/DRP1和PGC1-α蛋白表达量显著上升(P<0.05)。综上,本研究表明褪黑素可能通过改善BEECs线粒体动力学功能,从而缓解PA诱导下的线粒体氧化应激和提高线粒体呼吸功能,最终增强BEECs活力和降低BEECs凋亡;本研究初步探究了褪黑素对PA诱导BEECs损伤的作用机制,为提高严重NEB奶牛低繁殖力提供了理论依据。

关键词：褪黑素棕榈酸牛子宫内膜上皮细胞线粒体动力学凋亡

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反刍动物瘤胃微生物培养组学研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第1期55卷 51-58页

作者：范定坤张吉贤付域泽马涛毕研亮张乃锋中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点实验室北京100081

瘤胃微生物被称为反刍动物的“隐藏器官”,与宿主营养物质的获取和生理健康的维持密切相关;目前宏基因组测序发现瘤胃中超过5800个基因组,然而超过90%的微生物尚未被培养,处于“生物信息黑箱”[1]中。培养组学是一种采用多种培养条件,... 详细信息

瘤胃微生物被称为反刍动物的“隐藏器官”,与宿主营养物质的获取和生理健康的维持密切相关;目前宏基因组测序发现瘤胃中超过5800个基因组,然而超过90%的微生物尚未被培养,处于“生物信息黑箱”[1]中。培养组学是一种采用多种培养条件,结合高通量测序技术鉴定菌种的培养方法。高通量、并行化的培养组学技术在瘤胃微生物中的应用,为在菌株水平上研究重点菌株功能及其与宿主互作关系提供了新的视角。然而,目前培养组学运用于瘤胃微生物的研究仍然较少,尚处于起步阶段。本文从瘤胃微生物特点、培养组学技术及其在瘤胃微生物培养中的应用现状、面临挑战等方面进行综述,为不断优化、规范化培养组学研究方案、拓展瘤胃可培养菌株资源、加快瘤胃生物信息黑箱的破解提供思考。

关键词：反刍动物瘤胃微生物培养组学

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