检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2024年第11期45卷 119-124页

作者：郭志伟王欣郝建新吴瑞瑞罗逸青刘万华陈占莉屈雷窦永喜翟军军榆林学院陕西省绒山羊工程技术研究中心陕西榆林719000 榆林学院生命科学学院陕西榆林719000 榆林学院榆林市兽医公共卫生与生物安全重点实验室陕西榆林719000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 榆林市畜牧兽医服务中心陕西榆林719000

为了解榆林市绒山羊大肠埃希氏菌对抗菌药物的耐药性以及耐药基因的携带情况,采集榆林地区羔羊、育成羊、经产母羊与种公羊粪便样品各72份,通过药敏试验检测其耐药表型,PCR扩增检测其耐药基因携带情况。试验共分离到288株大肠埃希氏菌,... 详细信息

为了解榆林市绒山羊大肠埃希氏菌对抗菌药物的耐药性以及耐药基因的携带情况,采集榆林地区羔羊、育成羊、经产母羊与种公羊粪便样品各72份,通过药敏试验检测其耐药表型,PCR扩增检测其耐药基因携带情况。试验共分离到288株大肠埃希氏菌,药敏试验结果表明,榆林市羊源大肠埃希氏菌对检测的16种抗菌药物均有不同程度的耐药性,耐药率较高的为林可霉素100%(288/288)、青霉素97.57%(281/288)、克林霉素96.88%(279/288)、红霉素93.06%(268/288),其中96.88%(276/288)为多重耐药,以3~4重耐药为主。耐药基因检出率较高的为gyrA、TEM、gyrB、CTX-M 9、TEM-1,分别占99.31%(286/288)、97.57%(281/288)、94.44%(272/288)、88.19%(254/288)、81.60%(235/288)。经统计学分析,耐药基因检出数在羔羊、育成羊、经产母羊与种公羊之间无显著差异。分离的288株大肠埃希氏菌抗菌药物耐药普遍,耐药基因分布广泛。试验结果为榆林市绒山羊抗菌药物的科学使用提供了基础数据,同时也为榆林市公共卫生安全提供了理论支撑。

关键词：大肠埃希氏菌抗菌药物耐药性绒山羊

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

田菁不同部位营养价值、分子结构特性和体外瘤胃降解率研究

引用

动物营养学报 2024年第5期36卷 3386-3400页

作者：王路遥江应松曹晓风韩波卜登攀邓娴赵庆华于静尤常清张晓冬马露贾亚军田雨佳天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 天津市农业农村委天津300454 中国科学院遗传与发育生物学研究所基因组生物学研究中心北京100101 天津梦得集团有限公司天津300188 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所反刍动物营养创新部北京100193 山东省农业科学院农作物种质资源研究所济南250100 海南省崖州湾种子实验室创新研究部三亚572024

本试验旨在研究田菁不同部位(包括叶、茎、根及全株)的营养价值、分子结构特征及体外瘤胃降解率,为反刍动物优质粗饲料资源的开发提供基础数据。试验按照概略养分分析法和康奈尔净碳水化合物和蛋白质体系(CNCPS)分析田菁叶、茎、根及全... 详细信息

本试验旨在研究田菁不同部位(包括叶、茎、根及全株)的营养价值、分子结构特征及体外瘤胃降解率,为反刍动物优质粗饲料资源的开发提供基础数据。试验按照概略养分分析法和康奈尔净碳水化合物和蛋白质体系(CNCPS)分析田菁叶、茎、根及全株的营养成分含量,同时利用傅立叶变换红外光谱(FTIR)技术对田菁不同部位的分子结构进行分析,最后进行体外瘤胃模拟发酵,分析田菁不同部位在瘤胃内的降解率以及产气量。结果表明:1)田菁不同部位间的蛋白质组成和二级结构光谱参数存在显著差异(P<0.05)。其中,叶的蛋白质成分含量较高,根的较低;叶的酰胺Ⅰ区和酰胺Ⅱ区的峰高和峰面积以及β-折叠峰面积较高,茎的酰胺Ⅰ区峰高和峰面积较低。2)田菁不同部位间的碳水化合物组成和分子结构光谱参数存在显著差异(P<0.05)。其中,根的中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)和酸性洗涤木质素(ADL)含量较高,叶的较低;根的总碳水化合物峰高和峰面积较高。此外,田菁的蛋白质和碳水化合物组成与分子结构之间存在一定的相关性。3)田菁叶的体外发酵粗蛋白质和干物质降解率最高,显著高于全株、茎和根(P<0.05);叶的48 h总产气量显著高于茎和根(P<0.05)。由此可见,田菁不同部位的营养价值与分子结构之间具有一定的相关性;其中,叶和茎的营养价值及利用率相对较高,而根的营养价值及利用率较低。

关键词：田菁傅立叶变换红外光谱分子结构营养价值瘤胃降解

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Tollip敲除猪肾细胞系的构建

引用

畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1810-1818页

作者：王家丽杨帆邵文华黄梦瑶曹伟军蒲秀瑛张伟郑海学中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730000 兰州理工大学生命科学与工程学院兰州730050 甘肃省病原生物学基础学科研究中心兰州730046

旨在探究Toll作用蛋白(toll-interacting protein, Tollip)对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)增殖的影响,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tollip基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney cell line, PK-15),并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果,然后利用CCK-8试剂盒测定Tollip缺失后细胞活力变化,确认敲除细胞与野生细胞无显著差异,用FMDV感染敲除细胞后,采用Western blot、间接免疫荧光、实时荧光定量和病毒滴度测定等方法测定病毒在敲除细胞系中复制情况。结果显示:感染FMDV后,敲除细胞与野生细胞相比,显著促进了病毒的复制。综上,在PK-15细胞上,成功构建Tollip缺失细胞系,且试验表明Tollip的缺失有助于FMDV的复制。研究结果为后续Tollip功能研究及抗病毒机制研究提供理论依据。

关键词： CRISPR/Cas9 Tollip基因细胞系口蹄疫病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

野生型非洲猪瘟病毒多重数字PCR方法的建立

引用

动物医学进展 2024年第4期45卷 32-39页

作者：李松达蒋亚君庞忠宝黄颖翟文竹朱鸿飞赵晓民贾红中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

为建立一种鉴别诊断野生株和基因缺失株非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的方法,针对ASFV的B646L、EP402R、DP96R基因保守序列设计3套引物和探针,优化三重荧光定量PCR体系作为基础建立微滴式数字PCR(droplet digital PCR,d... 详细信息

为建立一种鉴别诊断野生株和基因缺失株非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的方法,针对ASFV的B646L、EP402R、DP96R基因保守序列设计3套引物和探针,优化三重荧光定量PCR体系作为基础建立微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)检测方法,并对方法的特异性、灵敏性及重复性进行评估。结果显示,优化后的多重荧光定量PCR检测方法的标准曲线线性关系良好,对PRRSV、PEDV、PRV、VSV、PCV、RNase-free水、重组质粒标准品进行特异性检测,特异性良好;重复性试验结果显示,变异系数均小于2%;对3种重组质粒的最低检测下限均为102 copies/μL。参照上述多重荧光定量PCR方法优化后的条件,进行多重ddPCR检测方法的建立,并且对该方法进行评价。结果显示,ddPCR检测方法标准曲线的线性关系良好;特异性及重复性良好;最低检测下限B646L为11.6 copies/μL、EP402R为13.3 copies/μL、DP96R为16.9 copies/μL;ddPCR的检测灵敏度比荧光定量PCR有优势。使用建立的多重ddPCR方法对14份P3实验室中的样品进行实验室样品检测,样品检测符合率达到100%。成功建立了能够同时检测用于鉴别野毒株感染与疫苗株的荧光定量PCR和微滴式ddPCR方法。

关键词：非洲猪瘟病毒多重荧光定量PCR 微滴式数字PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多房棘球蚴感染小鼠脾淋巴细胞中差异表达miRNA的鉴定及其生物信息学分析

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第3期40卷 288-295页

作者：仲顺虎孙玥郭小腊郑亚东陈轶霞西北民族大学生命科学与工程学院中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室浙江农林大学动物科技学院动物医学院

目的筛选并鉴定多房棘球蚴感染的小鼠脾淋巴细胞中差异表达的微小RNA (miRNA),分析其可能涉及的生物学过程及信号通路,为进一步研究miRNA在寄生虫感染中的作用提供实验依据。方法将12只小鼠随机分为两组,每组6只,感染组小鼠每只腹腔注... 详细信息

目的筛选并鉴定多房棘球蚴感染的小鼠脾淋巴细胞中差异表达的微小RNA (miRNA),分析其可能涉及的生物学过程及信号通路,为进一步研究miRNA在寄生虫感染中的作用提供实验依据。方法将12只小鼠随机分为两组,每组6只,感染组小鼠每只腹腔注射600个多房棘球蚴原头节,对照组注射等量PBS。感染后90 d,将小鼠安乐死后取脾组织,采用密度梯度离心法分离各组小鼠脾淋巴细胞,使用TRIzol法提取两组小鼠脾淋巴细胞的总RNA。利用高通量测序技术鉴定并筛选差异表达的mi RNA;随机选取5个差异表达的miRNA进行实时荧光定量PCR (qRT-PCR)验证;利用miRanda和RNAhybrid两个数据库对差异表达的mi RNA进行靶基因预测,并进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析;利用Cytoscape软件构建mi RNA-mRNA相互作用网络图。结果通过高通量测序对照组和感染组分别获得12 104 631和10 856 249个纯净序列,其序列主要集中在20~24 nt。共筛选出69个差异表达2倍以上的miRNA,其中40个为上调表达的mi RNA,29个为下调表达miRNA。随机选取的5个差异表达miRNA经qRT-PCR验证结果显示,mi R-150-5p、mi R-181a-5p、 miR-467a-5p、 miR-467b-5p表达下调,miR-223-3p表达上调,与高通量测序结果相一致。GO功能和KEGG通路分析结果显示,69个差异表达miRNA的靶基因与黏膜免疫、应激反应、细菌防御反应等相关,并且主要富集在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K-Akt)、单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)等信号通路。miR-150-5p、 miR-181a-5p、 miR-467a-5p和mi R-467b-5p与m RNA相互作用网络图显示,miRNA与多个mRNA相互作用,mRNA也可被多个miRNA所调控。结论小鼠在多房棘球蚴感染过程中,其脾淋巴细胞中的miRNA呈显著差异表达,差异表达的miRNA主要富集在一些免疫相关的信号通路,可能在对抗多房棘球蚴的免疫反应中发挥作用。

关键词：多房棘球绦虫微小RNA 脾淋巴细胞高通量测序生物信息学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于高通量测序的梅花鹿卵巢衰老的转录组分析

引用

中国畜牧兽医 2023年第8期50卷 3157-3170页

作者：林乐丰刁云飞范冰峰刘理想邵静赵向远许保增中国农业科学院特产研究所长春130112 特种经济动物分子生物学国家重点实验室长春130112 吉林农业科技学院动物科技学院吉林132109

【目的】获取青年梅花鹿和老年梅花鹿卵巢组织的转录组信息,为深入研究梅花鹿卵巢衰老的潜在机制提供依据。【方法】以4岁龄青年梅花鹿和10岁龄老年梅花鹿卵巢作为试验样本,对样本进行石蜡切片、苏木精-伊红染色和卵泡计数;用Trizol法... 详细信息

【目的】获取青年梅花鹿和老年梅花鹿卵巢组织的转录组信息,为深入研究梅花鹿卵巢衰老的潜在机制提供依据。【方法】以4岁龄青年梅花鹿和10岁龄老年梅花鹿卵巢作为试验样本,对样本进行石蜡切片、苏木精-伊红染色和卵泡计数;用Trizol法提取卵巢样本RNA构建转录组文库,应用Illumina HiSeq TM 2000测序平台测序,对测序结果进行差异表达基因、GO功能、KEGG通路和蛋白互作网络分析,并挑选部分差异表达基因进行实时荧光定量PCR验证。通过RIPA裂解液提取卵巢样本蛋白并对组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)蛋白在青年和老年梅花鹿中的表达情况进行Western blotting检测。【结果】组织学分析结果表明,老年梅花鹿的卵巢卵泡数显著低于青年梅花鹿(P<0.05),而闭锁卵泡数极显著高于青年梅花鹿(P<0.01)。转录组学分析结果表明,老年和青年梅花鹿卵巢间共有1477个差异表达基因,其中表达上调基因503个,表达下调基因974个。GO功能和KEGG通路富集结果表明,免疫系统过程、转录、DNA损伤修复、炎症反应、凋亡等生物事件与卵巢衰老有关。实时荧光定量PCR结果显示,共有17个基因在老年和青年梅花鹿卵巢中表达量差异达显著或极显著水平(P<0.05;P<0.01),表明RNA-Seq结果可靠。Western blotting结果表明,H3K4me3蛋白在老年和青年梅花鹿卵巢中表达量存在显著差异(P<0.05)。【结论】青年和老年梅花鹿卵巢在卵泡数方面存在显著差异,通过RNA-Seq筛选出PI3K-Akt信号通路影响DNA损伤修复效率,参与梅花鹿卵巢衰老。H3K4me3在老年梅花鹿卵巢中高表达与转录激活有关。

关键词：梅花鹿卵巢衰老 RNA-Seq H3K4me3

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RAB20基因敲除PK-15细胞系的构建及其对口蹄疫病毒复制的影响

引用

中国兽医科学 2025年

作者：蔡建涛张伟陈治彤刘泓屹吕岳芹曹伟军冷非凡杨帆郑海学兰州理工大学生命科学与工程学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃省病原生物学基础学科研究中心

本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建RAB20基因敲除的PK-15细胞系，为RAB20蛋白功能研究提供生物材料，同时初步探究RAB20蛋白对口蹄疫病毒（FMDV）增殖的影响。首先，根据RAB20基因序列设计合成2对sgRNA，分别构建于载体质粒pX... 详细信息

本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建RAB20基因敲除的PK-15细胞系，为RAB20蛋白功能研究提供生物材料，同时初步探究RAB20蛋白对口蹄疫病毒（FMDV）增殖的影响。首先，根据RAB20基因序列设计合成2对sgRNA，分别构建于载体质粒pX459中，将重组质粒转染PK-15细胞，用嘌呤霉素筛选，并经有限稀释法进行亚克隆。接着，对单克隆细胞测序及Western-blot以鉴定RAB20基因的敲除，并利用CCK-8测定RAB20敲除对细胞活力的影响。然后，用FMDV感染RAB20敲除细胞和野生型细胞，利用Western-blot、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验和病毒滴度测定等方法比较FMDV在敲除细胞系与野生型细胞中的复制差异。结果显示：成功构建了RAB20基因敲除的PK-15细胞系，且与野生型细胞相比，FMDV在RAB20敲除细胞中的复制水平显著提升，表明RAB20对FMDV的复制具有抑制作用。该结果为进一步研究RAB20功能及其调控病毒复制的机制提供了细胞模型与数据支持。

关键词： CRISPR/Cas9 RAB20基因细胞系口蹄疫病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

样品前处理方法和试验条件优化对全株玉米青贮中氨态氮含量的影响

引用

中国饲料 2024年第21期 32-37页

作者：陈雅坤杨嘉宇梁韵仪何可可杨鹏标闫威明沈旖帆卜登攀赵连生中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽营养与饲养全国重点实验室北京100193 新疆农业大学新疆乌鲁木齐830000 上海牧高生物科技有限公司上海201306 河南科技大学河南洛阳471000

本试验旨在研究样品前处理方法和试验条件优化对全株玉米青贮中氨态氮含量的影响,为青贮饲料发酵指标检测提供方法指导。分别将20 g全株玉米青贮样品在不同浸提浓度(90、180 m L和270 m L)、浸提时间(12、24 h和48 h)和浸提温度(4℃、25... 详细信息

本试验旨在研究样品前处理方法和试验条件优化对全株玉米青贮中氨态氮含量的影响,为青贮饲料发酵指标检测提供方法指导。分别将20 g全株玉米青贮样品在不同浸提浓度(90、180 m L和270 m L)、浸提时间(12、24 h和48 h)和浸提温度(4℃、25~30℃室温)条件下处理,然后对不同比色波长和显色稳定性进行氨态氮的测定,筛选出最优条件。结果表明:(1)浸提浓度和浸提温度对全株玉米青贮中氨态氮含量无显著影响(P>0.05),但浸提24 h与浸提48 h比12 h的氨态氮含量分别高46.2%和53.8%(P<0.01)。(2)氨态氮含量随着水浴显色时间的延长显著提高(P<0.01),在30 min时显色达到稳定,最大吸收波长为630 nm;氨态氮回收率为98.81%~104.24%(平均为101.2%)。综上可知,可将20 g全株玉米青贮加入180 m L蒸馏水,4℃低温条件下浸提24 h制成浸提液,在37℃水浴中显色30 min后,630 nm波长下进行测定。

关键词：全株玉米青贮样品前处理试验条件优化氨态氮

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

BVDV-2d毒株的分离鉴定及同义密码子使用模式分析

引用

江苏农业学报 2024年第11期40卷 2111-2121页

作者：杨宣叶高明阳胡欣妍王进千王慧慧丁玉林曹小安马晓霞西北民族大学生物医学研究中心/生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730010 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046 内蒙古农业大学兽医学院动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018

本研究通过对腹泻犊牛肠道内容物中分离到的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株进行分析,首次确认该毒株为BVDV-2d亚型,命名为22-Gansu-F3。通过病毒分离、鉴定及全基因组测序,本研究不仅探讨了腹泻犊牛肠道的病理变化,还分析了其同义密码子使... 详细信息

本研究通过对腹泻犊牛肠道内容物中分离到的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)毒株进行分析,首次确认该毒株为BVDV-2d亚型,命名为22-Gansu-F3。通过病毒分离、鉴定及全基因组测序,本研究不仅探讨了腹泻犊牛肠道的病理变化,还分析了其同义密码子使用模式的遗传特征。结果表明,在开放阅读框中,CpG二核苷酸的使用频率显著降低,并且在选择同义密码子的过程中,精氨酸对含CpG同义密码子的使用具有显著抑制作用。为了进一步明确不同功能性蛋白质编码序列的同义密码子使用模式的遗传学特征,本研究比较了不同编码序列的同义密码子使用差异,发现N^(pro)和NS4A的编码区在同义密码子使用上与其他蛋白质显著不同。此外,BVDV-2d型22-Gansu-F3毒株的不同蛋白质编码区在适应猪、羊和骆驼的同义密码子使用模式上表现出良好的适应性,为这些动物体内病毒蛋白的翻译提供了潜在的物质基础。本研究结果为中国BVDV-2型的进化动态提供了新的理论依据,并为预防该亚型成为中国主要流行亚型提供了早期预警。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 BVDV-2d 病理变化同义密码子遗传

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

文昌鸡胚胎期胸肌发育特征的研究

引用

中国畜牧杂志 2024年第7期60卷 164-168页

作者：陈岸鸿徐铁山顾丽红蒋启程陆阳清郑心力广西大学动物科学技术学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西南宁5300041 海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海南海口571100 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101

为研究文昌鸡胚胎期胸肌发育规律及肌肉调控基因(MyoG、MRF4)对肌纤维发育的影响,本研究挑选了100枚蛋重(40±2) g的文昌鸡种蛋进行同条件孵化,测定8~20日胚龄(E8~E20)的胚胎重和胸肌重,计算其胸肌率,并取胸肌进行冰冻组织切片,观... 详细信息

为研究文昌鸡胚胎期胸肌发育规律及肌肉调控基因(MyoG、MRF4)对肌纤维发育的影响,本研究挑选了100枚蛋重(40±2) g的文昌鸡种蛋进行同条件孵化,测定8~20日胚龄(E8~E20)的胚胎重和胸肌重,计算其胸肌率,并取胸肌进行冰冻组织切片,观察胚胎期胸肌纤维变化情况。随后采用实时荧光定量(qRT-PCR)方法分析其胸肌中MRF4、MyoG、β-actin的表达量。结果显示:文昌鸡胚胎重在E19前随着胚龄增加而增加,在E19后略微下降;胸肌重在E16前随着胚龄增加而增加,并在E16后波浪式下降;胸肌率在E8~E14呈波浪式上升,E14后显著下降。E8~E14阶段成肌细胞大量增殖;E14阶段成肌细胞开始出现少量融合分化形成的多核肌管;E16阶段细胞核开始完全移动至肌纤维周围,肌纤维雏形形成;到E20阶段胸肌肌纤维已经具备成年动物肌纤维相同的形状。MYOG和MRF4在胸肌中分别在E14和E16达到表达高峰。综上,E14至E16阶段是文昌鸡胚胎胸肌发育最快的时期,是胸肌发育的关键转折期,其中,E14是胸肌从增殖到融合的关键过渡点,而E16是胸肌肌纤维成熟的关键点。本文通过探究文昌鸡胸肌发育与其关键调控基因之间的潜在联系,为制定高效养殖策略并提升文昌鸡胸肌产量提供了理论依据。

关键词：文昌鸡胚胎胸肌 MyoG MRF4

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：