检索结果-内蒙古大学图书馆

弓形虫TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能

中国兽医科学 2025年第5期55卷 577-585页

作者：洪照微王萌孙黎秀寇永杰马志雅江新成付宝权中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室湖南农业大学动物医学院山西农业大学动物医学院江西农业大学动物科学技术学院

为探究弓形虫中TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49＿240850条件性敲除虫株（TGME49＿240850-m AID-6HA），并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生... 详细信息

为探究弓形虫中TGME49＿240850基因编码的含WD40结构域蛋白的生物学功能，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建弓形虫TGME49＿240850条件性敲除虫株（TGME49＿240850-m AID-6HA），并分析该基因在弓形虫Pru-TIR1虫株的亚细胞定位和基本生物学功能。间接免疫荧光试验显示，TGME49＿240850蛋白定位于细胞核，并且加入吲哚乙酸后能将该蛋白降解；Western-blot结果表明，TGME49＿240850-m AID-6HA融合蛋白大小约为90 k Da；与对照组相比，TGME49＿240850-m AID-6HA虫株形成噬斑的能力（P<0.001）和增殖能力（P<0.01）均显著降低，而对入侵、逸出和缓殖子转化能力却无明显影响（P>0.05）。以上结果表明，TGME49＿240850蛋白的降解减弱了弓形虫的体外增殖能力。结论：成功构建了TGME49＿240850条件性敲除虫株，为进一步研究弓形虫中含WD40结构域相关蛋白的功能奠定基础。

关键词：弓形虫 WD40结构域条件性敲除生长素诱导降解系统

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巴戟天多糖对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响

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饲料研究 2024年第12期47卷 27-33页

作者：吴蔚孙瑞萍刘圈炜刘杰刘宇航张艳张浩洁魏立民三亚中国农业科学院国家南繁研究院海南三亚572000 广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室海南海口571100 广东生态工程职业学院广东广州510000

试验旨在研究饲粮中添加巴戟天多糖(Morinda officinalis polysaccharide,MOP)对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响。选取6日龄健康雌性文昌鸡600只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,各... 详细信息

试验旨在研究饲粮中添加巴戟天多糖(Morinda officinalis polysaccharide,MOP)对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响。选取6日龄健康雌性文昌鸡600只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,各试验组分别在基础饲粮中添加250、500、1000、2000 mg/kg的MOP。试验期40 d。结果表明:与对照组相比,各试验组十二指肠和空肠绒毛高度/隐窝深度均显著提高(P<0.05),500、1000、2000 mg/kg MOP组回肠绒毛高度/隐窝深度显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组十二指肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);250、500 mg/kg MOP组盲肠观测物种数和Ace指数显著提高(P<0.05);各试验组Shannon指数均显著上升(P<0.05);2000 mg/kg MOP组的Simpson指数显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组的Chao1指数均显著增加(P<0.05)。各试验组盲肠弯曲杆菌门相对丰度均显著降低(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组文昌鸡盲肠另枝菌属相对丰度显著降低(P<0.05),有益菌副拟杆菌属相对丰度显著提高(P<0.05);2000 mg/kg MOP组链球菌相对丰度显著降低(P<0.05);250、2000 mg/kg MOP组拟杆菌属相对丰度显著降低(P<0.05),CHKCI001菌属相对丰度显著提高(P<0.05)。研究表明,在文昌鸡的饲粮中添加适量MOP可改善肠道黏膜形态,提高十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA表达量,降低炎症因子TNF-αmRNA表达量,增加盲肠微生物Alpha多样性和均匀度,增加肠道有益菌含量,促进肠道健康,MOP添加量以500 mg/kg为宜。

关键词：巴戟天多糖文昌鸡肠道形态肠道屏障盲肠微生物

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广西规模水禽养殖场鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定与耐药性分析

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江苏农业科学 2024年第9期52卷 213-219页

作者：陈晓玉谭奕舟莫智杰胡静李军李常挺白慧丽王乐平马春霞尹杨燕彭昊廖玉英广西大学动物科学技术学院广西南宁530004 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001 农业农村部中国(广西)东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001

为了解广西地区规模化水禽养殖场鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的流行血清型、耐药情况及遗传关系,从广西南宁、贵港等地规模化水禽养殖场中临床上疑似感染RA的病死鸭、鹅体内得到5株分离菌,对分离菌进行鉴定,检测其毒... 详细信息

为了解广西地区规模化水禽养殖场鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)的流行血清型、耐药情况及遗传关系,从广西南宁、贵港等地规模化水禽养殖场中临床上疑似感染RA的病死鸭、鹅体内得到5株分离菌,对分离菌进行鉴定,检测其毒力基因,通过多重PCR检测方法鉴定血清型,并对其进行耐药性分析。经试验得到鉴定结果,RA分离菌株在血琼脂培养基上呈平滑圆润、露滴样,圆形隆起的灰白色菌落;革兰氏染色呈阴性短杆菌;5株分离菌经16SrRNA鉴定均为RA,将其命名为2022NNRA01~2022NNRA05;其中,血清鉴定2022NNRA01为血清1型,其余均为血清2型。药敏试验结果显示,5株RA对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢噻呋、大观霉素、氟苯尼考、磺氨甲唑敏感,对其他抗菌药物呈不同程度的耐药。其中,对安普霉素、庆大霉素、卡那霉素氨基糖苷类药物,四环素类药物多西环素和利福霉素类药物利福平的耐药率为100%。本试验经分离鉴定成功得到5株RA,且其耐药性分析结果可为广西地区RA疾病的疫苗免疫预防选择以及药物治疗提供依据。

关键词：鸭疫里默氏杆菌分离鉴定血清型毒力因子耐药性广西

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屎肠球菌FDT2的分离鉴定及抑菌特性研究

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中国畜牧兽医 2024年第7期51卷 3020-3029页

作者：张晓勇蓝伟王雅劳健龙李志贾丹孔祥颖胡凯茵温咏森吕舒婷陈曼殷宏李有全兰州理工大学生命科学与工程学院兰州730050 广东海洋大学滨海农业学院湛江524088 青海大学青海省畜牧兽医科学院西宁810016 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 海北州农牧综合服务中心海北810299

【目的】从牦牛粪便中分离和鉴定屎肠球菌并进行体外抑菌特性研究,以期筛选出具有优良抑菌特性的益生菌。【方法】用MRS培养基从青海省健康牦牛粪便中分离肠球菌,结合形态学和分子生物学鉴定后进行抑菌性研究。通过发酵过滤分离菌株上清... 详细信息

【目的】从牦牛粪便中分离和鉴定屎肠球菌并进行体外抑菌特性研究,以期筛选出具有优良抑菌特性的益生菌。【方法】用MRS培养基从青海省健康牦牛粪便中分离肠球菌,结合形态学和分子生物学鉴定后进行抑菌性研究。通过发酵过滤分离菌株上清液,采用打孔法观察其对应的抑菌效果,通过改变pH及加入过氧化氢酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶等方法来分析其抑菌物质,并探究温度和pH对菌株发酵上清液的影响。【结果】结合形态学及系统进化树分析表明,分离的2株菌(FDT2和D2)均为屎肠球菌。抑菌试验结果表明,屎肠球菌FDT2对5株致病菌均有抑制作用,其中对产肠毒素性大肠杆菌K88和大肠杆菌ATCC 43888的抑菌性最强,而屎肠球菌D2对5株致病菌均无明显抑菌作用。通过排酸试验证明,屎肠球菌FDT2发酵上清液中起抑菌作用的不是酸性物质;通过加入过氧化氢酶试验证明了抑菌物质中有过氧化氢存在,且发挥部分的抑菌作用;加入胃蛋白酶和胰蛋白酶后其抑菌圈直径极显著低于对照组(P<0.01),表明抑菌物质中包含细菌素,且在抑菌过程中发挥重要作用。随着温度的逐渐升高,屎肠球菌FDT2的抑菌能力有所降低,在100℃下仍有抑菌性,表明其具有较强的热稳定性。随着pH的升高,屎肠球菌FDT2的抑菌活性逐渐下降,说明细菌素在酸性环境下活性较强。【结论】试验共分离到2株菌,其中屎肠球菌FDT2具有良好的抑菌特性,能分泌细菌素等抑菌物质,有必要对其深入研究。

关键词：屎肠球菌鉴定形态学抑菌性

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猪丁型冠状病毒NSP14蛋白截短表达及其间接ELISA抗体检测方法的建立

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南方农业学报 2024年第4期55卷 1238-1248页

作者：刘思雨何颖卢冰霞赵武赵硕许心婷全琛宇秦毅斌欧阳康广西大学动物科学技术学院/广西高校动物疫病预防与控制重点实验室/广西兽用生物制品工程研究中心广西南宁530004 广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001

【目的】进行猪丁型冠状病毒(PDCoV)NSP14蛋白截短原核表达,制备PDCoV NSP14蛋白的多克隆抗体,并建立检测PDCoV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),为探究PDCoV NSP14蛋白的生物学功能及进行PDCoV监测和诊断提供参考依据。【方法】以PDC... 详细信息

【目的】进行猪丁型冠状病毒(PDCoV)NSP14蛋白截短原核表达,制备PDCoV NSP14蛋白的多克隆抗体,并建立检测PDCoV抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),为探究PDCoV NSP14蛋白的生物学功能及进行PDCoV监测和诊断提供参考依据。【方法】以PDCoV 1468B毒株为模板,构建NSP14截短基因原核重组质粒pET32a-NSP14,经双酶切和测序鉴定后,通过原核表达系统获得NSP14融合蛋白,将其纯化后免疫新西兰大白兔获得NSP14蛋白的多克隆抗体,进行Western blotting验证,并用间接ELISA测定其效价。以NSP14融合蛋白为抗原包被酶标板,采用方阵滴定法优化一系列反应条件,构建检测PDCoV抗体的间接ELISA。【结果】在构建的pET32a-NSP14重组质粒中,NSP14蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,其大小约40.2 kD;制备的NSP14蛋白多克隆抗体效价在1∶512000以上,经Western blotting验证,能与纯化的NSP14融合蛋白发生特异性反应。经过筛选,确定所构建检测PDCoV抗体间接ELISA的最佳反应条件:NSP14融合蛋白最佳包被浓度为4.0μg/mL,包被条件为37℃、2.0 h;封闭条件为5%脱脂奶粉封闭1.0 h;待检血清按1∶400稀释,孵育2.0 h;酶标二抗1∶2500稀释,孵育60.0 min;TMB底物显色时间为30.0 min。特异性试验结果表明,猪病阳性血清PRRSV、JEV、PCV2、PPV、PEDV和CSFV的OD450均小于0.235,说明优化的间接ELISA检测的病原与其他猪病毒阳性血清无反应,特异性良好。重复性试验结果表明,优化的间接ELISA检测猪病阳性血清的批内和批间变异系数均小于10.000%,说明优化的ELISA具有较好的重复性。【结论】成功制备具有高效价和良好免疫反应性的PDCoV NSP14蛋白多克隆抗体,并建立检测该抗体的特异性、敏感性和重复性良好的间接ELISA,可供进一步研究PDCoV NSP14蛋白的生物学功能及进行PDCoV监测和诊断参考应用。

关键词：猪丁型冠状病毒 NSP14蛋白原核表达多克隆抗体制备间接ELISA

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鸡胚免疫新城疫疫苗后宿主法氏囊转录组学分析

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中国畜牧兽医 2024年第4期51卷 1632-1641页

作者：蒋立人冯贺龙姜鑫瑞王梓晨张高峰商雨曾哲姚伦汪宏才罗青平田光明温国元长江大学动物科学技术学院荆州434025 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室武汉430064 湖北洪山实验室武汉430070

【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组... 详细信息

【目的】通过转录组学分析鸡胚免疫新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)TS09-C株后宿主法氏囊内免疫关键基因及信号通路分子转录差异,探究免疫后宿主法氏囊内免疫相关分子的调控反应。【方法】将60只18胚龄SPF鸡胚随机分为免疫组和对照组,30枚/组,免疫组将NDV TS09-C株通过羊膜腔接种鸡胚,剂量为103.0 EID 50/枚,注射体积为0.1 mL,对照组以同样的方法接种等体积PBS。检测免疫后不同时间点肺脏、胸腺、脾脏和法氏囊组织的病毒载量。选取病毒载量最高的法氏囊组织进行转录组学测序后,筛选免疫相关差异表达基因并分析其参与的主要功能及通路。【结果】免疫后1 d法氏囊组织中即可监测到病毒,免疫后3 d病毒载量达到最高。将免疫后3 d的法氏囊进行转录组学分析,与对照组相比,免疫组有453个基因上调、98个基因下调,其中免疫相关基因有36个上调、10个下调。免疫相关差异表达基因主要富集于自噬和细胞因子-细胞因子受体相互作用的免疫相关通路。差异表达基因蛋白互作分析显示,自噬通路中富集的BCL2与其他免疫相关基因有较多互作关系,且在B细胞活化、分化、免疫系统发育等功能注释中均有参与。【结论】本研究结果揭示了鸡胚免疫NDV TS09-C株后法氏囊内调控B细胞活化、分化的潜在靶向基因及通路,为进一步研究该毒株鸡胚免疫后B淋巴细胞调控的分子机制提供新的信息。

关键词：新城疫病毒(NDV) TS09-C株鸡胚免疫法氏囊转录组分析

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流行性出血病病毒VP7蛋白的表达及其单克隆抗体制备

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中国兽医科学 2025年

作者：钟匀汝张雨宋昱庆户鑫兵田占成关贵全罗建勋艾军何俊峰殷宏独军政甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室昆明海关技术中心甘肃省病原生物学基础学科研究中心

流行性出血病是由流行性出血病病毒(EHDV)经库蠓叮咬传播感染牛、羊、鹿等反刍动物的非接触性传染病，EHDVVP7蛋白是该病诊断的靶标蛋白。本研究参照GenBank中已发表的基因序列经密码子优化后人工合成EHDVVP7基因，将该基因克隆至表达质... 详细信息

流行性出血病是由流行性出血病病毒(EHDV)经库蠓叮咬传播感染牛、羊、鹿等反刍动物的非接触性传染病，EHDVVP7蛋白是该病诊断的靶标蛋白。本研究参照GenBank中已发表的基因序列经密码子优化后人工合成EHDVVP7基因，将该基因克隆至表达质粒pET-28a，构建重组质粒pET-EHDV VP7，将其转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)，以IPTG诱导表达且优化表达条件，通过Ni-NTA亲和层析法对表达的VP7蛋白进行纯化并用不同浓度咪唑透析复性，用复性后的VP7蛋白免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术制备抗VP7蛋白单克隆抗体。通过间接酶联免疫吸附试验、免疫印迹和细胞免疫荧光试验验证单克隆抗体的特异性。结果显示，利用大肠杆菌表达系统成功表达重组EHDVVP7蛋白，纯化后制备了2株稳定分泌针对EHDVVP7蛋白的单克隆抗体，分别命名为1D10和3C11，这2株单克隆抗体不仅能与大肠杆菌表达的重组EHDVVP7蛋白反应，而且也能与真核细胞表达的重组EHDVVP7蛋白结合，同时这2株单克隆抗体与重组蓝舌病毒VP7蛋白和重组非洲马瘟病毒VP7蛋白不发生反应。本研究成功表达和纯化出了重组EHDV VP7蛋白，制备了特异性抗VP7蛋白单克隆抗体，这为研究EHDV VP7 蛋白的结构功能以及诊断方法的建立奠定了基础。

关键词：流行性出血病病毒 VP7蛋白蛋白表达与纯化单克隆抗体

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弓形虫中含WD40结构域蛋白TGME49_228400的生物学功能研究

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中国兽医科学 2023年第10期53卷 1298-1306页

作者：张天宇孙黎秀祁淑芸郑晓楠张芝玮王金磊王萌袁安文湖南农业大学动物医学院湖南长沙>410000 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

利用CRISPR/Cas9技术成功构建了弓形虫Ⅱ型Pru虫株的TGME49_228400定位株和缺失株(PruΔ228400),研究了TGME49_228400在弓形虫中的亚细胞定位和基本生物学功能。Western-blot结果显示TGME49_228400蛋白大小为69.9 ku。间接免疫荧光检测... 详细信息

利用CRISPR/Cas9技术成功构建了弓形虫Ⅱ型Pru虫株的TGME49_228400定位株和缺失株(PruΔ228400),研究了TGME49_228400在弓形虫中的亚细胞定位和基本生物学功能。Western-blot结果显示TGME49_228400蛋白大小为69.9 ku。间接免疫荧光检测显示,TGME49_228400定位于顶质体,TGME49_228400缺失后对弓形虫顶质体的形态无影响。与Pru野生株相比,TGME49_228400缺失株形成噬斑和增殖的能力均显著减弱(P<0.01),而入侵、逸出、体外缓殖子转化能力和对小鼠的毒力无显著差异(P>0.05)。本研究结果可为后续阐明弓形虫中其他含WD40结构域蛋白的功能和作用机制奠定基础。

关键词：弓形虫 WD40结构域顶质体 CRISPR/Cas9 生物学功能

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Callipyge在绵羊中的研究进展

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中国草食动物科学 2023年第6期43卷 52-54页

作者：任子珍贺小云储明星畜禽生物育种全国重点实验室中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

绵羊是重要的家畜,其良好的产肉性能是养殖者获得经济效益的关键。Callipyge基因是影响绵羊产肉性能的一个重要基因,研究发现其与绵羊的体型、胴体品质和生长发育有关,并且对绵羊的屠宰率、饲料利用率等性状有一定的影响。文章就Callip... 详细信息

绵羊是重要的家畜,其良好的产肉性能是养殖者获得经济效益的关键。Callipyge基因是影响绵羊产肉性能的一个重要基因,研究发现其与绵羊的体型、胴体品质和生长发育有关,并且对绵羊的屠宰率、饲料利用率等性状有一定的影响。文章就Callipyge基因对绵羊体型、胴体品质和生长发育的影响进行了综述,并对其应用前景进行了展望。

关键词：绵羊 Callipyge 胴体品质生长发育

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哺乳动物输卵管参与繁殖调控的研究进展

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中国畜禽种业 2025年

作者：孙智鹏刘庆庆孙烨含赵永聚张子军储明星中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/畜禽生物育种全国重点实验室安徽农业大学动物科技学院西南大学动物科学技术学院/重庆市草食动物科学重点实验室

哺乳动物的繁殖过程伴随着生殖系统复杂的生物学变化,输卵管作为生命活动的起始部位,为哺乳动物繁殖过程提供了严格的受精和早期胚胎发育的环境。在自然受孕和着床前胚胎的发育过程中输卵管扮演了至关重要的角色,一方面是卵母细胞接收... 详细信息

哺乳动物的繁殖过程伴随着生殖系统复杂的生物学变化,输卵管作为生命活动的起始部位,为哺乳动物繁殖过程提供了严格的受精和早期胚胎发育的环境。在自然受孕和着床前胚胎的发育过程中输卵管扮演了至关重要的角色,一方面是卵母细胞接收与运输、精子获能、受精卵形成和早期胚胎发育的重要场所,另一方面因其具备分泌功能,为受精卵和早期胚胎提供营养,以确保早期生殖活动的成功。因此,该文综述了哺乳动物输卵管协同精子和卵子发挥功能,及其介导早期胚胎发育的生物学作用,为母体调控配子和胚胎发育以及提升母畜的繁殖性能提供研究方向。

关键词：配子胚胎输卵管繁殖调控哺乳动物

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