检索结果-内蒙古大学图书馆

家兔支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1的原核表达及其间接ELISA方法的建立

中国比较医学杂志 2011年第4期21卷 47-51页

作者：赵宁恽时锋王芳范志宇胡波刘涛江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)DNT蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌dnt基因序列(AB020025)针对其N-端设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷... 详细信息

目的表达支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)DNT蛋白,并以此建立检测Bb抗体的间接ELISA方法。方法参照GenBank公布的猪源支气管败血波氏杆菌dnt基因序列(AB020025)针对其N-端设计了一对特异性引物,PCR扩增出相应的核苷酸片段。将PCR扩增产物连接至原核表达载体pET-28a(+)载体中,以*** BL21(DE3)为表达菌株进行诱导表达,以纯化重组蛋白DNT1作为诊断抗原,通过探索最佳抗原包被量和抗体血清稀释倍数,建立检测支气管败血波氏杆菌重组蛋白DNT1抗体的ELISA方法。结果成功克隆了dntN-端的基因序列,并在*** BL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE、Western blot分析显示重组蛋白DNT1具有良好的抗原性。应用重组蛋白DNT1为抗原建立了检测Bb血清抗体的间接ELISA诊断方法。试验确定重组蛋白DNT1抗原的包被浓度为6.25μg/mL,最适血清稀释度为1∶100。结论建立的ELISA检测方法,不仅为Bb抗体检测提供了一种比较实用的血清学检测手段,也为进一步开发Bb检测试剂盒奠定了基础。

关键词：兔支气管败血波氏杆菌坏死毒素(DNT) 原核表达间接ELISA

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奶山羊睾丸组织冷冻保存及复苏后精原干细胞的分离培养

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中国兽医学报 2011年第4期31卷 583-588,593页

作者：朱海鲸华进联宋文聪黄建升田泽华西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心农业部动物生殖发育与胚胎工程重点开放性实验室陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

以关中奶山羊为材料,比较了2种玻璃化冷冻法和1种慢速冷冻法对睾丸组织保存的效率,复苏后发现3种冻存方法均有较高的成活率(超过50%),其中玻璃化Ⅱ组达65%以上,培养及检测后均有精原干细胞存活,在体外培养可以形成胚胎干细胞样克隆,其... 详细信息

以关中奶山羊为材料,比较了2种玻璃化冷冻法和1种慢速冷冻法对睾丸组织保存的效率,复苏后发现3种冻存方法均有较高的成活率(超过50%),其中玻璃化Ⅱ组达65%以上,培养及检测后均有精原干细胞存活,在体外培养可以形成胚胎干细胞样克隆,其表达精原干细胞和多能性干细胞的相关特异性标记:碱性磷酸酶(AP)、CD49f、CD133、C-Myc、Oct4和Klf4阳性,证明睾丸组织冷冻可以提供一种有效的奶山羊精原干细胞的保存方法。试验中所使用的低温保存方法简便易行,效果良好,表明这些方法可为癌症治疗等造成的无精症及少精症等不育症患者的医治以及一些珍稀濒危物种和优良畜禽的生殖细胞保存提供一种简捷有效的途径。

关键词：睾丸组织低温保存精原干细胞奶山羊

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细胞悬浮培养技术生产疫苗的研究进展

引用

中国家禽 2011年第13期33卷 45-47页

作者：张妍张文俊赵坤坤李群辉刘晓文刘文博刘秀梵扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室江苏扬州225009

传统的疫苗生产方法受很多因素的限制,为了适应扩大化工业生产的需要,细胞悬浮培养技术已经在工业生产上日益成熟,本文就此项技术中关于悬浮培养的细胞性能、细胞悬浮培养驯化的方法、悬浮培养细胞培养基的优化、生物反应器种类等要素... 详细信息

传统的疫苗生产方法受很多因素的限制,为了适应扩大化工业生产的需要,细胞悬浮培养技术已经在工业生产上日益成熟,本文就此项技术中关于悬浮培养的细胞性能、细胞悬浮培养驯化的方法、悬浮培养细胞培养基的优化、生物反应器种类等要素进行概述,并对此技术在疫苗生产中的应用作了展望。

关键词：细胞悬浮培养疫苗生产

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奶牛CRP基因多态性与奶牛乳腺炎及乳质乳量的相关性研究及生物信息学分析

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中国兽医学报 2011年第4期31卷 609-613,618页

作者：夏志刘小林徐阿娟郭家中贺花西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

选用400头中国荷斯坦奶牛取血样400份,每份各2管。根据奶牛CRP基因序列设计2对引物,利用PCR-SSCP技术检测CRP基因的多态性,并用透射免疫比浊法测定奶牛血清CRP水平,然后运用SPSS等统计学软件对其与乳房炎及乳质、乳量的关系进行统计分... 详细信息

选用400头中国荷斯坦奶牛取血样400份,每份各2管。根据奶牛CRP基因序列设计2对引物,利用PCR-SSCP技术检测CRP基因的多态性,并用透射免疫比浊法测定奶牛血清CRP水平,然后运用SPSS等统计学软件对其与乳房炎及乳质、乳量的关系进行统计分析。结果显示,在第1对引物的扩增片段中检测到多态位点,出现3种基因型(AA、AB、BB),第2对引物的扩增片段中并未检测到多态位点。将第1对引物所扩片段的不同基因型与奶牛乳腺炎的相关性作关联分析,结果3种不同基因型奶牛的体细胞数、乳质率、蛋白率、305d产奶量均无显著差异,但患乳房炎奶牛个体全为AA型。而CRP含量检测结果可知患乳房炎的奶牛与正常个体之间的血清CRP含量并无显著差异。

关键词： C反应蛋白多态性乳房炎抗性易感性感染奶牛

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猪源H10N5亚型禽流感病毒分离株生物特征初探

猪源H10N5亚型禽流感病毒分离株生物特征初探

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第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

作者：王楠杨影郭学波赵宗正王灿金梅林华中农业大学农业微生物国家重点实验室、动物医学院武汉 430070

2008年在对华中地区流感监控过程中，从猪体内分离到一株禽流感病毒A/swine/Hubei/10/2008(H10N5)。在国内尚属首次报道猪体内的H10N5亚型禽流感。同源性和遗传进化树分析显示毒株的8个片段均来自于禽源流感。分子特征分析显示，其受体... 详细信息

2008年在对华中地区流感监控过程中，从猪体内分离到一株禽流感病毒A/swine/Hubei/10/2008(H10N5)。在国内尚属首次报道猪体内的H10N5亚型禽流感。同源性和遗传进化树分析显示毒株的8个片段均来自于禽源流感。分子特征分析显示，其受体结合类型仍为禽源的α-2,3受体。毒株对BALB/C小鼠具有较低的致病力，但是病毒原液能够引起小鼠严重的间质性肺炎。本研究为禽流感直接向猪的传播提供了证据，并且初步检测了毒株的毒力，对于解释其致病机理有一定的意义。

关键词：猪源禽流感病毒克隆测序遗传进化致病机理

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禽流感病毒H9N2亚型西藏分离株HA和NA基因的克隆与序列分析

禽流感病毒H9N2亚型西藏分离株HA和NA基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：索朗斯珠邹威王灿孙小美金梅林陈焕春华中农业大学农业微生物国家重点实验室动物病毒室湖北武汉 430070 西藏农牧学院动物科学技术学院高原动物疫病研究室西藏林芝 860000 华中农业大学农业微生物国家重点实验室动物病毒室湖北武汉 430070

目的：从分子水平上掌握西藏各地区H9亚型禽流感病毒的遗传进化情况，以及它与国内外H9亚型禽流感病毒的变异情况和流行规律之间的关系。方法：本研究汇集了2009年不同时间从西藏部分地市养殖场分离的3株禽流感H9N2亚型毒株，采用RT-PC... 详细信息

目的：从分子水平上掌握西藏各地区H9亚型禽流感病毒的遗传进化情况，以及它与国内外H9亚型禽流感病毒的变异情况和流行规律之间的关系。方法：本研究汇集了2009年不同时间从西藏部分地市养殖场分离的3株禽流感H9N2亚型毒株，采用RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序，并对所得序列进行同源性和遗传进化分析。结论：禽流感病毒H9N2亚型西藏分离毒株与国内不同地域分离的流感病毒H9N2亚型毒株遗传进化并没有表现出一定的地域性，与地理位置相距较近的甘肃、宁夏等地方分离毒株同源性较低，而与地理位置相距较远的山东、浙江等地方分离毒株同源性较高。病毒是通过候鸟还是运输发生传播是值得研究的一个方面，明确病毒的传播途径和方式对西藏地区禽流感病的控制和预防具有重要意义。

关键词：禽流感病毒病毒分离株基因克隆序列分析流行病学

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Toll样受体7介导的抗病毒天然免疫反应研究进展

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中国兽医科学 2010年第6期40卷 645-649页

作者：何小兵房永祥贾怀杰陈国华曾爽景志忠程国锋中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

概述了Toll样受体(TLRs)的发现、种类及其作用模式,重点介绍了TLR7的分子结构、组织分布、识别的配体以及依赖MyD88接头分子的信号转导通路,最后,综述了TLR7介导的抗病毒效应的研究进展。提出,对TLR7及其作用机制的研究必将有助于新型... 详细信息

概述了Toll样受体(TLRs)的发现、种类及其作用模式,重点介绍了TLR7的分子结构、组织分布、识别的配体以及依赖MyD88接头分子的信号转导通路,最后,综述了TLR7介导的抗病毒效应的研究进展。提出,对TLR7及其作用机制的研究必将有助于新型动物用疫苗的创制。

关键词： Toll样受体7 单链RNA 髓样分化因子88 抗病毒免疫

来源：评论

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禽流感病毒H9N2亚型西藏分离株HA和NA基因的克隆与序列分析

禽流感病毒H9N2亚型西藏分离株HA和NA基因的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会2011年学术年会

作者：索朗斯珠邹威王灿孙小美金梅林陈焕春华中农业大学农业微生物国家重点实验室动物病毒室西藏农牧学院动物科学技术学院高原动物疫病研究室

引言/目的为了从分子水平上掌握西藏各地区H9亚型禽流感病毒的遗传进化情况,以及它与国内外H9亚型禽流感病毒的变异情况和流行规律之间的关系。材料方法本研究汇集了2009年不同时间从西藏部分地市养殖场分离的3株禽流感H9N2亚型毒株,采... 详细信息

引言/目的为了从分子水平上掌握西藏各地区H9亚型禽流感病毒的遗传进化情况,以及它与国内外H9亚型禽流感病毒的变异情况和流行规律之间的关系。材料方法本研究汇集了2009年不同时间从西藏部分地市养殖场分离的3株禽流感H9N2亚型毒株,采用RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序,并对所得序列进行同源性和遗传进化分析。

关键词：禽流感病毒克隆与序列分析分离株

来源：评论

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传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合体蛋白的表达及其免疫功能分析

传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合体蛋白的...

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：刘小娟王永山欧阳伟毕振威张海彬王忠灿南京农业大学动物医学院南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 南京军区军事医学研究所南京210002 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心南京210014

来源：评论

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新型生物制剂在断奶仔猪健康养殖中的应用

新型生物制剂在断奶仔猪健康养殖中的应用

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生猪优质健康养殖关键技术国际学术研讨会

作者：唐芬兰王清平赛法特(长沙)生物技术有限公司蛋白质工程技术中心

乳猪断奶后,乳源性生物活性因子和母源抗体来源消失,胃肠道结构及消化酶受到影响,主动免疫尚未建立,造成生长迟缓,易感发病。新型生物制剂在断奶仔猪保健促生长方面的应用研究越来越多,并逐步得到产业化应用。猪表皮生长因子(PEGF)能促... 详细信息

乳猪断奶后,乳源性生物活性因子和母源抗体来源消失,胃肠道结构及消化酶受到影响,主动免疫尚未建立,造成生长迟缓,易感发病。新型生物制剂在断奶仔猪保健促生长方面的应用研究越来越多,并逐步得到产业化应用。猪表皮生长因子(PEGF)能促进肠道绒毛膜的生长,提高刷状缘消化酶的活性;类胰岛素样因子(IGF)对细胞增殖和转化,提高动物生长性能方面有着重要的作用;蛋黄抗体为鸡蛋黄中的一种特异性免疫球蛋白IgY,抗腹泻蛋黄抗体对仔猪腹泻疾病有很好的被动免疫保护作用。而抗胆囊收缩素/生长抑素抗体可以中和机体内胆囊收缩素和生长抑素水平,减弱胆囊收缩素和生长抑素对采食、胃酸分泌、消化酶和生长激素的抑制作用,增加仔猪的采食量,增强消化功能,提高生长速度;蛋清溶菌酶是来自鸡蛋清中的一种具有杀菌功能蛋白质,活性高,具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力等作用;抗菌肽具有广谱抗菌性质,是生物体天然免疫系统的重要组成部分。本文总结了断奶仔猪饲料和饲养中应用较新颖的生物制剂以及仔猪营养和保健一些新的进展。

关键词：仔猪断奶关肠绒毛消化酶腹泻生长因子蛋黄抗体溶菌酶

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