检索结果-内蒙古大学图书馆

中国细胞生物学学报 2010年第5期32卷 800-807页

作者：张瑞杰苗向阳中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

动物转基因技术是20世纪70～80年代兴起的一种生物技术,它从诞生之日起,就预示了广阔的应用前景。转基因技术经过多年的发展,已经形成了显微注射法、逆转录病毒载体法、精子载体法和体细胞核移植法等比较成熟的方法。近年来,又出现了性... 详细信息

动物转基因技术是20世纪70～80年代兴起的一种生物技术,它从诞生之日起,就预示了广阔的应用前景。转基因技术经过多年的发展,已经形成了显微注射法、逆转录病毒载体法、精子载体法和体细胞核移植法等比较成熟的方法。近年来,又出现了性腺注射法、RNA干扰法、基因打靶结合克隆法等新技术。本文在前人研究的基础上重点总结了各种转基因方法的基本原理和国内外最新研究动态,对各种转基因技术的优缺点进行了详细的探讨。最后本文还对转基因技术在畜牧生产中的应用进行了阐述,并对转基因技术总体存在的问题进行了分析。

关键词：转基因技术 RNAi 基因打靶动物克隆生物反应器

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甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶1研究进展

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中国畜牧兽医 2011年第1期38卷 42-47页

作者：张海燕王长法仲跻峰杨桂文安利国山东师范大学生命科学学院山东济南250014 山东省农业科学院奶牛研究中心山东济南250100

甘露糖结合凝集素途径是补体激活的一个重要途径,在无特异性免疫应答的生物体内或在机体发生免疫应答之前,凝集素补体途径可发挥主要的防御作用。甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶(mannose-binding lectin-associated ser-ine protea... 详细信息

甘露糖结合凝集素途径是补体激活的一个重要途径,在无特异性免疫应答的生物体内或在机体发生免疫应答之前,凝集素补体途径可发挥主要的防御作用。甘露糖结合凝集素相关的丝氨酸蛋白酶(mannose-binding lectin-associated ser-ine protease,MASP)是凝集素途径的中心蛋白酶分子。甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)或纤维胶凝蛋白(fi-colin)分子通过其胶原样区(collagen-like region,CLR)与MBL相关丝氨酸蛋白酶MASP-1或MASP-2结合形成复合物,在其C端糖识别域(carbohydrate recognition domain,CRD)识别、结合病原微生物的糖结构后,可活化MASPs酶原,从而激活补体凝集素途径而发挥天然抗感染免疫效应。

关键词：补体 MASP-1 结构功能

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传感器在致病菌检测上的应用

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中国农学通报 2010年第17期26卷 13-16页

作者：张杰刘永生中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

生物传感器因其具有灵敏、专一、微量、快速、准确、经济实用的特点,在工业、农业、环境监测及生物医学等领域的生物传感器相继得到开发。它是利用抗原或抗体检测相应的抗体或抗原的一种传感器技术。此文就生物传感器在细菌的应用进行... 详细信息

生物传感器因其具有灵敏、专一、微量、快速、准确、经济实用的特点,在工业、农业、环境监测及生物医学等领域的生物传感器相继得到开发。它是利用抗原或抗体检测相应的抗体或抗原的一种传感器技术。此文就生物传感器在细菌的应用进行综述性报道,并就其发展进行展望。

关键词：免疫传感器细菌微生物检测

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口蹄疫诊断技术的研究进展

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生物技术通报 2010年第5期26卷 70-73页

作者：刘明徐娜李志勇柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性,热性,高度接触性传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失。本文综述了目前口蹄疫诊断技术的研究进展,其中包括了病毒分离技术等传统的诊断方法,以及血清学诊断方法,还介绍了环介导等温扩增技术等... 详细信息

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性,热性,高度接触性传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失。本文综述了目前口蹄疫诊断技术的研究进展,其中包括了病毒分离技术等传统的诊断方法,以及血清学诊断方法,还介绍了环介导等温扩增技术等几种新的诊断技术。

关键词：口蹄疫诊断技术研究进展

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猪圆环病毒Ⅱ型的研究进展

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生物技术通报 2010年第6期26卷 22-26页

作者：徐娜李宝玉娄忠子柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus type2,PCV-2)是引起猪圆环病毒病(porcine circovirus desease,PCVD)的主要病原,在猪群中广泛存在。本病毒可以单独或者与其它病原混合感染猪只,引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪皮炎与... 详细信息

猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus type2,PCV-2)是引起猪圆环病毒病(porcine circovirus desease,PCVD)的主要病原,在猪群中广泛存在。本病毒可以单独或者与其它病原混合感染猪只,引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪皮炎与肾病综合征(PDNS)等一系列较为复杂的疾病,严重威胁猪只的健康。经过10余年持续不断的努力,各国对PCV-2的研究日益深入,对病毒的相关特性也有了较为清晰的认识。对病毒的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、病理变化、诊断和防制对策等方面的研究进展进行了简要综述。

关键词：猪圆环病毒病原学致病机理诊断防制

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荷斯坦奶牛瘤胃微生物脲酶的分离与鉴定

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畜牧兽医学报 2010年第6期41卷 692-696页

作者：赵圣国王加启刘开朗李旦于萍卜登攀中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070

本研究旨在从荷斯坦奶牛瘤胃中分离活性脲酶。从奶牛瘤胃中收集瘤胃内容物,通过离心和超声破碎的方法得到不含菌体细胞的瘤胃液(CFRF)和瘤胃菌体蛋白液(RCP),利用85%硫酸铵盐析,并透析后,用HiTrap Capto Q离子交换层析柱纯化脲酶。将纯... 详细信息

本研究旨在从荷斯坦奶牛瘤胃中分离活性脲酶。从奶牛瘤胃中收集瘤胃内容物,通过离心和超声破碎的方法得到不含菌体细胞的瘤胃液(CFRF)和瘤胃菌体蛋白液(RCP),利用85%硫酸铵盐析,并透析后,用HiTrap Capto Q离子交换层析柱纯化脲酶。将纯化后的脲酶用活性PAGE分离,并利用改良的Fishbein染色法,确定脲酶条带位置,切胶,经胰蛋白酶消化后,用LC-MS/MS分析,并用SEQUEST软件在NCBI数据库搜索与质谱信号相匹配的肽段和蛋白质。结果表明从CFRF和RCP中分离出较高活性的脲酶,但经染色后只有RCP脲酶显示活性条带。经质谱分析,最终鉴定出了3种微生物来源脲酶,分别与嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius)和嗜碱芽孢杆菌(Bacillus halodurans)相似。这说明绕过纯培养微生物,直接从瘤胃中分离脲酶,来研究其性质和来源是可行的,尤其适合对未培养微生物的研究。

关键词：瘤胃脲酶分离纯化活性电泳 LC-MS/MS 蛋白质组

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猪繁殖与呼吸综合征病毒M+N基因重组腺病毒载体的构建

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生物技术通报 2010年第10期26卷 168-171页

作者：徐娜李宝玉柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

本研究构建了M+N基因的重组腺病毒载体。首先用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因,将两者用口蹄疫病毒2A序列串联起来,将连接好的M+N基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经筛选获得了重... 详细信息

本研究构建了M+N基因的重组腺病毒载体。首先用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因,将两者用口蹄疫病毒2A序列串联起来,将连接好的M+N基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经筛选获得了重组质粒pAdTrack-CMV/M+N;然后在大肠杆菌BJ5183内将此重组质粒和腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组,获得了插有外源基因的重组腺病毒质粒pAd/M+N;最后,经PacⅠ酶切线性化后转染HEK-293细胞,成功获得含有M+N基因的重组腺病毒,为重组腺病毒活载体疫苗的研究奠定基础。

关键词：猪繁殖与呼吸系统综合征病毒 M+N基因重组腺病毒

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转基因植物疫苗研究进展

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生物技术通报 2010年第4期26卷 28-32页

作者：李杨李志勇柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

疫苗是当今世界上控制及预防疾病发生的有效方法,利用植物作为生物反应器生产转基因疫苗,成本低廉,方便安全等特点,被认为新型疫苗的研究热点。从4个方面综述了转基因疫苗的研究概况,分析了其优点及不足,并对其未来的发展进行了展望。

关键词：转基因植物疫苗研究进展

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环介导等温扩增(LAMP)技术的应用研究

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中国农学通报 2010年第8期26卷 87-89页

作者：刘永生丁耀忠张杰中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

LAMP技术是一种新的核酸扩增技术,具有简单、快速、特异性强的特点,具有替代PCR方法的可能性。通过总结LAMP技术快速检测和诊断病毒性疾病、真菌和细菌性疾病的案例,预测了它的应用前景(可能期待PCR技术),从而为其研究和应用提供一个平台。

关键词：环介导扩增技术聚合酶链反应应用

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鸭疫里氏杆菌dpp Ⅳ基因缺失突变株的构建与鉴定

鸭疫里氏杆菌dpp Ⅳ基因缺失突变株的构建与鉴定

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第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

作者：周祖涛李自力彭晓娅肖运才王喜亮金卉刘梅石德时孟宪荣毕丁仁华中农业大学动物医学院湖北武汉 430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070

鸭疫里氏杆菌(RA)病是严重危害全世界养鸭业的主要细菌性传染病之一，该病给养鸭业造成了巨大的经济损失。然而，目前对RA的毒力因子和致病机理知之甚少。二肽肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)是多种病原菌重要的毒力因子，能够介导病原菌的粘附、降解结... 详细信息

鸭疫里氏杆菌(RA)病是严重危害全世界养鸭业的主要细菌性传染病之一，该病给养鸭业造成了巨大的经济损失。然而，目前对RA的毒力因子和致病机理知之甚少。二肽肽酶Ⅳ(DPP Ⅳ)是多种病原菌重要的毒力因子，能够介导病原菌的粘附、降解结缔组织以及引起血管通透性的变化等，在体内外条件下RAdpp Ⅳ基因的差异表达显著，因此推测二肽肽酶Ⅳ可能是RA重要的毒力因子。本研究采用基因组步移技术分段克隆RA血清1型云梦分离株(RA-YM)dpp Ⅳ全基因，构建含壮观霉素抗性基因的pRE-LSR重组转移质粒，并转化供体菌*** X7213，通过接合转移和SacB负向筛选标记完成RA-YM dpp Ⅳ基因缺失突变株的构建与筛选，并利用PCR对突变株进行验证，结果表明获得了比较稳定的dpp Ⅳ基因缺失突变株，为下一步确定DPP Ⅳ是RA关键的毒力因子奠定基础以及为RA基因工程疫苗的设计与研发提供理论依据。

关键词：鸭疫里氏杆菌二肽肽酶Ⅳ 缺失突变株基因构建菌种鉴定

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