检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽农业科学 2010年第33期38卷 18673-18674,18677页

作者：杨双马军武中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室甘肃兰州730046

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了... 详细信息

细胞传感器以细胞作为敏感元件来研究信号识别、传导和指示的过程,可以用于细胞的信息功能及目的物质的检测,具有快速、敏感和特异的特点,已被广泛用于食品安全、农药残留、环境污染、病原微生物及生物安全检测等方面。笔者主要介绍了细胞传感器在病原体和毒素检测中的最新研究进展,分别叙述了现有的各类细胞传感器的元件构成和作用原理,并展望了细胞传感器未来研究和应用方面的发展方向。

关键词：细胞传感器病原体毒素细胞受体细胞病变

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日本血吸虫蛋白酶体α2亚基基因的克隆、表达及功能分析

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生物工程学报 2010年第4期26卷 509-516页

作者：洪炀韩宏晓彭金彪李晔石耀军傅志强刘金明李祥瑞林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海200241 南京农业大学动物医学院南京210095

26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession ***8137... 详细信息

26S蛋白酶体是一种能够降解大多数内源性蛋白的多亚基复合物,它的蛋白降解作用能够影响细胞周期、转录控制和其他一些重要的细胞进程。本实验利用PCR技术从日本血吸虫18d童虫中首次扩增到蛋白酶体α2亚基基因(GenBank Accession ***813725),序列分析表明该基因的开放阅读框(ORF)含708bp,编码235个氨基酸,理论分子量25.84kDa。同源性分析结果显示,该基因为日本血吸虫蛋白酶体α2亚基,命名为SjPSMA2。实时定量PCR分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d和42d虫体中都有表达,7d和23d虫体表达量低于其他几个时期。构建了该基因的原核表达质粒pET28a(+)-SjPSMA2,在大肠杆菌系统中成功获得了表达,重组蛋白以包涵体形式存在,Western blotting显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别,并且能检测到天然状态下该蛋白的存在。应用重组蛋白免疫BALB/c小鼠后,诱导产生了较高的特异性抗体水平及12.33%的减虫率和35.23%的肝脏减卵率。SjPSMA2基因及其表达产物的获得,为探索蛋白酶体在血吸虫生长发育中的作用提供了重要基础。

关键词：日本血吸虫蛋白酶体α2亚基克隆表达免疫保护

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轮状病毒疫苗的研究进展

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家畜生态学报 2011年第1期32卷 98-101页

作者：宋玲玲王延东王洪梅武建明刘晓高运东仲跻峰何洪彬山东省农业科学院奶牛研究中心山东济南250100

轮状病毒(RV)是引起全球婴幼儿腹泻的主要病源之一,它不仅在发展中国家流行,也在发达国家流行。有研究表明改变卫生条件并不能有效制止轮状病毒的传播。疫苗接种是唯一可行的预防控制轮状病毒较高发病率和死亡率的方法,因此轮状病毒疫... 详细信息

轮状病毒(RV)是引起全球婴幼儿腹泻的主要病源之一,它不仅在发展中国家流行,也在发达国家流行。有研究表明改变卫生条件并不能有效制止轮状病毒的传播。疫苗接种是唯一可行的预防控制轮状病毒较高发病率和死亡率的方法,因此轮状病毒疫苗的研发具有非常重要的现实意义。论文针对近几年来研发的轮状病毒疫苗作一综述。

关键词：轮状病毒疫苗腹泻

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6株猪圆环病毒2型山东分离株ORF2基因的克隆与序列分析

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畜牧与兽医 2010年第10期42卷 59-62页

作者：王可孙健全孔文涛孔健孙芝兰山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东大学微生物技术国家重点实验室山东济南250100

分别从山东省6个地区的猪圆环病毒2型(PCV2)阳性病料中PCR扩增ORF2基因。以ORF2为靶基因进行6个毒株的分子流行病学分析。序列同源性分析表明,6个毒株之间的核苷酸序列同源性为93.3%～99.7%,氨基酸序列同源性为92.3%～100%;氨基酸序列存... 详细信息

分别从山东省6个地区的猪圆环病毒2型(PCV2)阳性病料中PCR扩增ORF2基因。以ORF2为靶基因进行6个毒株的分子流行病学分析。序列同源性分析表明,6个毒株之间的核苷酸序列同源性为93.3%～99.7%,氨基酸序列同源性为92.3%～100%;氨基酸序列存在2个高变区,分别位于序列的57～90和190～220位区域,其中57～90区域位于结构蛋白的免疫反应活性区;遗传进化树分析显示,SDI、SD Ⅲ、SD Ⅴ、SD Ⅵ与法国株和中国农大株共同形成一群,可能起源于共同的祖先;SD0282、SD Ⅳ与其他7株PCV2毒株共同形成另一大群,与海南株的亲缘关系最近;结合GenBank报道的山东境内分离的13个毒株的ORF2基因序列进行RFLP分析,可将该省PCV2流行毒株分为CHN-2H型、CHN-2F型、CHN-2I型和二种新的基因型,命名为CHN-2J和CHN-2K型。其中,CH-2H型所占比例最高,为优势基因型,是引起该省规模化猪场暴发PCV2疾病的主要基因型,因此研制防治该省PCV2的疫苗应以此基因型为主。

关键词：猪圆环病毒山东省分离株 ORF2基因序列同源性优势基因型流行毒株 PCV2 流行病学分析氨基酸进化树分析规模化猪场序列存在区域亲缘关系免疫反应结构蛋白 RFLP分析 GenBank 活性区

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鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫增强效应研究

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中国预防兽医学报 2011年第3期33卷 214-218页

作者：张毅王红宁樊汶樵张安云曹海鹏郭自成丁梦蝶四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室/生物资源与生态环境教育部重点实验室/"985工程"西南资源环境与灾害防治科技创新平台四川成都610064

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达... 详细信息

为研究鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DNA疫苗免疫效果的影响,根据GenBank登录的鸡IL-1β和IL-16序列设计两对引物,采用RT-PCR方法从四川山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆IL-1β和IL-16基因,与真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接构建了pDNAIL-1β和pDNAIL-16。分别将两种重组质粒与IBVDNA联合免疫SPF雏鸡并进行攻毒试验。结果表明,pDNAIL-1β和pDNAIL-16均能促进血清中特异性抗体水平和外周血T淋巴细胞亚群数量的增加(p<0.05),增强IBV DNA疫苗对同型强毒的保护率15%～25%,pDNAIL-1β提升DNA疫苗的抗体水平的时间比pDNAIL-16多7d。试验表明,鸡IL-1β、IL-16基因真核表达质粒对IBV DNA疫苗的免疫具有增强作用。

关键词：禽传染性支气管炎病毒鸡IL-1β 鸡IL-16 免疫增强作用

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济宁青山羊高繁殖力候选基因类固醇21-羟化酶基因(CYP21)的研究

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农业生物技术学报 2010年第5期18卷 917-924页

作者：闫艳王凭青储明星古丽格娜狄冉方丽马月辉李奎重庆大学生物工程学院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室新疆畜牧科学院畜牧研究所

采用PCR-SSCP和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测类固醇21-羟化酶基因(steroid 21-hydroxylase,CYP21)10个外显子在山羊(Capra hircus)低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)、中等繁殖力品种(波尔山羊)和高繁殖力品种(济宁青山羊)... 详细信息

采用PCR-SSCP和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测类固醇21-羟化酶基因(steroid 21-hydroxylase,CYP21)10个外显子在山羊(Capra hircus)低繁殖力品种(安哥拉山羊和内蒙古绒山羊)、中等繁殖力品种(波尔山羊)和高繁殖力品种(济宁青山羊)中的碱基变异,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。结果表明,10对引物中仅引物P10扩增片段存在多态性。对于P10扩增产物,在内蒙古绒山羊、波尔山羊和济宁青山羊中检测到AA、AB和BB基因型,在安哥拉山羊中检测到AA和AB基因型;测序分析发现,BB与AA基因型相比发生了A2789C、C2791A、G2818A、G2851C、G2852T和G2854A的突变,在第2821与2822位发生了两个碱基CG的缺失突变,导致426～448位共有19个氨基酸发生改变;济宁青山羊BB和AB基因型产羔数最小二乘均值分别比AA基因型的多0.81只(P<0.05)和0.47只(P<0.05),BB和AB基因型之间差异不显著(P>0.05)。研究结果初步表明CYP21基因的B等位基因是提高山羊产羔数的一个潜在有效的DNA标记。

关键词：山羊高繁殖力类固醇21-羟化酶基因(CYP21) PCR-SSCP

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芒的组织培养与胚性愈伤组织诱导研究

芒的组织培养与胚性愈伤组织诱导研究

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第二届海峡两岸植物生理与分子生物学教学和科研工作会议暨学术研讨会

作者：孙瑜胡恒康张启香陈贝郑炳松浙江农林大学亚热带森林培育省部共建国家重点实验室培育基地浙江临安 311300 浙江农林大学林业与生物技术学院浙江临安 311300 浙江农林大学亚热带森林培育省部共建国家重点实验室培育基地浙江临安 311300 江西农业大学园林与艺术学院南昌 330045 浙江农林大学林业与生物技术学院浙江临安 311300

以无菌萌发的幼苗及胚轴为外植体,对影响芒(Miscanthus sinensis)不定芽增殖、生根及胚性愈伤组织诱导的因素进行了比较研究.结果表明:在不定芽增殖培养基(含1.0mg·L-1BA、2.0mg·L-1KT、0.05mg·L-1NAA、3％蔗糖和0.8％... 详细信息

以无菌萌发的幼苗及胚轴为外植体,对影响芒(Miscanthus sinensis)不定芽增殖、生根及胚性愈伤组织诱导的因素进行了比较研究.结果表明:在不定芽增殖培养基(含1.0mg·L-1BA、2.0mg·L-1KT、0.05mg·L-1NAA、3％蔗糖和0.8％琼脂的MS培养基,pH5.7)中,增殖系数高达6.69.在不定芽生根培养基(含0.2mg·L-1NAA、3％蔗糖和0.8％琼脂的1/2MS培养基,pH5.7)中,生根率达95.4％,生长状况良好,无褐化现象.以幼叶、胚根为外植体未能诱导出胚性愈伤组织,而采用胚轴培养,可诱导出胚性愈伤组织.在含2.0mg·L-12,4-D,0.5mg·L-1BA,0.1mg·L-1VB1的HB培养基中,诱导率可达82％,褐化率仅为6.5％.

关键词：芒组织培养胚性愈伤组织不定芽增殖系数生根率

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猪γ-干扰素的克隆表达及单抗的潜在应用

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生物技术通报 2010年第1期26卷 173-179页

作者：娄忠子兰喜李建强李学瑞李志勇殷相平柳纪省中国农业科学院兰州兽医研究所传染病室家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部草食动物疫病重点开放实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室兰州730046

以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后... 详细信息

以刀豆素A(ConA)刺激长白猪外周血单个核细胞(PBMC),提取的总RNA为模板,采用一步法RT-PCR扩增出包含猪γ-干扰素(PoIFN-γ)完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a(+)上,构建pET-IFN-γ融合表达载体,转化入Rosetta(DE3)后IPTG诱导表达,得到大小约为36.8kD的目的蛋白。将目的蛋白检测及纯化后免疫后BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,最终筛选出3株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞。ELISA叠加试验显示,3株单抗针对相同或邻近的PoIFN-γ抗原表位,制备的腹水中单抗间接ELISA效价为1×104。选取单抗IF-2株进行单抗的潜在应用研究,Westernblotting分析结果显示单抗IF-2株能与融合表达蛋白产生特异性反应,与pET-32a(+)标签蛋白无反应;间接免疫荧光检测(IFA)发现,在采用腺病毒表达系统表达PoIFN-γ的HEK-293细胞中散在大量特异性荧光。

关键词：猪γ-干扰素融合表达单克隆抗体潜在应用

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VIPR-1基因5′调控区多态位点与鸡开产性状的相关性

VIPR-1基因5′调控区多态位点与鸡开产性状的相关性

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第十五次全国家禽学术讨论会

作者：周敏谢袖娟和俊沈栩徐海平张细权江西教育学院生物技术研究所江西南昌 330029 华南农业大学动物科学学院/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室广东广州510642

本研究旨在探索血管活性肠肽Ⅰ型受体(vasoacitve intestinal peptide type Ⅰ receptor,VIPR-1)基因5′调控区(-496bp～-1bp)多态性及其单倍型效应对鸡开产性状的影响,寻找影响肉鸡开产性状的分子标记.采用测序技术对498只清远麻鸡VIP... 详细信息

本研究旨在探索血管活性肠肽Ⅰ型受体(vasoacitve intestinal peptide type Ⅰ receptor,VIPR-1)基因5′调控区(-496bp～-1bp)多态性及其单倍型效应对鸡开产性状的影响,寻找影响肉鸡开产性状的分子标记.采用测序技术对498只清远麻鸡VIPR-1基因5′调控区进行多态性检测及基因型分析,利用最小二乘均数对VIPR-1基因5′调控区的多态位点与开产性状进行相关分析,利用PHASE软件对多态位点进行单倍型分析.结果表明,VIPR-1基因5′调控区存在12个多态性位点,其中位点G-359T对开产胫长的影响达到显著水平(P＜0.05);构建的单倍型对开产体重的影响达到显著水平(P＜0.05).

关键词：鸡血管活性肠肽Ⅰ型受体基因基因多态性单倍型开产性状

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瘤胃微生物基因组文库中BAC末端序列分析

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甘肃农业大学学报 2010年第2期45卷 6-9页

作者：赵圣国王加启李发弟刘开朗卜登攀李旦于萍甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

基于前期从瘤胃微生物基因组文库中筛选的功能酶克隆菌,利用T7和pIBRP引物,测定功能酶克隆菌的BAC末端序列,并利用NCBI Blast系统对BAC末端序列进行分析.结果表明:共得到26条BAC末端序列,经Blast比对分析,与已知编码基因的匹配度低,而... 详细信息

基于前期从瘤胃微生物基因组文库中筛选的功能酶克隆菌,利用T7和pIBRP引物,测定功能酶克隆菌的BAC末端序列,并利用NCBI Blast系统对BAC末端序列进行分析.结果表明:共得到26条BAC末端序列,经Blast比对分析,与已知编码基因的匹配度低,而大部分BAC末端序列与阪崎肠杆菌和环境中的微生物匹配度高,说明瘤胃中的微生物与其它环境中的微生物具有一定的相似性,进一步丰富了对瘤胃微生物的认识.

关键词：瘤胃微生物宏基因组文库 BAC末端序列 Blast比对

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