检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2010年第6期26卷 202-205页

作者：康海英王加启卜登攀魏宏阳李旦刘开朗王俊刘萍中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193 农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心北京100193

采用Unisensor试剂盒法和杯碟法对22份来自不同奶站的生鲜乳中β-内酰胺酶进行了检测,指出了两种方法各自的优点和缺点。β-内酰胺酶检测过程中,两种方法应配合使用,简便、快捷的Unisensor试剂盒法可以做现场及快速检测,杯碟法可以对Uni... 详细信息

采用Unisensor试剂盒法和杯碟法对22份来自不同奶站的生鲜乳中β-内酰胺酶进行了检测,指出了两种方法各自的优点和缺点。β-内酰胺酶检测过程中,两种方法应配合使用,简便、快捷的Unisensor试剂盒法可以做现场及快速检测,杯碟法可以对Unisensor试剂盒法的检测结果进行确证。

关键词：生鲜乳 β-内酰胺酶 Unisensor试剂盒杯碟法

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两株乙型脑炎病毒的分离鉴定与生物学特性研究

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中国兽医科学 2011年第11期41卷 1134-1139页

作者：袁磊郑文亚贾静文心田黄小波曹三杰四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学人兽共患病研究室四川成都611130 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

2009年从四川多个地区的猪场采集流产死胎及库蚊样本12份,采用BHK-21细胞培养方法分离出2株乙型脑炎病毒,分别命名为JEV-CZ1与JEV-YA1,PrM/C基因与疫苗株SA-14-14-2的同源性分别为90.9%与99.6%,基因分型研究显示JEV-CZ1株为基因Ⅰ型乙... 详细信息

2009年从四川多个地区的猪场采集流产死胎及库蚊样本12份,采用BHK-21细胞培养方法分离出2株乙型脑炎病毒,分别命名为JEV-CZ1与JEV-YA1,PrM/C基因与疫苗株SA-14-14-2的同源性分别为90.9%与99.6%,基因分型研究显示JEV-CZ1株为基因Ⅰ型乙型脑炎病毒,JEV-YA1株为基因Ⅲ型。分离株在BHK-21细胞中能产生明显的细胞病变,其细胞半数感染量(TCID50)分别为10-6.206 TCID50/0.025mL与10-4.943 TCID50/0.025mL。经脑内注射测得分离株对体重9～11g小鼠的半数致死量(LD50)分别为9.97LD50/0.1mL和6.95LD50/0.1mL,其中JEV-CZ1株毒力较强。小鼠接种分离株3～4d后出现抽搐、肢体痉挛、异常兴奋等神经症状,5～7d后全部死亡,剖检可见脑部充血、水肿;病理切片观察可见脑内神经细胞变性坏死,其他器官也出现不同程度的病变。结果表明这2个分离株符合乙型脑炎病毒的特征。

关键词：乙型脑炎病毒分离鉴定生物学特性

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大足黑山羊性激素结合球蛋白基因的克隆与多态性分析

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生物技术通报 2010年第10期26卷 149-155,177页

作者：谭颖王凭青何腾龙储明星邓腊梅樊奇张宝云刘重旭重庆大学生物工程学院重庆400030 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193

性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白,血清SHBG可结合与转运性激素,从而在一定程度上控制血清性激素浓度,血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素/促卵泡激素比率,最终影响排卵性能... 详细信息

性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)是广泛存在于哺乳动物血清中的糖蛋白,血清SHBG可结合与转运性激素,从而在一定程度上控制血清性激素浓度,血清性激素浓度将会影响体内促黄体激素/促卵泡激素比率,最终影响排卵性能。以大足黑山羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增,克隆测序等方法获得SHBG基因序列,经DNAMAN软件与BLAST比对分析其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果发现,SHBG基因内含子4中有两处突变(A215G、G607A),外显子5中有一处无义突变(A733G),外显子7中也有两处无义突变(A371G、A380G)。通过染色体步移获得了1 190 bp的SHBG基因5′端调控区序列,启动子预测分析显示此基因没有TATA盒和CCAAT盒,也没有发现人SH-BG基因多态性研究中发现的TAAAA重复序列。本研究结果有望为大足黑山羊SHBG基因多态性与繁殖力的关系提供科学依据。

关键词：性激素结合球蛋白大足黑山羊 TAAAA重复染色体步移单核苷酸多态性

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KiSS-1基因序列分析及其与山羊产羔数关系

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中国草食动物 2010年第S1期 138-144页

作者：曹贵玲储明星方丽狄冉冯涛李宁中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室

设计3对引物克隆山羊KiSS-1基因并扫描其序列多态性,4对引物用于在性早熟和性晚熟山羊品种中检测多态性.获得一个4 118 bp的DNA片段,含有长408 bp的ORF,编码135个氨基酸,其中羧基端17个氨基酸组成信号肽.该多肽和其他哺乳动物具有很高... 详细信息

设计3对引物克隆山羊KiSS-1基因并扫描其序列多态性,4对引物用于在性早熟和性晚熟山羊品种中检测多态性.获得一个4 118 bp的DNA片段,含有长408 bp的ORF,编码135个氨基酸,其中羧基端17个氨基酸组成信号肽.该多肽和其他哺乳动物具有很高的同源性.在内含子1中发现3个突变位点(G296C、G454T和T505A),外显子2中没有发现突变位点,内含子2中发现1个18 bp缺失(-)/插入(+)突变(1960-1977),外显子3中发现两个突变位点(G3433A[A86T]和C3688A).这些突变位点在性早熟和性晚熟品种之间的基因型分布没有明显差异.296位点CC型济宁青山羊产羔数比GG、GC型分别多0.80只(P<0.01)和0.77只(P<0.01),GG与GC基因型个体间产羔数差异不显著(P>0.05).对于1960-1977位点,-/-个体比+/+、+/-个体产羔数分别多0.77只(P<0.01)和0.73只(P<0.01),+/+与+/-基因型个体间差异不显著(P>0.05).其他4个位点基因型间产羔数差异均不显著(P>0.05).研究初步表明山羊KiSS-1基因296位点C等位基因和1960-1977位点的(-)等位基因与济宁青山羊的高产羔数有关.

关键词：山羊 KiSS-1 性早熟产羔数 PCR-PFLP

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动物疫苗研究现状及产业发展

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中国禽业导刊 2010年第21期27卷 12-13页

作者：才学鹏中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

动物传染病的控制和消灭不仅对养殖业的健康发展至关重要,同时对人类健康意义重大。目前,动物传染病控制的原理是针对引起流行的三个环节采取相应的措施,即消灭传染病、切断传播途径和保护易感群体。疫苗的作用主要是保护易感群体,从而... 详细信息

动物传染病的控制和消灭不仅对养殖业的健康发展至关重要,同时对人类健康意义重大。目前,动物传染病控制的原理是针对引起流行的三个环节采取相应的措施,即消灭传染病、切断传播途径和保护易感群体。疫苗的作用主要是保护易感群体,从而降低动物疫病流行的风险,可以说动物疫苗是人类控制动物疫病最有效的手段。1796年,Jenner研制了世界上第一个疫苗即天花疫苗,开创了人类用疫苗来控制传染病的先例。在19世纪末,以疫苗之父巴斯德为代表,先后成功研制了减毒炭疽、霍乱及狂犬病疫苗,形成了第一次疫苗革命。在此后的半个多世纪,是疫苗研制的过渡时期,人们根据巴斯德等的疫苗研制经验成功研制了多种疫苗,在传染病控制方面发挥了不可替代的作用。长期的研究中,人们发现病毒可在受精鸡胚里生长,由此制造出安全且有效抗黄热病的鸡胚组织苗,开创了病毒疫苗的制备技术。其后,随着分子生物学技术的出现和发展,从1962年开始人们利用该技术开展基因工程疫苗研究,1986年成功研制了乙肝表面抗原苗,这标志第二次疫苗革命的开始。1992年,Tang等报道了基因免疫,引发了第三次疫苗革命。

关键词：动物疫苗传染病控制动物传染病产业人类健康传播途径疫病流行动物疫病

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Expression,Purification and Activity Detection of VP1 of A-type FMDV

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Agricultural Science & Technology 2010年第2期11卷 23-26页

作者：李菁林彤高闪电丛国正独军政邵军军常惠芸中国农业科学院兰州兽医研究所国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疾病病原生物学国家重点开放实验室甘肃兰州730046

[Objective] The research aimed to induce the expression of FMDV structural protein VP1 in *** and purify the protein,then detect the activity.[Method] The fragment coding VP1 was amplified by PCR and doubly digested with BamH Ⅰ and XhoⅠ,then cloned into expression vector pGEX-4T-1 and pPROExHTb respectively to get recombinant plasmid pGEX-4T-1-VP1 and *** recombinant plasmid pGEX-4T-1-VP1 and pPROExHTb-VP1 was transformed into *** BL21(DE3)and induced by IPTG,fusion protein was identifie...

关键词： A-type FMDV Structural protein VP1 Expression and purification

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不同含量有机铁源和锌源对生长猪生产性能的影响

不同含量有机铁源和锌源对生长猪生产性能的影响

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生猪优质健康养殖关键技术国际学术研讨会

作者：肖俊武邓伏清周建攀廖阳华朱年华江西农业大学动物科技学院长沙兴嘉生物股份工程有限公司

选用120头杜×大白×长三元杂交生长猪(体重约20千克左右),随机分成5个处理,每个处理4个重复(圈),每重复6头猪,分别饲喂不同含量的硫酸盐(含铁和锌为120mg/kg硫酸亚铁和硫酸锌)和有机铁锌(含铁和锌40和80mg/kg的甘氨酸亚铁和羟... 详细信息

选用120头杜×大白×长三元杂交生长猪(体重约20千克左右),随机分成5个处理,每个处理4个重复(圈),每重复6头猪,分别饲喂不同含量的硫酸盐(含铁和锌为120mg/kg硫酸亚铁和硫酸锌)和有机铁锌(含铁和锌40和80mg/kg的甘氨酸亚铁和羟基蛋氨酸锌)的5种处理饲粮。结果表明:与添加无机铁锌相比,日粮中添加甘氨酸亚铁和羟基蛋氨酸锌对生长猪的日增重和料肉比都有显著的改善作用(P<0.01);随着羟基蛋氨酸锌添加量的增加,对降低生长猪料肉比降低也增加(P<0.05);随着甘氨酸亚铁添加量的增加,猪的皮肤毛色评分也增加但差异不显著(P>0.05)。

关键词：生长猪铁源锌源生产性能

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受体母猪排卵状况对体细胞克隆胚胎移植效率的影响

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畜牧兽医学报 2010年第3期41卷 366-370页

作者：罗学明张卫红冯冲龙川闫军赵会静张兆旺张子军潘登科甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃省草食动物生物技术重点实验室兰州730070 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室北京100193 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

为了确定猪体细胞克隆胚胎的受体母猪最佳发情阶段，本研究比较了供受体同期化方案对猪体细胞克隆胚胎输卵管内移植后30d受胎率和妊娠足月率的影响。将体外培养2d的猪体细胞克隆胚胎，移植到发情第1～2天的受体母猪。根据受体母猪卵泡... 详细信息

为了确定猪体细胞克隆胚胎的受体母猪最佳发情阶段，本研究比较了供受体同期化方案对猪体细胞克隆胚胎输卵管内移植后30d受胎率和妊娠足月率的影响。将体外培养2d的猪体细胞克隆胚胎，移植到发情第1～2天的受体母猪。根据受体母猪卵泡发育与排卵状况将受体猪群分为2个类别：卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段（组一）；卵泡发育处于排卵前阶段或完全排卵阶段（组二）。结果发现：（1）组一6头受体母猪胚胎移植后30d受胎率为100％；而组二10头受体母猪受胎率为40％，二者差异显著（P〈0．05）。（2）组一6头受体母猪全部产仔，妊娠足月率为100％；组二10头受胎母猪2头产仔，妊娠足月率为20％，二者差异极显著（P〈0．01）。以上结果表明：体外培养2d的猪体细胞克隆胚胎发育阶段与即将排卵或正在排卵的受体母猪的子宫环境同期性最好，得到了理想的胚胎移植效率。

关键词：猪体细胞克隆胚胎移植排卵状况受胎率妊娠足月率

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提高牛细管冻精精子活力的试验研究

提高牛细管冻精精子活力的试验研究

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中国奶业协会第26次繁殖学术年会暨国家肉牛牦牛/奶牛产业技术体系第3届全国牛病防治学术研讨会

作者：许红喜刘晓宁张洪涛卫喜明宋伟红韩志强韩欢胜李伟杨麒张天宝黑龙江农垦科学院畜牧兽医研究所黑龙江省家畜繁育指导站东北农业大学

本文从细管冻精的3个关键技术环节做了实验研究。研究了稀释液的种类对精子活率与存活的影响;细管冻精在度过冰晶期对精子损伤最小的最佳熏蒸高度(最佳冷冻温度)和最佳熏蒸时间;并且对成品冷冻的细管冻精进行不同温度及时间解冻。实验... 详细信息

本文从细管冻精的3个关键技术环节做了实验研究。研究了稀释液的种类对精子活率与存活的影响;细管冻精在度过冰晶期对精子损伤最小的最佳熏蒸高度(最佳冷冻温度)和最佳熏蒸时间;并且对成品冷冻的细管冻精进行不同温度及时间解冻。实验研究得,由柠檬酸钠和果糖组成的稀释液精子存活时间长,Tris稀释液冷冻后精子活力高于其他;牛细管冻精最佳熏蒸距离为2.5cm,时间影响不显著5-10min均可;前2分钟不要盖盖,以便液氮蒸汽散去,保证精子快速降到110-120,迅速度过冰晶;用50℃温水解冻15s精子的活力比38.5℃1min活力要好。

关键词：细管冻精牛冻精精子活力解冻温度

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肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

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中国农业科学 2010年第12期43卷 2570-2577页

作者：张雪寒何孔旺茅爱华周俊明俞正玉温立斌倪艳秀郭容利吕立新江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析... 详细信息

【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性。选用HEp-2细胞进行粘附和粘附抑制试验,通过光镜、电镜和荧光显微镜进行观察。选用Balb/c小鼠进行免疫试验。【结果】成功获得高效表达重组Tir蛋白,并制备了兔源Tir多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应。表达Tir蛋白能够抑制O157:H7对HEp-2细胞的粘附和A/E损伤。二免后Balb/c小鼠保护率高达75%以上。【结论】在大肠杆菌中成功克隆表达了Tir基因,所获重组Tir蛋白具有良好的抗原性,可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7 转位紧密素受体表达粘附 A/E损伤免疫保护

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