检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2010年第1期41卷 1-9页

作者：杨广礼任军张淑红刘孟洲张志燕黄路生商丘师范学院生命科学系商丘476000 甘肃农业大学动物科学技术学院兰州730070 江西农业大学江西省动物生物技术重点开放实验室南昌330045

本研究旨在了解猪种的遗传变异、种群间的亲缘关系和遗传分化。以白色杜洛克×二花脸资源家系F0代的17头二花脸母猪和2头白色杜洛克公猪的DNA池为模板,通过直接测序在猪SLC6A14基因内识别4个SNPs,以3个突变位点(g.7944A>T、c.143... 详细信息

本研究旨在了解猪种的遗传变异、种群间的亲缘关系和遗传分化。以白色杜洛克×二花脸资源家系F0代的17头二花脸母猪和2头白色杜洛克公猪的DNA池为模板,通过直接测序在猪SLC6A14基因内识别4个SNPs,以3个突变位点(g.7944A>T、c.1438G>A、g.21063G>T)为基础,通过PCR-RFLP技术,对11个中外猪种进行多态性检测。结果表明:在SLC6A14g.7944A>T和g.21063G>T2个突变位点上,所有检测猪种都出现变异,其中槐猪、二花脸猪在g.7944A>T位点上变异显著(0.01T内变异极显著(P<0.01),以GT基因型为主,且二花脸猪中出现TT基因型;在SLC6A14c.1438G>A突变位点上,3个欧洲猪种(长白、大白、杜洛克)没有出现变异,均为GG纯合型,而其他猪种在此位点上均存在变异;再根据11个猪种3个位点的多态性信息计算Nei氏遗传距离,由UPGMA法构建聚类图,说明中国地方猪种与外引猪种存在明显的遗传分化;由此得出中国地方猪种比外引猪种有高的遗传多样性和变异,且存在明显的遗传分化,品种间多数猪种符合品种地域分布和品种特性。

关键词：猪 SLC6A14基因 SNPs 遗传变异

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不同因素对绵羊卵母细胞体外受精效果的影响

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中国畜牧兽医 2010年第8期37卷 84-87页

作者：汪立芹赵云程陈童陈世彬左北瑶彭夏雨黄俊成郭志勤新疆动物生物技术重点开放实验室农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000 新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 南京农业大学动物胚胎工程技术中心南京210095 石河子大学动物科技学院石河子832000

本试验研究了发情羊血清、不同个体的冷冻精液和新鲜精液、精子密度、受精时颗粒细胞的有无及不同培养液对绵羊体外受精效果的影响。结果表明,发情3d的血清与发情当天的血清相比,对卵裂率和囊胚率有极显著的影响(P0.05);颗粒细胞对受精... 详细信息

本试验研究了发情羊血清、不同个体的冷冻精液和新鲜精液、精子密度、受精时颗粒细胞的有无及不同培养液对绵羊体外受精效果的影响。结果表明,发情3d的血清与发情当天的血清相比,对卵裂率和囊胚率有极显著的影响(P<0.01);不同个体的冷冻精子对卵裂率和囊胚率都有显著的影响(P<0.05),但鲜精和冷冻精子的受精效果与个体有关;精子密度在2×106～6×106个/mL之间对受精效果没有影响(P>0.05);颗粒细胞对受精的作用不明显(P>0.05);不同的培养液对受精效果没有显著影响(P>0.05)。因此,选用好的公羊个体精子,用发情3d的发情羊血清能显著提高受精效果。

关键词：绵羊体外受精发情血清卵裂率囊胚率

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人、猪和鸡血清中抗禽戊型肝炎病毒抗体的检测与鉴定

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山东农业大学学报（自然科学版） 2010年第1期41卷 89-92页

作者：荆胜涛张红霞孙培明董施伟赵钦张璐周恩民山东农业大学动物医学院山东省生物技术与疫病防治重点实验室山东农业大学校医院山东泰安271018

通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的... 详细信息

通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的抗原表位,而阳性血清中抗禽HEV ORF2特异性抗原表位抗体的阳性率为41.3%~92.1%,提示人、猪和鸡都有感染禽HEV的可能性,这为进一步验证禽HEV可能造成的人兽共感染提供新的科学依据。

关键词：戊型肝炎病毒禽戊型肝炎病毒禽戊型肝炎病毒特异性抗体血清学调查

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猪肺炎支原体p97黏附蛋白基因抗原表位片段的克隆与序列分析

猪肺炎支原体p97黏附蛋白基因抗原表位片段的克隆与序列分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：刘茂军甘源孔猛刘冬霞王丽刘冬阳邵国青冯志新熊琪琰王海燕王占伟白昀吴叙苏孙佩元江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC 25934或NCTC10110)与168株P97基因序列进行同源性比较，设计一对特异性引物，通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列，克隆入T载体，并进行测序... 详细信息

根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC 25934或NCTC10110)与168株P97基因序列进行同源性比较，设计一对特异性引物，通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列，克隆入T载体，并进行测序，将测序结果与NCBI上公布的序列进行比较，找出变异规律，这为MHP的毒力研究提供新的思路，也为MHP病的诊断提供依据。

关键词：猪肺炎支原体 P97基因基因克隆序列分析

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猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：王建波邵国青冯志新刘茂军王海燕白昀王占伟甘源刘冬阳刘冬霞江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014 山西农业大学动物科技学院山西太谷 03080 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心·南京天邦生物科技有限公司江苏南京 210014

以GenBank公布的MhpP36基因序列，设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析，建立了以P36基因序列作为靶序列的MhpSYBR GREEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速，灵敏.无污染，具有良好... 详细信息

以GenBank公布的MhpP36基因序列，设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析，建立了以P36基因序列作为靶序列的MhpSYBR GREEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速，灵敏.无污染，具有良好的特异性.重复性，可用于Mhp培养物和组织样品的快速定量检测.

关键词：猪肺炎支原体 PCR检测 P36基因序列

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奶牛干细胞多能性基因Nanog和Lin28克隆分析及其逆转录病毒表达载体的构建与包装

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中国兽医学报 2010年第1期30卷 65-73页

作者：吕长荣陈冬梅辛晓玲窦忠英西北农林科技大学动物医学院陕西省农业分子生物学重点实验室国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心陕西杨凌712100

以50-60日龄的Holstein奶牛胎儿原始生殖嵴组织为材料，通过RT—PCR的方法克隆奶牛Nanog与Lin28基因开放性阅读框（ORF）全序列。序列全长分别为903bp和618bp。所克隆的奶牛Nanog与Lin28基因序列与GenBank中已经发表的参考序列进行比对... 详细信息

以50-60日龄的Holstein奶牛胎儿原始生殖嵴组织为材料，通过RT—PCR的方法克隆奶牛Nanog与Lin28基因开放性阅读框（ORF）全序列。序列全长分别为903bp和618bp。所克隆的奶牛Nanog与Lin28基因序列与GenBank中已经发表的参考序列进行比对同源性均为100％。将扩增的基因片段经过酶切后亚克隆到反转录病毒载体pMSCVneo的多克隆位点，经过酶切、PCR和测序鉴定正确后，应用lipofectamine2000介导转染PT67包装细胞，经过14dG418连续抗性筛选，挑选抗性集落扩大培养。收集病毒上清经过RT—PCR与透射电镜检测，并用NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果表明，病毒上清中含有逆转录病毒颗粒，Nanog与Lin28基因在筛选后的包装细胞PT67细胞中均有转录，病毒上清感染滴度值分别达到7．5×10^7 cfu／mL和9．19×10^7’cfu／mL。结果表明，本试验已经成功克隆出奶牛Nanog与Lin28基因开放性阅读框全序列，并建立高效、稳定产生包含有pMSCV-Nanog与pMSCV-Lin28质粒的感染性病毒颗粒的包装细胞株，为进一步产生奶牛诱导性多能干细胞（Induced pluripotent stem cells，iPSCs）奠定基础。

关键词： Nanog基因 Lin28基因 pMSCV逆转录病毒载体诱导性多能干细胞奶牛

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不同因素对北山羊-山羊核移植重构胚融合率的影响

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中国畜牧兽医 2010年第9期37卷 158-161页

作者：杨梅汪立芹陈童彭夏雨郭志勤新疆动物生物技术重点开放实验室农业部草食家畜繁育生物技术重点开放实验室乌鲁木齐830000 石河子大学动物科技学院石河子832000 大连金州区动物卫生监督管理局大连116000

作者通过对融合方式、融合场强、体细胞与透明带切口位置及重构后是否修复等条件对北山羊—山羊体细胞核移植重构胚融合率的影响进行了研究。结果表明,不同融合方式能显著影响融合率(67.57%和42.15%,P0.05);重构后立即融合与修复2 h后... 详细信息

作者通过对融合方式、融合场强、体细胞与透明带切口位置及重构后是否修复等条件对北山羊—山羊体细胞核移植重构胚融合率的影响进行了研究。结果表明,不同融合方式能显著影响融合率(67.57%和42.15%,P<0.05);场强在1.3～1.9 kV/cm范围内对融合率和死亡率都没有影响;体细胞在透明带的切口处对融合率影响不显著,但融合过程中死亡率高于对照组(8.25%和2.3%,P>0.05);重构后立即融合与修复2 h后再融合对融合率没有影响(67.29%和68.33%,P>0.05)。

关键词：北山羊山羊核移植融合率

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猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

猪肺炎支原体定量PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会

作者：王建波冯志新刘茂军王海燕白昀王占伟甘源刘冬阳刘冬霞邵国青江苏省农业科学院兽医研究所·农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心南京天邦生物科技有限公司山西农业大学动物科技学院

以GenBank公布的MhpP36基因序列,设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析,建立了以P36基因序列作为靶序列的Mhp SYBRG REEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速、灵敏、无污染,具有良好... 详细信息

以GenBank公布的MhpP36基因序列,设计合成一对特异性引物。通过对萤光定量PCR扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的分析,建立了以P36基因序列作为靶序列的Mhp SYBRG REEN实时荧光定量PCR检测方法。该方法准确、快速、灵敏、无污染,具有良好的特异性、重复性,可用于Mhp培养物和组织样品的快速定量检测。

关键词：猪肺炎支原体熔解曲线扩增曲线 PCR 特异性引物猪鼻支原体检测方法

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牛趋化因子受体4基因的克隆表达及序列分析

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中国兽医科学 2009年第11期39卷 1003-1009页

作者：李小庆何延华陈国华房永祥冯海燕赵娜景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃兰州730046

采用RT-PCR技术,从被刺激诱导的牛外周血单个核细胞（PBMC）中克隆了牛趋化因子受体4（CXCR4）全长基因,并将CXCR4基因和CXCR4基因N端1~126 bp（CXCR442 aa）片段分别亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,命名为pGEX-4T-1-CXCR4、pGEX-4T-1... 详细信息

采用RT-PCR技术,从被刺激诱导的牛外周血单个核细胞（PBMC）中克隆了牛趋化因子受体4（CXCR4）全长基因,并将CXCR4基因和CXCR4基因N端1~126 bp（CXCR442 aa）片段分别亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,命名为pGEX-4T-1-CXCR4、pGEX-4T-1-CXCR442 aa。获得重组菌株后,采用不同的IPTG浓度、不同诱导时间、不同温度和不同培养基等组合诱导表达这两种重组菌,其中pGEX-4T-1-CX-CR442 aa重组菌获得了表达,并在37℃、IPTG浓度为0.8 mmol/L、诱导6 h时表达量最大,约占菌体总蛋白的45%,目的蛋白主要以包涵体的形式存在;而pGEX-4T-1-CXCR4重组菌未表达出目的蛋白。

关键词：牛 CXCR4基因克隆表达结构预测

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细胞负调控因子SOCS1和SOCS3的原核表达

细胞负调控因子SOCS1和SOCS3的原核表达

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：朱巧艳钱平郭玲刘蕾郝根喜曹齐树李祥敏陈焕春华中农业大学农业部微生物学国家重点实验室

利用PCR技术扩增出鼠源细胞负调控因子SOCS1和SOCS3基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,经PCR、酶切和序列分析鉴定正确后,分别命名为pGEX-4T-1-SOCS1和pGEX-4T-1-SOCS3。将这两个重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,结果SO... 详细信息

利用PCR技术扩增出鼠源细胞负调控因子SOCS1和SOCS3基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,经PCR、酶切和序列分析鉴定正确后,分别命名为pGEX-4T-1-SOCS1和pGEX-4T-1-SOCS3。将这两个重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,结果SOCS1和SOCS3分别在大肠杆菌中成功表达了大小约为51 ku和53 ku的GST Tag融合蛋白,经western blot检测进一步证明了两个基因的表达。实验结果表明在大肠杆菌中成功表达了SOCS1和SOCS3蛋白,为进一步研究SOCS1和SOCS3蛋白的结构、功能等奠定基础。

关键词： SOCS1 SOCS3 克隆原核表达

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