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中国人兽共患病学报 2021年第5期37卷 450-454页

作者：张海生马元元谢世臣梁勤立朱兴全王金磊中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,可感染包括人在内的几乎所有的温血动物,全球约有1/3的人口感染弓形虫病。宿主感染弓形虫后常呈隐性感染,但对于免疫力低下的人群,如艾滋病患者或者孕妇,可引起严重的临床症状甚至死亡。随着人类生活质... 详细信息

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,可感染包括人在内的几乎所有的温血动物,全球约有1/3的人口感染弓形虫病。宿主感染弓形虫后常呈隐性感染,但对于免疫力低下的人群,如艾滋病患者或者孕妇,可引起严重的临床症状甚至死亡。随着人类生活质量的不断提高,弓形虫给人类健康、畜牧业发展和公共卫生安全带来的隐患与日俱增。目前,尚无针对弓形虫病的特效药,疫苗将是控制弓形虫病最有效的手段。传统的弓形虫疫苗免疫效果较差,自然筛选获得的弱毒苗存在返毒的可能,不适用于免疫缺陷的动物或人群。传统基因编辑技术构建基因敲除株的效率低且过程复杂。随着基因编辑技术CRISPR-Cas9在弓形虫研究中的应用,为研制弓形虫疫苗提供了新的方向,已成功构建了许多弱毒疫苗虫株,这些虫株具有很好的免疫保护作用,是弓形虫疫苗最有希望的候选者。本文综述弓形虫弱毒疫苗的研究进展和发展前景,为弓形虫疫苗的后续研究提供参考。

关键词：弓形虫疫苗 CRISPR-Cas9 基因编辑

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鸡弱精症相关精浆蛋白组分析

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畜牧兽医学报 2021年第3期52卷 693-702页

作者：魏岳李云雷孙研研武艳平唐维国陈继兰谢金防江西农业科学院畜牧兽医研究所南昌330200 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物遗传育种与繁殖(家禽)重点实验室北京100193

旨在对鸡精浆蛋白组进行分析,筛选与弱精症相关的蛋白。本试验选择同批次孵化的宁都黄鸡公鸡进行精液品质检测,每隔3 d进行1次镜检,共进行3次。选择前向精子比例80%,且直线前向精子比例>40%的个体为对照样本,每组各4只。利用液相色谱... 详细信息

旨在对鸡精浆蛋白组进行分析,筛选与弱精症相关的蛋白。本试验选择同批次孵化的宁都黄鸡公鸡进行精液品质检测,每隔3 d进行1次镜检,共进行3次。选择前向精子比例<20%,且直线前向精子比例<10%的个体作为试验样本,前向精子比例>80%,且直线前向精子比例>40%的个体为对照样本,每组各4只。利用液相色谱-质谱(LC-MS/MS)技术开展鸡精浆蛋白组学的研究,筛选与弱精症相关的差异蛋白。结果显示,宁都黄鸡弱精组的精子活力和密度极显著低于对照组(P<0.01)。两组间共筛选到差异表达蛋白78个,5个差异蛋白在弱精组中表现为上调,其余差异蛋白表现为下调。角蛋白9(KRT 9)和硒蛋白P-2(SEPP 2)仅在弱精组中检测到表达;4-羟基-2-氧戊二酸醛缩酶(HOGA 1)、苯丙氨酸羟化酶(PAH)和卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)仅在对照组中检测到表达。经GO注释和KEGG通路分析,差异蛋白功能集中于新陈代谢、糖酵解、碳代谢和氨基酸合成等生物途径。本研究筛选的宁都黄鸡弱精症和正常公鸡精浆差异表达蛋白可作为今后鸡弱精症筛查和治疗的候选靶点,通过进一步功能分析与验证为阐明弱精症的发病机理提供依据。

关键词：鸡弱精症液相色谱-质谱技术差异表达蛋白

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基于转录组测序筛选半番鸭性腺分化候选基因

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中国家禽 2025年第5期47卷 17-24页

作者：杨宇叶胜强翟明丽李雪莲童新红李中心徐小娟龚萍武汉市农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430208 华中农业大学湖北武汉430070 湖北省农业科学院果树茶叶研究所湖北武汉430000

为筛选到更多与禽类性腺分化相关的候选基因,研究收集半番鸭、金定鸭和番鸭在1/2胚胎期雌性和雄性性腺组织样品进行RNA-seq测序,通过转录组测序分析半番鸭和亲本性腺分化过程中SNP、Indel位点以及可变剪接事件,对获取的SNP和InDel位点... 详细信息

为筛选到更多与禽类性腺分化相关的候选基因,研究收集半番鸭、金定鸭和番鸭在1/2胚胎期雌性和雄性性腺组织样品进行RNA-seq测序,通过转录组测序分析半番鸭和亲本性腺分化过程中SNP、Indel位点以及可变剪接事件,对获取的SNP和InDel位点在外显子(Exonic)、UTR5以及内含子(Intronic)等8种功能元件上的分布进行统计。结果显示:共获得798216036条cleanreads,9471个差异基因(Differentially expressed genes,DEGs)和691个蛋白质网络互作对(Protein-protein interaction,PPI)。突变位点在外显子上发生的比率占整体的21.26%。共筛选出非同义单核苷酸突变(Non-synonymous SNP,nsSNPs)引起的ATP2C2、GTF2A1L和HHIPL2等8个雌性特异表达基因和STK10、GDF7和SLC5A8等6个雄性特异表达基因,Indel位点引起的NTN4、RAB5A、SHPRH等12个雄性特异表达基因。DEGs可变剪接分析显示,半番鸭雌性和雄性比较组发生的差异可变剪接事件最少(17793次)。分析各比较组外显子使用(Exonusage)差异,发现雌雄性腺之间的外显子使用差异数量总体要少于不同鸭种同种性别之间的数量。研究表明,ATP2C2、GTF2A1L、HHIPL2、STK10、GDF7和SLC5A8等基因外显子SNP位点非同义突变以及NTN4、RAB5A、SHPRH等基因外显子Indel位点移码突变在雌雄性腺分化中发挥着重要作用;性腺分化和发育以及半番鸭的不育与DEGs中发生的可变剪接是密不可分的;位于Z染色体上的STARD6、STARD4、SPEF2、HSD17B3和25号染色体HSD17B1基因发生了可变剪接并参与了性腺性别分化等生物学过程。

关键词：转录组番鸭性别分化性腺可变剪接 SNP/Indel

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选择信号分析及其对绵羊功能基因的挖掘进展

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中国畜牧兽医 2023年第12期50卷 4935-4946页

作者：张彦威于丽娟徐新明阿米妮古丽·阿不来孜谢梦婉唐丽苹郑培宇狄江新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院畜牧研究所农业农村部畜禽资源(羊)评价利用重点实验室新疆绒毛用羊遗传育种与繁殖实验室乌鲁木齐830011 新疆畜牧科学院生物技术研究所新疆动物生物技术重点实验室乌鲁木齐830011

绵羊经过长期自然和人工选择,形成了丰富多样的品种资源,并为人类提供肉、奶、毛、皮等生活物资。选择发生时伴随着选择信号的产生,常见的选择信号有群体分化、基因组多样性下降且存在高频等位基因的区域及被选择区域长范围扩展单倍型... 详细信息

绵羊经过长期自然和人工选择,形成了丰富多样的品种资源,并为人类提供肉、奶、毛、皮等生活物资。选择发生时伴随着选择信号的产生,常见的选择信号有群体分化、基因组多样性下降且存在高频等位基因的区域及被选择区域长范围扩展单倍型纯合等。针对不同类型的选择信号衍生出了相应的分析方法,如基于群体分化分析、基于基因组杂合度分析、基于单倍型和连锁不平衡分析和基于等位基因频率谱分析等。近年来,随着高通量测序技术的发展,研究人员通过对绵羊进行选择信号分析,挖掘出大量与经济性状相关的功能基因,为绵羊分子育种提供了更多的遗传信息。作者对选择信号的分类与检测方法及其对绵羊功能基因的筛选进行了介绍,并对选择信号分析的应用方向和研究前景进行了展望,旨在为选择信号分析在绵羊遗传育种中的应用提供借鉴。

关键词：绵羊选择信号功能基因

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Caspase-11/GSDMD非经典细胞焦亡途径在蓖麻毒素诱导RAW264.7细胞炎症反应中的作用

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中国免疫学杂志 2025年第4期41卷 898-902,907页

作者：宋苏丽董明鑫孙成彪王燕林茹许娜刘文森长春理工大学生命科学技术学院长春130012 中国农业科学院长春兽医研究所长春130122 长春市绿园区妇幼保健计划生育服务中心长春130062 吉林医药学院吉林132000

目的:探讨Caspase-11/GSDMD非经典细胞焦亡途径在蓖麻毒素诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应中的作用机制。方法:以LPS+Nigericin诱导的细胞焦亡模型为阳性对照,40、80 ng/ml蓖麻毒素诱导细胞8 h。乳酸脱氢酶(LDH)细胞释放法检测细... 详细信息

目的:探讨Caspase-11/GSDMD非经典细胞焦亡途径在蓖麻毒素诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应中的作用机制。方法:以LPS+Nigericin诱导的细胞焦亡模型为阳性对照,40、80 ng/ml蓖麻毒素诱导细胞8 h。乳酸脱氢酶(LDH)细胞释放法检测细胞LDH释放;流式细胞术(AnnexinⅤ/PI双染法)检测细胞焦亡;RT-qPCR检测Caspase-11、GSDMD、IL-1β和IL-18基因表达;Western blot检测Caspase-11和GSDMD蛋白水平;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-1β、IL-18分泌水平。结果:与正常对照组相比,蓖麻毒素处理组RAW264.7细胞发生肿胀、细胞膜破裂,LDH释放量显著升高(P<0.001),细胞焦亡率显著升高(P<0.001),焦亡相关基因Caspase-11、GSDMD、IL-1β和IL-18表达显著升高(P<0.05),Caspase-11、GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞上清中炎症因子IL-1β、IL-18分泌水平显著升高(P<0.05)。蓖麻毒素处理组与LPS+Nigericin细胞焦亡阳性对照组结果一致。结论:蓖麻毒素通过Caspase-11/GSDMD非经典细胞焦亡途径诱导RAW264.7细胞焦亡,在促进细胞炎症反应中具有重要作用。

关键词：蓖麻毒素细胞焦亡 Caspase-11 GSDMD 炎症反应

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畜禽粪污好氧堆肥及其添加剂研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2023年第8期 28-33,42页

作者：黄引超张微和立文中国农业大学动物科学技术学院/动物营养学国家重点实验室北京100193

好氧堆肥指由好氧微生物发酵分解有机物,实现各类粪污垃圾矿质化、腐殖化和无害化的一种措施,是实现畜禽粪污资源化利用的主要方式之一。文章主要介绍了畜禽粪污好氧堆肥的作用机制、影响因素,并重点讨论了不同类型外源添加剂在畜禽粪... 详细信息

好氧堆肥指由好氧微生物发酵分解有机物,实现各类粪污垃圾矿质化、腐殖化和无害化的一种措施,是实现畜禽粪污资源化利用的主要方式之一。文章主要介绍了畜禽粪污好氧堆肥的作用机制、影响因素,并重点讨论了不同类型外源添加剂在畜禽粪污好氧堆肥中的应用,以期对外源添加剂在畜禽粪污好氧堆肥中的作用效果和机制有比较全面的了解。

关键词：畜禽粪污堆肥添加剂资源化利用温室气体养分保存作用机制影响因素

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新疆新地乡部分地区亚洲璃眼蜱的形态及分子生物学鉴定

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中国人兽共患病学报 2024年第4期40卷 289-294页

作者：昝晓庆任巧云罗金王彦龙刁沛文车丽妍罗建勋殷宏关贵全刘光远赵洪喜宁夏大学动物科技学院银川750021 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046 河北师范大学生命科学学院石家庄050024 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州大学扬州225009

目的了解新疆裕民县新地乡所采集蜱种的形态学及分子生物学情况。方法采集该地区家畜体表寄生蜱,借助超景深三维显微系统VHX 600对收集到的蜱进行初步的形态学鉴定。提取全蜱总DNA,采用PCR技术,基于COI和ITS2基因位点对蜱DNA进行扩增,... 详细信息

目的了解新疆裕民县新地乡所采集蜱种的形态学及分子生物学情况。方法采集该地区家畜体表寄生蜱,借助超景深三维显微系统VHX 600对收集到的蜱进行初步的形态学鉴定。提取全蜱总DNA,采用PCR技术,基于COI和ITS2基因位点对蜱DNA进行扩增,将阳性的PCR产物进行测序。通过NCBI数据库中Blast在线分析软件,将测序所获序列与数据库中其他相关序列进行同源性比对分析。利用MEGA 7.0软件中的邻接法构建遗传进化树,确定蜱的进化生物学特性。结果经形态学鉴定,从裕民县新地乡采集的蜱均符合亚洲璃眼蜱的特征。基于COI和ITS2基因序列建立的遗传进化树表明,本次研究所采集的蜱与已知的亚洲璃眼蜱聚为一支。结论通过形态学及分子生物学鉴定,确定本次研究所采集的蜱为亚洲璃眼蜱。该结果为新疆新地乡蜱种分布提供一定数据资料,为蜱种鉴定和遗传进化特征分析提供参考。

关键词：亚洲璃眼蜱形态鉴定 COI基因 ITS2基因

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生物节律对动物生理营养及物质消化利用调控的研究进展

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畜牧兽医学报 2021年第4期52卷 872-880页

作者：张春桃马涛屠焰刁其玉中国农业科学院饲料研究所农业农村部饲料生物技术重点开放实验室北京100081

生物钟是生物的计时机制,是生物体内的一种无形的"时钟"。实际上是生物体生命活动的内在节律性,是由生物体内的时间结构序列所决定,使行为、生理和新陈代谢的内部循环与外界环境周期性同步。本文就生物节律系统、生物钟的调... 详细信息

生物钟是生物的计时机制,是生物体内的一种无形的"时钟"。实际上是生物体生命活动的内在节律性,是由生物体内的时间结构序列所决定,使行为、生理和新陈代谢的内部循环与外界环境周期性同步。本文就生物节律系统、生物钟的调控基因、生物钟对营养生理代谢和消化器官的调控以及其在实际生产中的应用作一综述。

关键词：生物节律生物钟营养代谢营养调控

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猪德尔塔冠状病毒N蛋白单克隆抗体2D7的制备与生物学特性鉴定

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中国动物传染病学报 2024年第5期32卷 115-125页

作者：张宁赵平刘思雨赵硕陈忠伟何颖欧阳康卢冰霞蒋家霞郭旋林昌华赵武黄伟坚秦毅斌赵凌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室南宁530001 广西大学动物科学技术学院南宁530005 广西职业技术学院南宁530226 广西农垦永新畜牧集团金光有限公司南宁530042 广西农垦永新畜牧集团西江有限公司贵港537100 广西桂垦牧业有限公司南宁530022

为获得猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb),并鉴定其生物学特性,本研究利用RT-PCR方法扩增PDCoV-N基因,构建表达质粒,转化BL21感受态细胞获得重组大肠杆菌,诱导表达后... 详细信息

为获得猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb),并鉴定其生物学特性,本研究利用RT-PCR方法扩增PDCoV-N基因,构建表达质粒,转化BL21感受态细胞获得重组大肠杆菌,诱导表达后获得PDCoV-N重组蛋白,将其进行纯化后再免疫小鼠,制备针对PDCoV-N蛋白的mAb,并进行了抗体的效价测定、免疫荧光(IFA)、Western blot、亚类的鉴定、mAb特异性的鉴定。结果,成功构建pColdⅡ-PDCoV-N重组原核表达质粒,SDS-PAGE显示重组N蛋白成功表达,分子质量约为38 kDa;经小鼠免疫、细胞融合、亚克隆筛选获得1株分泌PDCoV-N蛋白抗体的阳性杂交瘤细胞株;制备的腹水经间接ELISA方法测定抗体的效价为2.048×10^(6)。IFA、Western blot试验表明该mAb可以与PDCoV-N蛋白及全病毒特异性结合,亚类鉴定其亚型为IgG1,轻链为κ链。该mAb只与PDCoV反应,而与其他猪肠道病毒无交叉反应,表明本研究制备的mAb具有良好的特异性。本研究成功制备了PDCoV-N蛋白的mAb,为进一步研究PDCoV的生物学特性和诊断试剂的开发提供技术支持。

关键词：猪德尔塔冠状病毒 N蛋白单克隆抗体

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猪繁殖与呼吸综合征病毒体外抑制非洲猪瘟病毒复制的研究

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中国兽医科学 2022年第4期52卷 417-428页

作者：赵登率申超超张大俊杨博郝雨张婷杨金柯史喜娟崔卉梅陈学辉袁兴国闫文倩刘霞张克山郑海学刘湘涛甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室国家非洲猪瘟区域实验室甘肃兰州730046

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对非洲猪瘟病毒(ASFV)复制的调控作用,本研究通过荧光观察、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western-blot检测PRRSV疫苗株和ASFV基因缺失株共感染后ASFV在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制水平以及干扰素... 详细信息

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对非洲猪瘟病毒(ASFV)复制的调控作用,本研究通过荧光观察、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western-blot检测PRRSV疫苗株和ASFV基因缺失株共感染后ASFV在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制水平以及干扰素和炎症相关细胞因子的转录水平。结果显示,同时感染和先感染PRRSV疫苗株JXA1-R可抑制ASFV基因缺失株在PAMs中的复制,且上调IFN-β、ISG-56、MX1以及TNF-α的转录水平。而间隔6/12 h再感染PRRSV疫苗株则抑制/不抑制ASFV基因缺失株的复制。本研究结果证明了PRRSV疫苗株JXA1-R可抑制ASFV基因缺失株在PAMs中的复制,并诱导干扰素和炎症相关因子的转录水平,且和PRRSV疫苗株感染时间相关。该结果为PRRSV和ASFV相关共感染研究奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒共感染猪肺泡巨噬细胞抑制

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