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文献类型

61 篇 期刊文献
36 篇 会议

馆藏范围

97 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

91 篇 农学
- 86 篇 兽医学
- 6 篇 作物学
9 篇 医学
- 7 篇 基础医学(可授医学...
- 1 篇 临床医学
- 1 篇 公共卫生与预防医...
- 1 篇 药学(可授医学、理...
- 1 篇 医学技术（可授医学...
7 篇 工学
- 6 篇 生物工程
- 1 篇 化学工程与技术
- 1 篇 环境科学与工程（可...
6 篇 理学
- 6 篇 生物学

主题

27 篇 单克隆抗体
19 篇 蓝舌病病毒
9 篇 原核表达
9 篇 西尼罗病毒
9 篇 抗原表位
6 篇 e蛋白
6 篇 vp7蛋白
6 篇 重组新城疫病毒
5 篇 真核表达
4 篇 细胞免疫
4 篇 狂犬病病毒
4 篇 体液免疫
4 篇 间接elisa
4 篇 流行性乙型脑炎病...
4 篇 壳聚糖
3 篇 鸡γ-干扰素基因
3 篇 免疫原性
3 篇 vp2
3 篇 布鲁氏菌
3 篇 生物学特性

机构

52 篇 中国农业科学院哈...
28 篇 东北农业大学
15 篇 中国农业科学院哈...
10 篇 中国动物疫病预防...
6 篇 吉林农业大学
5 篇 南京农业大学
5 篇 中国农业科学院哈...
5 篇 中国农业科学院上...
4 篇 湖南农业大学
4 篇 军事医学科学院军...
4 篇 军事医学科学院微...
4 篇 中国农业科学院哈...
4 篇 中国农业科学院哈...
4 篇 农业部兽医公共卫...
3 篇 华南农业大学
3 篇 中国农业科学院哈...
2 篇 延边大学
2 篇 中国兽医药品监察...
2 篇 西北农林科技大学
2 篇 中国农业科学院哈...

作者

63 篇 吴东来
57 篇 杨涛
51 篇 步志高
41 篇 徐青元
40 篇 孙恩成
30 篇 bu zhi-gao
22 篇 wu dong-lai
21 篇 刘霓红
18 篇 yang tao
17 篇 秦永丽
17 篇 冯瑜菲
16 篇 赵晶
16 篇 葛金英
14 篇 魏鹏
14 篇 张维军
13 篇 王群
13 篇 王文世
13 篇 ge jin-ying
12 篇 林燕
12 篇 xu qing-yuan

语言

97 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开发实验室"

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详细简洁

排序：

蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

蓝舌病病毒8型VP2蛋白的真核表达与抗原性检测

引用

2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会

作者：席娜王文世冯瑜菲李俊平吴东来孙恩成孙亮魏天杨涛徐青元刘二战孙晶魏鹏中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 吉林农业大学动物科学技术学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体... 详细信息

目的:利用真核表达系统对BTV8型VP2蛋白进行表达并对其抗原性进行检测。方法:从BTV8感染的BHK-21细胞提取病毒RNA,依据Genback中已登录的BTV8的L2基因序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增BTV8 VP2全长基因,将VP2基因和pFastBacHTA供体质粒分别经BamHI和HindⅢ酶切后连接转化将其克隆到pFast-BacHTA供体质粒中构建重组pFast-VP2质粒,双酶切和测序鉴定后将pFast-VP2转化DH10Bac感受态细胞制备提取重组杆粒BAC-VP2,经PCR鉴定后在脂质体Cellfectin Reagent作用下将重组杆粒BAC-VP2转染Sf21细胞,转染后的Sf21细胞经蛋白质印迹检测VP2蛋白及其生物活性。结果:经双酶切以及测序鉴定成功构建了真核表达载体pFast-VP2,利用杆状病毒表达系统成功表达出BTV8重组蛋白VP2.通过包涵体纯化方法对其进行了纯化,Western blot结果显示该蛋白可以与抗BTV8绵羊阳性血清产生反应,显示出良好的抗原性。结论:昆虫杆状病毒表达载体具有高效性和灵活性,能高效地表达大片段基因也能同时表达多个基因,而且表达的重组蛋白经糖基化、磷酸化、二硫键的形成等翻译加工后在结构和功能上更接近天然蛋白,使得重组蛋白具有较好的生物活性。本研究构建的BTV8 VP2蛋白的真核表达载体,为后期建立稳定表达VP2蛋白的细胞模型和VP2蛋白功能研究奠定了基础。

关键词：动物医学蓝舌病病毒重组蛋白真核表达抗原性检测

来源：评论

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茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立

茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：张文龙殷喆王君伟杨涛吴东来农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学动物医学学院

茨城病病毒(Ibaraki virus,IBAV)是呼肠孤病毒科、环状病毒属成员。其VP7蛋白保守程度高,适宜作为茨城病(Ibaraki disease,IBAD)血清学检测方法的诊断抗原。本研究克隆了VP7蛋白抗原性、亲水性较强部分的编码基因,并在原核表达系统中表... 详细信息

茨城病病毒(Ibaraki virus,IBAV)是呼肠孤病毒科、环状病毒属成员。其VP7蛋白保守程度高,适宜作为茨城病(Ibaraki disease,IBAD)血清学检测方法的诊断抗原。本研究克隆了VP7蛋白抗原性、亲水性较强部分的编码基因,并在原核表达系统中表达了可溶性截短VP7蛋白。用表达的重组蛋白初步建立了IBAD间接ELISA检测方法。

关键词：茨城病截短VP7蛋白间接ELISA

来源：评论

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鸡IFN-γDNA-壳聚糖纳米粒的制备及体外转染

鸡IFN-γDNA-壳聚糖纳米粒的制备及体外转染

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：殷喆张文龙刘霓红杨涛步志高王君伟吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室东北农业大学动物医学学院

构建了携带鸡干扰素（IFN- ）重组真核表达质粒pCAGGS-ChIFN-,制备成承载pCAGGS-ChIFN-的壳聚糖纳米粒子。透射电镜观察制备的纳米粒子呈不规则球形,光子相关色谱（PCS）仪测定显示纳米粒子的平均粒径为172.6±5.1nm;Zeta电位为20.8... 详细信息

构建了携带鸡干扰素（IFN- ）重组真核表达质粒pCAGGS-ChIFN-,制备成承载pCAGGS-ChIFN-的壳聚糖纳米粒子。透射电镜观察制备的纳米粒子呈不规则球形,光子相关色谱（PCS）仪测定显示纳米粒子的平均粒径为172.6±5.1nm;Zeta电位为20.8±2.9mV;载基因纳米粒子的重组质粒DNA包埋效率和载药量分别为91.21±2.54%和31.93±0.16%。载基因壳聚糖纳米粒子可以有效地保护重组质粒DNA,防止核酸酶对其的降解作用,并能良好的从纳米粒子中释放重组质粒DNA。CEF细胞体外转染实验表明:包裹后的纳米粒子对细胞基本无毒性,使携带的外源基因能在CEF细胞中正确表达,其转染效率约为阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine2000 Reagent的1/6。

关键词：壳聚糖纳米颗粒鸡γ-干扰素基因体外转染

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茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立

茨城病病毒S7基因的截短表达及间接ELISA检测方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：张文龙殷喆王君伟杨涛吴东来农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨 150001 东北农业大学动物医学学院哈尔滨 150030 东北农业大学动物医学学院哈尔滨 150030 农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨 150001

关键词：茨城病病毒蛋白抗原性编码基因原核表达系统

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抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会

作者：魏鹏张翠云吴东来孙恩成刘霓红杨涛徐青元秦永丽赵晶冯瑜菲王文世中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001 湖南农业大学动物医学学院，湖南长沙410128 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030

为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb)，本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTVI)免疫BALB／c鼠，4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0进行融合，并用BTVl包被ELISA板，通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTVl的MAb的杂交瘤细胞株... 详细信息

为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb)，本研究利用血清型1型蓝舌病病毒(BTVI)免疫BALB／c鼠，4次免疫后取小鼠脾淋巴细胞与SP2／0进行融合，并用BTVl包被ELISA板，通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTVl的MAb的杂交瘤细胞株(2810、3D4、4H8)。利用表达BTVl主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后，对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及Western blot鉴定，结果显示：2810和4H8与VP7蛋白反应，而3D4与VP6蛋白反应。进一步利用IFA对3株MAb的反应特异性进行鉴定，结果表明3株MAb与24个血清型的BTV均可反应。本实验室制备所得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。

关键词：蓝舌病病毒单克隆抗体 VP7蛋白抗体制备抗性鉴定

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蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

引用

2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

作者：秦永丽孙恩成耿宏伟徐青元杨涛赵晶王文世魏鹏冯瑜菲李俊平李文京吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室中国动物疫病预防控制中心

蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)引起的,主要由库蠓传播的反刍动物烈性非接触性传染病。BT血清型众多,目前已发现24个血清型,最近又相继分离到BTV25和26型。BTV基因组由10个线性双链... 详细信息

蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)引起的,主要由库蠓传播的反刍动物烈性非接触性传染病。BT血清型众多,目前已发现24个血清型,最近又相继分离到BTV25和26型。BTV基因组由10个线性双链RNA片段组成,共编码11种蛋白,七种结构蛋白(VP1-VP7)和四种非结构蛋白(NS1、NS2、NS3/NS3a和NS4)。其

关键词：抗原表位 VP2 单克隆抗体制备

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蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

引用

2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会

作者：王文世孙恩成刘霓红杨涛徐青元秦永丽赵晶冯瑜菲魏鹏张翠云李文京吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室中国动物疫病预防控制中心

研究目的:蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起,由库蠓等昆虫传播的反刍动物非接触性传染病;主要侵害绵羊、山羊,牛为隐性感染。由于发病绵羊持续高热、消瘦、口鼻和胃粘膜出现溃疡损伤、口腔粘膜及舌头发蓝... 详细信息

研究目的:蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起,由库蠓等昆虫传播的反刍动物非接触性传染病;主要侵害绵羊、山羊,牛为隐性感染。由于发病绵羊持续高热、消瘦、口鼻和胃粘膜出现溃疡损伤、口腔粘膜及舌头发蓝,因此命名为蓝舌病。蓝舌病VP7蛋白位于病毒颗粒内衣壳的最外侧,约占病毒成分的36%,是主要的血清群特异性抗原,因此获得针对VP7蛋白的单克隆抗体,就为蓝舌病免疫学检测方法的建立奠定了基础。

关键词：单克隆抗体 BTV 群特异性抗原 VP7 生物学特性杂交瘤细胞株特异性反应

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流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：赵付荣张桂红华荣虹周东辉步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001 华南农业大学兽医学院广东广州 510642 华南农业大学兽医学院广东广州 510642 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001

@@流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis，JE)简称乙脑，是由乙型脑炎病毒引起的一种重要蚊媒性人兽共患传染病。JEV E蛋白是病毒粒子表面最重要的结构蛋白，其表面的抗原决定簇，具有血凝活性和中和活性。E蛋白与病毒的毒力、宿主范... 详细信息

@@流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis，JE)简称乙脑，是由乙型脑炎病毒引起的一种重要蚊媒性人兽共患传染病。JEV E蛋白是病毒粒子表面最重要的结构蛋白，其表面的抗原决定簇，具有血凝活性和中和活性。E蛋白与病毒的毒力、宿主范围、组织嗜性、膜融合、保护性免疫、血凝反应和血清特异性有关。单克隆抗体纯度高、专一性强、重复性好且能在动物体外或体内产生同质性抗体，以它作为诊断抗体能克服多克隆抗血清诊断时稳定性差及非特异性强等缺点，在生命科学领域中已经得到广泛的应用。

关键词：流行性乙型脑炎病毒 E蛋白单克隆抗体

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流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：赵付荣周东辉华荣虹王斌陈娜莎阿合买提·买买提步志高华南农业大学兽医学院广东广州 510642 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001 华南农业大学兽医学院广东广州 510642 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部兽医公共卫生重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨 150001

流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephaIitis virus，JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒。表面囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白。本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒AA14-14-2株结构蛋白E蛋白作为免疫原，免疫6周龄BALB/c小鼠... 详细信息

流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephaIitis virus，JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒。表面囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白。本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒AA14-14-2株结构蛋白E蛋白作为免疫原，免疫6周龄BALB/c小鼠，采用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合，经有限稀释法获得1株特异性针对JEVE蛋白的杂交瘤细胞，命名为5D4，经测定5D4单抗亚类属于IgG2a，轻链为K链。经Westem blot证实所得杂交瘤细胞分泌的抗体可特异地与JEVE蛋白结合。结果表明，所制备的抗JEVE蛋白的单抗对病原检测具有很高的特异性，为JEV准确快速的病原诊断和JEV感染相关的基础性研究提供了物质基础。

关键词：乙型脑炎病毒 E蛋白单克隆抗体

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鸡IFN-γDNA-壳聚糖纳米粒的制备及体外转染

鸡IFN-γDNA-壳聚糖纳米粒的制备及体外转染

引用

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会

作者：殷喆张文龙刘霓红杨涛步志高王君伟吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨 150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室黑龙江哈尔滨 150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨 150030

构建了携带鸡干扰素(IFN-)重组真核表达质粒pCAGGS-ChIFNr-,制备成承载pCAGGS-ChlFN- 的壳聚糖纳米粒子。透射电镜观察制备的纳米粒子呈不规则球形,光子相关色谱(PCS)仪测定显示纳米粒子的平均粒径为172.6+5.1nm;Zeta电位为20.8±2.... 详细信息

构建了携带鸡干扰素(IFN-)重组真核表达质粒pCAGGS-ChIFNr-,制备成承载pCAGGS-ChlFN- 的壳聚糖纳米粒子。透射电镜观察制备的纳米粒子呈不规则球形,光子相关色谱(PCS)仪测定显示纳米粒子的平均粒径为172.6+5.1nm;Zeta电位为20.8±2.9mV;载基因纳米粒子的重组质粒DNA包埋效率和载药量分别为91.21±2.54％和31.93±0.16％。载基因壳聚糖纳米粒子可以有效地保护重组质粒DNA,防止核酸酶对其的降解作用,并能良好的从纳米粒子中释放重组质粒DNA。CEF细胞体外转染实验表明：包裹后的纳米粒子对细胞基本无毒性,使携带的外源基因能在CEF细胞中正确表达,其转染效率约为阳离子脂质体转染试剂LipofectamineTM2000 Reagent的1/6。

关键词：壳聚糖纳米颗粒鸡γ-干扰素基因体外转染真核表达

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