检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2008年第8期29卷 60-62页

作者：田丽娜王秀荣杨忠苹石霖陶启蒙陈化兰东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、... 详细信息

禽流感是由流感病毒引起的一种人和动物的高度传染性疾病,不但造成养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全存在威胁。因此,快速、准确的基因诊断技术对于禽流感的防控显得非常重要。近年来,主要有RT-PCR技术、荧光定量RT-PCR技术、核酸依赖扩增技术(NASBA)以及基因芯片等基因诊断技术。文章就这些方法的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,以期为有效控制禽流感的发生与流行提供有力技术支撑。

关键词：禽流感反转录-聚合酶链反应核酸依赖扩增技术基因芯片

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禽流感快速诊断方法

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畜牧兽医科技信息 2006年第7期22卷 6-7页

作者：郝婧邓国华郝永清内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

禽流行性感冒(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类的一种急性高度接触性传染病,国际动物卫生组织将其列为A类动物传染病,我国将其列为一类疫病。该病1878年首次发生于意大利,当时称之为“鸡瘟”,现已几乎遍布世界各地。AI可... 详细信息

禽流行性感冒(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类的一种急性高度接触性传染病,国际动物卫生组织将其列为A类动物传染病,我国将其列为一类疫病。该病1878年首次发生于意大利,当时称之为“鸡瘟”,现已几乎遍布世界各地。AI可引起大多数家禽、野禽及水禽的感染,其中以鸡和火鸡最为易感,水禽则认为是流感病毒的自然宿主,一般情况下感染带毒而不发病。哺乳动物也可发生不同程度的感染。禽流感病毒已经席卷亚欧大陆、欧洲和非洲。在东南亚各国包括中国在内,H5N1亚型禽流感病毒已感染204人,113人死亡。禽流感病毒根据表面糖蛋白HA和NA的抗原性差异可以分为16个HA亚型和9个NA亚型,不同亚型病毒之间可以通过交换某些基因片段发生基因重排,出现具有新的生物学特征的病毒,因此,禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)最显著的生物学特征之一就是亚型众多。而且,不同亚型或血清型之间无交叉反应性或反应性低,这使得禽流感的诊断监测工作较为困难。[第一段]

关键词：禽流感病毒快速诊断方法 H5N1亚型 A型流感病毒国际动物卫生组织生物学特征禽流行性感冒接触性传染病动物传染病抗原性差异

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一株鸽子源的H4N8亚型禽流感病毒的部分生物学特性

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公共卫生与预防医学 2018年第3期29卷 13-17页

作者：刘驰煌谷文丽崔鹏飞邓国华熊涛长江大学生命科学学院湖北荆州434025 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室

目的实验室2017年对我国四川省遂宁船山区蜀中食品城进行流行病学调查时从鸽子体内分离鉴定出的一株H4N8亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)(A/Pigeon/Sichuan/S1185/2017(H4N8)(缩写为PG/SC/S1185/2017)。方法为了解此株从鸽... 详细信息

目的实验室2017年对我国四川省遂宁船山区蜀中食品城进行流行病学调查时从鸽子体内分离鉴定出的一株H4N8亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)(A/Pigeon/Sichuan/S1185/2017(H4N8)(缩写为PG/SC/S1185/2017)。方法为了解此株从鸽子体内分离到的H4N8亚型AIV的遗传进化特点,对此株病毒进行了全基因组的测序并画出基因进化树来探索其毒株来源,还探究了该株病毒对哺乳动物的感染能力。结果遗传演化分析数据表明,这株病毒株的各个基因节段分别来自于不同亚型流感病毒,基因来源复杂,是一株重组病毒,其具有明显的遗传多样性。小鼠感染性实验结果表明,该毒株仅能够在小鼠肺脏和鼻甲中产生微弱复制,在小鼠感染病毒3d后并未出现明显临床症状,小鼠活力没有明显的下降,与对照组相比体重变化其实基本相同。结论为今后的流行病学调查中对H4亚型流感病毒的全面监测和综合预防防控提供了数据支持。

关键词：禽流感病毒 H4N8 感染性遗传演化分析

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中国H5亚型禽流感病毒2004年分离株HA基因的序列分析

中国H5亚型禽流感病毒2004年分离株HA基因的序列分析

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会

作者：邓国华王劭余丹丹李雁冰田国彬杨汉春于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 中国农业大学动物医学院

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行HA基因序列测定和分析发现,HA基因的裂解位点有部分毒株比其他毒株少1了一个碱性氨基酸,其编码的可能糖基化位点有较大差异,除了有7个共有的糖基化位点以外... 详细信息

本研究对中国2004年发生高致病性禽流感疫情的38个疫点的H5N1亚型病毒分离株进行HA基因序列测定和分析发现,HA基因的裂解位点有部分毒株比其他毒株少1了一个碱性氨基酸,其编码的可能糖基化位点有较大差异,除了有7个共有的糖基化位点以外,还有16个毒株在170位多了一个潜在的糖基化位点,DK/HuNYY/7004毒株在156多了一个糖基化位点,但是所有毒株的受体结合位点完全一致,而在受体结合部的两侧有一定的差异.从遗传进化树上来看,我国2004年H5亚型禽流感病毒分离株的HA基因和我国早期毒株CKNX/48/02,DKHUN/40/02和DKZJ/52/00有较为密切关系,而与香港以及东南亚国家毒株的基因有着较大的差异.

关键词： H5N1禽流感病毒序列分析分子演化分离鉴定

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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

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第六次人畜共患病学术交流会

作者：陈君彦李海燕申之义陈化兰于康震毕英佐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 内蒙古农业大学动物科学与医学学院(呼和浩特) 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨) 全国畜牧兽医总站(北京) 华南农业大学动物科学学院(广州)

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋... 详细信息

本研究对2001年中国华南及东北地区的15株H1N1亚型猪流感病毒(SIV)分离株的血凝素(HA)基因进行了序列测定和分析,并绘制了进化树.研究结果表明,15株H1N1 SIV的HA基因核甘酸全长为1778bp,共编码566个氨基酸;而且,15株H1N1亚型SIV的HA1蛋白在10、11、23、87、287位都存在高度保守的糖基化位点,此外,在276位多了一个"-NTT-"糖基化位点,与参考毒株SW/IW/930/01一致,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征.本研究进一步发现,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G,具有非高致病力毒株分子特征;而其受体结合位点在HA蛋白上第226位是Q,第228位为G,可能具有感染禽的潜力.经同源性比较,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/4754/94的同源性相对最高,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到95.7~96.1﹪和96.5~97.2﹪.由同源性比较结果和进化树分析可见,15株H1N1亚型SIV的HA基因皆属于古典型的H1N1猪谱系.

关键词：猪流感病毒血凝素序列分析分子演化正粘病毒科流感病毒

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胶体金试纸条检测H5亚型禽流感病毒的研究

胶体金试纸条检测H5亚型禽流感病毒的研究

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：邓国华曲站红林涛黎玉梅熊蕊施建忠赖清金李雁冰陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 漳州格林沃生物公司

本研究用一株H5亚型特异性的流感病毒单抗标记胶体金,另一株单抗包被于硝酸纤维素膜上,建立起H5亚型特异性的胶体金层析法检测试纸条,用该试纸条可以特异性的检测出H5亚型特异性流感病毒,而其他亚型流感病毒和其他禽类病毒均不能检测到... 详细信息

本研究用一株H5亚型特异性的流感病毒单抗标记胶体金,另一株单抗包被于硝酸纤维素膜上,建立起H5亚型特异性的胶体金层析法检测试纸条,用该试纸条可以特异性的检测出H5亚型特异性流感病毒,而其他亚型流感病毒和其他禽类病毒均不能检测到.同时用HA试验进行比较,试纸条检测法的敏感性比HA试验高4倍左右,试纸条检测阳性的样品均呈现H5亚型流感病毒阳性.该试纸条可以检测临床试验感染死亡鸡的脏器匀浆液中H5亚型流感病毒的存在.

关键词：胶体金试纸条 H5亚型禽流感病毒

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以GPT和GFP为双重筛选标记的禽痘病毒通用转移载体的构建及鉴定

以GPT和GFP为双重筛选标记的禽痘病毒通用转移载体的构建及鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：王艳丽李俊辉姜永萍夏俊裴磊冉多良陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室新疆农业大学动物医学院

禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用,转移栽体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt,该载体含有gfp和gpt两个报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启动子P7.5,P11启动gfp和... 详细信息

禽痘病毒作为活载体已经得到广泛的应用,转移栽体的构建是重组禽痘病毒构建的重要环节。本研究构建了禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt,该载体含有gfp和gpt两个报告基因及背对的痘苗病毒晚期启动子P11和早期启动子P7.5,P11启动gfp和gpt两个基因,P7.5用于启动外源基因,在早期启动子P7.5下游引入NotⅠ和AflⅡ两个酶切位点,用于外源基因的插入。为检测禽痘病毒通用转移载体pSY681-gfp-gpt的效果,将H9亚型禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/10/01(H9N2)的HA基因插入到此载体构建了转移载体pSY681-gfp-gpt-HA,应用TransIT-LT1 Transfection Reagent将此转移载体转染已感染禽痘病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞,利用gfp和gpt同时进行双重筛选、数轮蚀斑纯化构建了重组病毒rFPV-gpt-gfp-HA9,通过PCR、Western blot鉴定,结果证明,获得了能稳定表达AIV HA蛋白的重组禽痘病毒r-FPV-gpt-gfp-HA9。

关键词：重组禽痘病毒绿色荧光蛋白黄嘌呤鸟嘌呤磷酸转移酶 HA基因

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抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备和鉴定

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生物技术通讯 2010年第1期21卷 47-50页

作者：孙林季琰左为亮王秀荣潘志明焦新安扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

目的:获得分泌抗H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。方法:以H9N2亚型AIV为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14,在PEG4000的作用下进行细胞融合,通过血凝抑制(HI)试验筛选分泌抗H9... 详细信息

目的:获得分泌抗H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。方法:以H9N2亚型AIV为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag-14,在PEG4000的作用下进行细胞融合,通过血凝抑制(HI)试验筛选分泌抗H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果:经过连续3～4次克隆化,获得能稳定分泌抗H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体细胞系6株,分别命名为1B2、1C10、1G2、2B7、2E3和5E11。6株细胞培养上清HI效价为24～28,腹水HI效价为210～213。除1G2为IgM外,其余5株均为IgG1。Western blotting结果显示,1B2、1C10、2B7和2E3能与AIVH9蛋白在Mr为75000处反应,表明其是针对AIVH9亚型血凝素蛋白的单抗。特异性试验表明该6株单抗均只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而不与其他14个HA亚型的AIV及新城疫病毒、传染性支气管炎病毒发生交叉反应,显示出良好的特异性。结论:制备了针对H9亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体,为禽流感的快速诊断和病毒的抗原性分析等奠定了基础。

关键词：禽流感病毒 H9亚型血凝素单克隆抗体

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猪源H9N2亚型流感病毒HA基因的序列测定及真核表达

猪源H9N2亚型流感病毒HA基因的序列测定及真核表达

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：韩庆功乔传玲杨焕良陈艳辛晓光丁选亚陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室河南科技学院动物科学学院

利用RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Zhejiang/7/2004(H9N2)HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGS上,经酶切分析、PCR鉴定和测序验证,得到重组表达质粒pCAGGS-HA,之后将其转染293T细胞,48h后收集转染细胞样品,进行SDS-PAGE分析,结... 详细信息

利用RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Zhejiang/7/2004(H9N2)HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGS上,经酶切分析、PCR鉴定和测序验证,得到重组表达质粒pCAGGS-HA,之后将其转染293T细胞,48h后收集转染细胞样品,进行SDS-PAGE分析,结果显示HA蛋白获得了表达,经Western-blot检测,结果表明pCAGG-HA能够在体外瞬时表达具有免疫学活性的HA蛋白,通过免疫小鼠,对其免疫效果进行了初步研究。

关键词：猪流感病毒 HA基因序列测定真核表达

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表达H7亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒的构建及其免疫效力评估

表达H7亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒的构建及其免疫效力评...

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：李俊辉王艳丽姜永萍左青山冉多良陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室新疆农业大学动物医学院

本研究将我国H7亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Hebei/1/02(H7N2)的HA基因克隆到质粒pSY538上,把含有禽痘病毒启动子P11的LacZ基因亚克隆到质粒pSY538-HA7的SmaⅠ位点,然后切下同时含有HA和LacZ基因的片段再克隆到禽痘病毒载体pSY681的... 详细信息

本研究将我国H7亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Hebei/1/02(H7N2)的HA基因克隆到质粒pSY538上,把含有禽痘病毒启动子P11的LacZ基因亚克隆到质粒pSY538-HA7的SmaⅠ位点,然后切下同时含有HA和LacZ基因的片段再克隆到禽痘病毒载体pSY681的NotⅠ位点,构建出禽痘病毒转移载体pSY681-HA7-LacZ,将此重组质粒与亲本禽痘病毒S-FPV-017共转染鸡胚成纤维细胞,通过加入X-gal进行数轮重组病毒的筛选、纯化,获得一株重组病毒rFPV-H7HB,PCR和Western blot鉴定结果表明重组鸡痘病毒可以稳定表达HA蛋白。分别用106PFU、104PFU、102PFU剂量的重组病毒rFPV-H7HB经翅膀刺种途径接种免疫4周龄SPF鸡,免疫3周后分别用100LD50的HPAIV A/FPV/Rostock/34(H7N1)鼻腔途径进行攻击。结果,不同剂量的重组病毒免疫后均可诱导出较高水平的HI抗体,并可完全抵抗H7N1毒株的致死性攻击,而非免疫对照组在攻毒后全部发病并死亡。结果表明,稳定高效表达我国H7亚型禽流感分离株A/Chicken/Hebei/1/02(H7N2)HA基因的重组禽痘病毒rFPV-H7HB可为我国H7亚型高致病性禽流感的防制提供必要和有效的物质技术储备。

关键词：禽流感 H7亚型 HA基因重组禽痘病毒

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