检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2018年第10期40卷 897-901页

作者：胡玉珍陈普成丁蕾蕾赵玉博姜永萍陈化兰柳金雄中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150069

为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中的复制非必需区,本研究在已建立的DEV疫苗株5粘粒拯救系统的基础上,利用转座子随机插入技术,将含eGFP表达框架的基因片段随机插入DEV US区,救获两株表达绿色荧光蛋白的重组DEV(rDEV-us7eGFP、rDEV-us8us1eG... 详细信息

为探寻鸭瘟病毒(DEV)基因组中的复制非必需区,本研究在已建立的DEV疫苗株5粘粒拯救系统的基础上,利用转座子随机插入技术,将含eGFP表达框架的基因片段随机插入DEV US区,救获两株表达绿色荧光蛋白的重组DEV(rDEV-us7eGFP、rDEV-us8us1eGFP)。将两株重组病毒在鸡胚成纤维细胞中连续传至20代后,通过PCR、荧光表达鉴定分析,结果显示gfp基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果表明,重组病毒在CEF中的增殖效率与DEV疫苗株无显著差异。攻毒保护实验结果表明,将rDEV-us7eGFP和rDEV-us8us1eGFP以10~5TCID_(50)的剂量免疫SPF鸭后,其对鸭瘟强毒攻击的保护效率与DEV疫苗株一致,均为100%。本研究成功筛选到DEV基因组中的两个可供外源基因插入的复制非必需区,分别位于us7基因内部及us8与us1基因之间,为以DEV为载体构建相关重组疫苗奠定了重要基础。

关键词：鸭瘟病毒复制非必需区重组病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

影响禽流感病毒致病性和传播的关键氨基酸位点的研究进展

引用

中国预防兽医学报 2014年第2期36卷 165-168页

作者：徐晓龙包红梅陈化兰王秀荣中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

A型流感病毒根据其血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的不同分为不同亚型，目前已鉴定出有17种HA亚型和10种NA亚型。禽流感（AvianInfluenza，AI）是由A型流感病毒引起的急性或慢性呼吸道传染病，

关键词：禽流感病毒神经氨酸酶致病性慢性呼吸道传染病 A型流感病毒酸位传播亚型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪流感病毒NP基因重组复制缺陷型腺病毒的构建与表达

引用

中国兽医学报 2010年第7期30卷 941-944页

作者：展小过乔传玲陈艳杨焕良孔维吴运谱辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆至质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质... 详细信息

以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆至质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Western blotting鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物学活性。重组腺病毒rAd-NP-EGFP经增殖、纯化后其TCID50可达1.26×1010/mL,为进一步研究该重组病毒的免疫原性奠定了基础。

关键词：猪流感病毒 NP基因重组腺病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA检测方法的建立

引用

中国预防兽医学报 2013年第7期35卷 566-569页

作者：陈艳乔传玲杨焕良孔维辛晓光陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为快速检测H3亚型猪流感病毒(SIV),本研究将一株H3N2亚型SIV特异性单克隆抗体(MAb)进行纯化,建立了以多抗作为包被抗体,MAb作为检测抗体的H3亚型SIV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。并对该方法的特异性和敏感性进行了分析,其敏感性是血凝... 详细信息

为快速检测H3亚型猪流感病毒(SIV),本研究将一株H3N2亚型SIV特异性单克隆抗体(MAb)进行纯化,建立了以多抗作为包被抗体,MAb作为检测抗体的H3亚型SIV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。并对该方法的特异性和敏感性进行了分析,其敏感性是血凝试验的4倍,与猪繁殖与综合征病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒以及H1、H5、H9亚型SIV均没有明显的交叉性反应,批间和批内重复试验变异系数均小于10%。应用建立的AC-ELISA方法对84份H3亚型SIV实验室感染样品进行检测与鸡胚滴定病毒结果符合率达90.47%。本实验建立的AC-ELISA方法具有良好的特异性和敏感性,可用于H3亚型SIV的临床检测。

关键词：猪流感病毒 H3亚型单克隆抗体抗原捕捉ELISA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H6N2亚型禽流感病毒全基因组的序列分析及其致病性研究

引用

中国预防兽医学报 2013年第11期35卷 870-873页

作者：刘丽玲胡守萍段振华李雁冰施建忠田国彬曾显营陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定出1株H6N2亚型禽流感病毒(AIV)。为了解该病毒DK/GD/S6/08(H6N2)的生物学特征,本研究对其全基因序列进行分析并对SPF鸡和SPF鸭进行致病性试验。结果表明DK/GD/S6/08(H6N2)... 详细信息

2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定出1株H6N2亚型禽流感病毒(AIV)。为了解该病毒DK/GD/S6/08(H6N2)的生物学特征,本研究对其全基因序列进行分析并对SPF鸡和SPF鸭进行致病性试验。结果表明DK/GD/S6/08(H6N2)的HA裂解位点附近的氨基酸序列为340QIETR↓GLF347,符合低致病力AIV的特征。其HA基因与A/duck/Shantou/8365/2005(H6N6)同源性最高;NA基因在颈部无缺失;除M基因外,其他5个内部基因均来源于H6亚型AIV。鸭致病性试验表明DK/GD/S6/08(H6N2)可以感染SPF鸭,并通过泄殖腔排毒,法氏囊等脏器中可以检测到病毒,肺脏、肾脏、法氏囊和脑组织中可见病理变化。鸡致病性试验显示鸡的脑、肺脏、脾脏、法氏囊、肾脏、十二指肠和胰腺均未检测到病毒,咽喉拭子和泄殖腔拭子中未检测到病毒,表明该病毒不能感染SPF鸡。

关键词：禽流感病毒 H6N2亚型序列分析致病性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

人源H3N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/2005的分离鉴定及全基因遗传演化分析

引用

中国预防兽医学报 2009年第4期31卷 322-324页

作者：许传田董国英杨焕良乔传玲陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

2005年从广东某猪场采集疑似流感病猪的病料(气管和肺脏)样品共40份,通过MDCK细胞培养分离到6株A型流感病毒,经过血凝抑制和PCR扩增方法鉴定均为H3N2亚型。挑选其中一个代表株A/swine/Guangdong/1/05(H3N2)(SwGD1/05)进行全基因组测序并... 详细信息

2005年从广东某猪场采集疑似流感病猪的病料(气管和肺脏)样品共40份,通过MDCK细胞培养分离到6株A型流感病毒,经过血凝抑制和PCR扩增方法鉴定均为H3N2亚型。挑选其中一个代表株A/swine/Guangdong/1/05(H3N2)(SwGD1/05)进行全基因组测序并与GenBank中相关序列比较,结果发现SwGD1/05的8个基因分别与人流感病毒相关基因氨基酸同源性高达98.5%～99.4%;SwGD1/05的8个基因进化树中分别位于北美和欧洲人流感病毒进化谱系位置;由此推测SwGD1/05可能来源于北美或欧洲人源流感病毒株。这一结果为阐明猪作为流感病毒传播的中间宿主作用提供了的理论支持,本研究具有重要的人类公共卫生意义。

关键词：人源猪流感病毒 H3N2亚型分离鉴定遗传演化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对商品蛋鸡的免疫保护效果

引用

中国兽医学报 2007年第1期27卷 62-65页

作者：姜永萍张洪波张平静赵有淑王全英邓国华陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

将密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5以50μg和10μg剂量单次或加强免疫5周龄海兰褐蛋鸡。单次免疫后3周及加强免疫后2周,用100LD50高致病力禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[Gs/GD/1/96(H5N1)]鼻腔途... 详细信息

将密码子及表达载体优化的H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5以50μg和10μg剂量单次或加强免疫5周龄海兰褐蛋鸡。单次免疫后3周及加强免疫后2周,用100LD50高致病力禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[Gs/GD/1/96(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,并分别于攻毒后3、5、7d采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果表明,pCAGGoptiHA5以10μg加强免疫后,可以诱导商品蛋鸡产生较高水平的HI抗体,并可保护免疫蛋鸡不发生高致病性禽流感病毒攻击后的死亡。

关键词：禽流感 DNA疫苗商品蛋鸡免疫保护

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Clade 2.2 H5N1亚型禽流感重组灭活疫苗株的构建及其对小鼠免疫效力的评价

引用

中国预防兽医学报 2010年第9期32卷 699-702页

作者：裴磊王国俊熊杰李雁冰姜永萍陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为研制安全、有效的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)重组灭活疫苗,本研究以A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)AIV为内部基因供体,以Clade2.2H5N1亚型AIV A/Bar-headed goose/Qinghai/3/2005(BHGQH/05)为表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因供体,通过反向遗传操作,在符合人类疫苗生产标准的Vero细胞中救获低致病性的疫苗毒株,将制备的灭活全病毒疫苗单次和加强免疫BALB/c小鼠,检测疫苗的免疫保护效果。实验结果表明,单次和加强免疫组小鼠均能对同源和异源病毒的攻击提供100%完全保护;加强免疫能够显著提高HI和NT抗体的水平,用BHGQH/05做抗原检测加强免疫不加佐剂组的HI和NT抗体滴度分别高达1173.3和1280。本研究为下一步在灵长类动物模型上的免疫评价以及进一步的临床试验奠定了坚实的基础。

关键词： H5N1禽流感反向遗传操作 Vero细胞系 BALB/c小鼠免疫评价

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H7N9亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立及其疫苗候选株的构建

引用

中国预防兽医学报 2014年第5期36卷 407-409页

作者：李媛媛郭晶李旭勇王金良范俊梁立滨邓国华施建忠陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

为建立H7N9亚型禽流感病毒(AIV)反向遗传操作系统,本研究以H7N9亚型(AIV)A/CK/Shanghai/S1053/2013(CK/53)株为亲本病毒,构建了该病毒株的8质粒反向遗传操作系统,并拯救出救获株rCK/53。全基因组序列测定结果表明,rCK/53与亲本病毒的核... 详细信息

为建立H7N9亚型禽流感病毒(AIV)反向遗传操作系统,本研究以H7N9亚型(AIV)A/CK/Shanghai/S1053/2013(CK/53)株为亲本病毒,构建了该病毒株的8质粒反向遗传操作系统,并拯救出救获株rCK/53。全基因组序列测定结果表明,rCK/53与亲本病毒的核苷酸序列完全一致。同时以A/PueaoRico/8/34(PR8)的内部基因为骨架,以CK/53的HA和NA的表面基因为供体,构建H7N9亚型AIV疫苗候选株CK53/PR8,疫苗株的8个基因来源与预期完全一致。对rCK/53以及疫苗候选株CK53/PR8在MDCK和A549两种细胞中进行生物学特性的比较,在A549中复制差异不显著,而在MDCK中48 h和72 h两者复制具有明显差异。rCK/53反向遗传操作系统的建立和疫苗候选株CK53/PR8的构建为进一步开展H7N9亚型AIV跨宿主传播机制、致病机理及进一步的免疫保护实验奠定了基础。

关键词： H7N9 禽流感病毒反向遗传操作系统疫苗候选株

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达及其产物的免疫原性

引用

中国兽医科学 2007年第4期37卷 312-315页

作者：王全英乔传玲张洪波吴运谱田国彬陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)株的NA基因及LacZ报告基因克隆到禽痘病毒载体pSY681中,构建重组转移载体pSY(NA+LacZ),将其转染鸡胚成纤维细胞,经蓝白斑筛选,纯化表达NA基因的重组禽痘病毒rFPV-NA,用其免疫SPF鸡,检测该重组... 详细信息

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)株的NA基因及LacZ报告基因克隆到禽痘病毒载体pSY681中,构建重组转移载体pSY(NA+LacZ),将其转染鸡胚成纤维细胞,经蓝白斑筛选,纯化表达NA基因的重组禽痘病毒rFPV-NA,用其免疫SPF鸡,检测该重组禽痘病毒的免疫原性。结果显示,该重组禽痘病毒能够在体外培养细胞内表达具有生物学活性的NA蛋白,表达产物的分子质量约为55 ku;用该重组禽痘病毒免疫SPF鸡后,能够使免疫鸡获得对H5N1和H7N1两种亚型HPAIV攻击的部分保护。表明,重组禽痘病毒rFPV-NA具有良好的免疫原性。

关键词：禽流感病毒 NA基因重组禽痘病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：