检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2009年第5期39卷 416-420页

作者：李媛董惠张美晶陈超曹培丽郭丹姜海芳辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎指定检测实验室黑龙江哈尔滨150001

参考GenBank中牛霉形体和无乳霉形体P81基因的序列差异,设计了针对牛霉形体P81基因的PCR引物,建立了牛霉形体PCR检测方法,并对该方法进行了敏感性和特异性试验。该方法可以从100ccu/mL(ccu:color change unit,颜色变化单位)的牛霉形体... 详细信息

参考GenBank中牛霉形体和无乳霉形体P81基因的序列差异,设计了针对牛霉形体P81基因的PCR引物,建立了牛霉形体PCR检测方法,并对该方法进行了敏感性和特异性试验。该方法可以从100ccu/mL(ccu:color change unit,颜色变化单位)的牛霉形体培养物中检出目的片段;经对丝状霉形体丝状亚种SC型(MmmSC)PG1株、丝状霉形体丝状亚种LC型(MmmLC)Y-goat株、山羊霉形体山羊亚种(Mccp)87001株、无乳霉形体(***)PG2株、绵羊肺炎霉形体Y-98株等亲缘关系相近的霉形体纯培养物检测,结果证实该方法具有良好的特异性。利用建立的PCR检测方法可以从人工感染牛的鼻拭子和临床发病牛肺中扩增出目的片段,与分离培养结果完全符合,本方法为国内首次建立的敏感、特异、快速的牛霉形体PCR检测方法。

关键词：牛霉形体牛传染性胸膜肺炎聚合酶链式反应

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猪肺炎支原体P97 C末端基因重组腺病毒的构建与鉴定

猪肺炎支原体P97 C末端基因重组腺病毒的构建与鉴定

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会

作者：陈超辛九庆李媛王亮郭丹曹培丽乔祖建中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室

从猪肺炎支原体基因组中扩增其黏附因子P97C末端基因,然后通过KpnⅠ和SalⅠ酶切位点把该基因克隆入经过同样双酶切的穿梭载体pShuttle-CMV中。将鉴定正确的的重组穿梭质粒经PemⅠ线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞... 详细信息

从猪肺炎支原体基因组中扩增其黏附因子P97C末端基因,然后通过KpnⅠ和SalⅠ酶切位点把该基因克隆入经过同样双酶切的穿梭载体pShuttle-CMV中。将鉴定正确的的重组穿梭质粒经PemⅠ线性化后电转化入内含腺病毒骨架载体的BJ5183感受态细胞中,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA。纯化后的重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞获得重组腺病毒。重组腺病毒经间接免疫荧光和Western Blot鉴定,证明了该重组腺病毒成功的表达了P97C末端蛋白。将该重组病毒进行纯化并进行滴度测定,获得了高纯度、高滴度的表达P97C末端基因的重组腺病毒,为研制新型猪肺炎支原体疫苗奠定了基础。

关键词：猪肺炎支原体猪喘气病 P97 重组腺病毒

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丝状支原体丝状亚种SC型LppB基因的克隆与表达纯化

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中国生物制品学杂志 2006年第4期19卷 373-375页

作者：李媛辛九庆高玉龙王砚范中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室哈尔滨150001

目的克隆丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppB蛋白基因,并进行表达及纯化。方法通过PCR,扩增MmmSC标准株PG1的LppB全基因,克隆至pMD18-T载体上,并测序鉴定。同时选LppB基因中两个TGA之间903bp片段,与pET30a载体构建重组质粒,进行诱导表达... 详细信息

目的克隆丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppB蛋白基因,并进行表达及纯化。方法通过PCR,扩增MmmSC标准株PG1的LppB全基因,克隆至pMD18-T载体上,并测序鉴定。同时选LppB基因中两个TGA之间903bp片段,与pET30a载体构建重组质粒,进行诱导表达,表达产物经Ni-NTA-His系统纯化。结果PCR扩增的LppB基因长度片段约1869bp,与预期大小相符。将其与NCBI上发布的Afade株、LC型代表株Y-goat和同属的Bovine7株的LppB基因序列相比较,同源性分别为99·8%、92·8%和76·7%,氨基酸同源性分别为99·2%、90·2%和67·0%。经Ni-NTA-His系统纯化,得到纯净的单一蛋白。结论已成功克隆了PG1的LppB蛋白基因,并进行了表达及纯化。

关键词：丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC) LppB基因克隆表达

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从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定

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中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 375-379页

作者：李媛陶岳阿依吐拉.肉孜高玉龙尹训南李新萍张孝恩王砚范辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室黑龙江哈尔滨150001 新疆石河子畜牧兽医站新疆石河子832000 新疆维吾尔自治区动物防疫监督总站新疆乌鲁木齐830063

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏... 详细信息

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较,结果证明该序列与绵羊肺炎支原体(***)标准株Y-98同源性为99.9%,而与山羊支原体山羊亚种(***,Mcc)、丝状支原体山羊亚种(***,Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(***,***)等同源率为81%。以感染羊血清和Y-98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体菌体蛋白进行Westernblot,证明均与感染羊血清有特异性反应,且与Y-98相比无明显差异,故确定分离株为绵羊肺炎支原体(***)。

关键词：绵羊肺炎支原体 16 S rRNA 鉴定

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一株致病性山羊支原体山羊肺炎亚种支原体的分离

一株致病性山羊支原体山羊肺炎亚种支原体的分离

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2006中国科协年会

作者：辛九庆张建华胡守萍李媛中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室

一、引言山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum sub ***)是引起山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine ***)的病原体,原称生物型F38,最早是由MacOwan和Minette于1976年在肯尼亚分离成功。CCPP是山羊特有的急性或慢性高度接触... 详细信息

一、引言山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum sub ***)是引起山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine ***)的病原体,原称生物型F38,最早是由MacOwan和Minette于1976年在肯尼亚分离成功。CCPP是山羊特有的急性或慢性高度接触性传染病,以呈现纤维素性肺炎和胸膜炎为特征。我国20世纪20年代曾在新疆维吾尔自治区伊犁地区最早发现,新中国成立以后,该病先后在新疆、甘肃、西藏、四川、内蒙古、宁夏、山东、浙江、辽宁、福建等省、

关键词：预防兽医学山羊传染性胸膜肺炎山羊支原体山羊肺炎亚种丝状支原体山羊亚种

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猪肺炎支原体主要免疫蛋白Hsp70的克隆与原核表达

猪肺炎支原体主要免疫蛋白Hsp70的克隆与原核表达

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中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议

作者：李媛辛九庆张建华王亮中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验型细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验型细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验型细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验型细菌病研究室国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室

由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae Mhp)引起的猪支原体肺炎(MPS)或猪地方流行性肺炎,是造成养猪业经济损失的最重要的疾病之一。MPS以接触性、高度传染性、慢性、高发病率和低死亡率为特点,主要表现为咳嗽、呼吸困难,剖检可见... 详细信息

由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae Mhp)引起的猪支原体肺炎(MPS)或猪地方流行性肺炎,是造成养猪业经济损失的最重要的疾病之一。MPS以接触性、高度传染性、慢性、高发病率和低死亡率为特点,主要表现为咳嗽、呼吸困难,剖检可见肺组织肉变或大理石样病变。其主要危害是引起猪的生长受阻和

关键词：猪肺炎支原体原核表达 Hsp70 免疫蛋白

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