检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2006年第11期36卷 880-884页

作者：谭斌刘长明危艳武张超范刘永刚冉多良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院新疆乌鲁木齐830052

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比... 详细信息

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比较。结果显示，用该试剂盒检测PRRSV人工接种猪血清样品，第1周抗体阳性检出率为50％，从第2周起抗体阳性检出率均为100％，而对照组猪血清抗体检测均为阴性。该试剂盒重复性好，-20℃保存18个月稳定，与其他病毒参考血清无交叉反应，与国外IDEXX ELISA试剂盒的符合率为83．3%。用该试剂盒对采自黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场的520份正常猪血清样品进行了抗体检测，结果，4个猪场阳性率高达90％以上，仅有2个猪场为阴性，其余猪场阳性率为10％～57%。

关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒免疫过氧化物酶单层细胞试验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

鹅呼肠孤病毒GRV1株分离鉴定及其σC基因特征性分析

引用

中国预防兽医学报 2006年第3期28卷 257-260页

作者：郭东春张云刘明欧阳岁东胡奇林张序刘怀然中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350003 哈尔滨市兽医卫生防疫站黑龙江哈尔滨150016 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心黑龙江哈尔滨150001

从患运动障碍的雏鹅肝脏和脾脏分离到一株鹅源呼肠孤病毒,该病毒经琼脂扩试验可与番鸭呼肠孤病毒(MuscovyDuckReovirus,MDRV)的抗血清发生交叉反应,推测其为呼肠孤病毒,命名为GRV1。参考GenBank禽呼肠孤病毒(AvianReovirus,ARV)和番鸭... 详细信息

从患运动障碍的雏鹅肝脏和脾脏分离到一株鹅源呼肠孤病毒,该病毒经琼脂扩试验可与番鸭呼肠孤病毒(MuscovyDuckReovirus,MDRV)的抗血清发生交叉反应,推测其为呼肠孤病毒,命名为GRV1。参考GenBank禽呼肠孤病毒(AvianReovirus,ARV)和番鸭呼肠孤病毒小外壳蛋白(minorcoreprotein)σC蛋白基因序列设计合成了一对引物,病毒RNA经RT-PCR扩增,产物为810bp,与预期的目的片断大小一致,测序结果表明σC基因在280～1089区间是一个开放性阅读框架,编码269个氨基酸的蛋白,GC含量为49.88%,等电点为6.497,分子量为29.4Ku。核苷酸序列经DNAStar(6.0)软件分析,与法国番鸭呼肠孤病毒89026株核苷酸同源率为93.0%,与鸡呼肠孤病毒σC基因同源率仅为21%～25%,同源性分析表明鹅呼肠孤病毒与番鸭呼肠孤病毒可能来自同一祖先,建议将鹅呼肠孤病毒连同番鸭呼肠孤病毒归属为正呼肠孤病毒属第二个亚群中不同于禽和内尔森贝海湾呼肠病毒的独立基因群。由蛋白质分析软件Anthepro5.0和MultiCoil软件分析表明,抗原区多位于N末端,没有跨膜区,σC为三股螺旋结构,这是我国第一次在鹅体内分离到呼肠孤病毒,同时也是第一次在数据库中提供σC的序列。

关键词：鹅呼肠孤病毒同源性小核心蛋白(σC) 基因特征

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA在乳酸乳球菌中的克隆与表达

引用

中国预防兽医学报 2006年第3期28卷 271-274页

作者：张莉秦泽荣崔尚金何召庆刘尚高北京市农林科学院畜牧兽医研究所北京100089 中国农业大学动物医学院北京100094 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

用PCR技术特异扩增了柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及PCR确认正确后,将TA4基因cDNA目的片段亚克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌LM0... 详细信息

用PCR技术特异扩增了柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及PCR确认正确后,将TA4基因cDNA目的片段亚克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌LM0230,获得重组质粒pMG36n-TA4,采用KpnⅠ/SacⅠ双酶切法及DNA测序证明cDNA序列完全正确。获得TA4乳酸乳球菌表达株,经SDS-PAGE电泳分析,结果表明表达产物与预期大小的TA4蛋白分子量一致。

关键词：柔嫩艾美耳球虫 TA4抗原基因cDNA 乳酸乳球菌克隆与表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

水泡性口炎病毒印第安纳株反基因操作系统的建立

引用

中国预防兽医学报 2006年第5期28卷 489-494页

作者：温志远葛金英王永胡森郝永清步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018

负链RNA病毒作为活病毒载体具有巨大的优势。本研究构建了水泡性口炎病毒印第安纳株(VSV-Ind)基因组全长cDNA克隆,建立了反向遗传操作系统并成功救获病毒。通过免疫荧光、电镜观察、RT-PCR及生长动力学研究,证实救获病毒保持典型的VSV... 详细信息

负链RNA病毒作为活病毒载体具有巨大的优势。本研究构建了水泡性口炎病毒印第安纳株(VSV-Ind)基因组全长cDNA克隆,建立了反向遗传操作系统并成功救获病毒。通过免疫荧光、电镜观察、RT-PCR及生长动力学研究,证实救获病毒保持典型的VSV印第安纳株特点,救获VSV的基因组内G蛋白前、后非编码区分别引入两个用于进一步构建重组病毒时外源基因插入的两个限制酶位点。本研究为新型重组活病毒疫苗载体和肿瘤治疗载体的研制及基础病毒学相关研究提供了重要的技术平台。

关键词：水泡性口炎病毒反基因操作

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达禽流感病毒H5HA、H7HA基因DNA疫苗的免疫原性研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第1期28卷 1-5页

作者：张芳芳姜永萍刘光亮陈怀涛乔传玲陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 甘肃农业大学甘肃兰州730070

为研究双顺反子DNA疫苗对禽流感病毒(AIV)的保护作用,将H5和H7亚型AIV的HA基因克隆到同一表达载体上,构建了双顺反子HA基因表达质粒pCI-H5HA-H7HA。以此质粒肌注免疫4周龄SPF鸡,首次免疫后3周加强免疫,同时设pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免... 详细信息

为研究双顺反子DNA疫苗对禽流感病毒(AIV)的保护作用,将H5和H7亚型AIV的HA基因克隆到同一表达载体上,构建了双顺反子HA基因表达质粒pCI-H5HA-H7HA。以此质粒肌注免疫4周龄SPF鸡,首次免疫后3周加强免疫,同时设pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免疫组及空白对照组,每周采血用微量血凝抑制法检测HI抗体。加强免疫后3周分别以100LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)和A/FPV/Rostock/34(H7N1)进行致死性攻击。结果显示各免疫组均可刺激鸡体产生H5、H7特异性抗体,pCI-H5HA-H7HA诱导产生的抗体对H5N1和H7N1的攻毒保护分别为50%和10%,而pCI-H5HA和pCI-H7HA联合免疫的攻毒保护均为70%。表明双顺反子质粒可诱导鸡产生较好或一定的保护,但免疫效果不够理想,推测与DNA的摄取及其体内表达有关,可望通过调整DNA疫苗的多种因素提高免疫效果。

关键词：禽流感 H5亚型 H7亚型 HA基因 DNA疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒疫苗免疫持续期试验

引用

中国预防兽医学报 2006年第1期28卷 13-15页

作者：智海东王云峰孙永科杨玉艾王玫童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 西北农林科技大学动物医学系陕西杨凌712100

用表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)制备的疫苗免疫4周龄SPF鸡,免疫后的7、14、21、30、60、90、120、150、180 d分别采血,分离血清,检测抗FPV和gB的抗体。结果表明重组疫苗免疫后14 d,免疫鸡... 详细信息

用表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)制备的疫苗免疫4周龄SPF鸡,免疫后的7、14、21、30、60、90、120、150、180 d分别采血,分离血清,检测抗FPV和gB的抗体。结果表明重组疫苗免疫后14 d,免疫鸡血清抗体已经全部阳转,免疫后的21 d血清抗FPV的抗体出现峰值;此后便开始回落,到免疫后的6个月抗体水平已经接近阴性对照的水平。抗gB的抗体在免疫后的第二周达到阳性,之后的六个月都为阳性。在免疫后的每个月将免疫鸡取20只再分成两组,分别用新城疫强毒与传染性喉气管炎强毒的攻击。在免疫后的第一个月对新城疫的保护率为8/10,第2个月对新城疫的保护为7/10,第3个月为2/10,因此对新城疫的免疫保护期为2个月。在免疫后的5个月内可以使免疫鸡对传染性喉气管炎强毒攻击的保护率达到8/10以上,免疫后的6个月对ILT为8/13,因此rF-PV-gB-F对传染性喉气管炎的免疫保护期为5个月。

关键词：新城疫传染性喉气管炎重组鸡痘病毒免疫持续期

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组病毒免疫及强毒攻击后外周血T淋巴细胞亚群的动态

引用

中国预防兽医学报 2006年第5期28卷 535-538页

作者：智海东王云峰孙永科张晶王玫彭金美刘永刚童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 西北农林科技大学动物医学系陕西杨凌712100

采用流式细胞检测技术对表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)、新城疫弱毒疫苗以及传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫和传染性喉气管炎以及新城疫强毒攻击后外周血T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCRγδ+)的... 详细信息

采用流式细胞检测技术对表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)、新城疫弱毒疫苗以及传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫和传染性喉气管炎以及新城疫强毒攻击后外周血T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCRγδ+)的变化动态进行监测。重组疫苗和禽痘疫苗免疫之后,CD8+和TCRγδ+的细胞数先升高后回落;在NDV强毒攻击之后,ND疫苗免疫组的TCRγδ+数量升高,rFPV-gB-F免疫组的三种细胞数量在第1周都下降,随后升高;ILT疫苗在免疫后的第1周,CD4+细胞数量下降。结果提示rFPV-gB-F可以诱发相应的细胞免疫应答,但是有关传染性喉气管炎病毒导致的细胞免疫需要进一步的研究。

关键词：传染性喉气管炎新城疫重组禽痘病毒外周血T淋巴细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测镉致鸡脾淋巴细胞DNA的损伤效应

引用

中国兽医学报 2006年第3期26卷 307-309页

作者：李金龙熊永忠徐世文李术刘丽玲东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

应用碱性单细胞凝胶电泳技术（single cell gel electrophoresis，SCGE）]检测了0～30μmol／L CdCl2对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤效应。结果表明，镉浓度在0～30μmol／L范围内，随着镉浓度的增加，对鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤... 详细信息

应用碱性单细胞凝胶电泳技术（single cell gel electrophoresis，SCGE）]检测了0～30μmol／L CdCl2对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤效应。结果表明，镉浓度在0～30μmol／L范围内，随着镉浓度的增加，对鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤作用逐渐增强，呈现显著的剂量效应（r=0．983，P=0．004）。结果提示，镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免疫毒性的重要机制之一。

关键词：镉鸡脾脏淋巴细胞单细胞凝胶电泳 DNA损伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IS711和omp2作为布氏杆菌种属及种株间分子鉴别诊断标记的研究

引用

中国预防兽医学报 2006年第6期28卷 676-680页

作者：陈伟业胡森黄克和步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子... 详细信息

布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子诊断。其中IS711为转座因子,在不同种布菌种存在插入位置的多态性,外膜蛋白OMP2编码基因则存在反向重复序列及种株间的多态性。为此,分别采用复式—PCR、PCR和限制性酶切片段长多态性(RFLP)分析,对分属于***、***和***的不同种布氏杆菌的不同种株,M5、M16、S2、S6和S19进行分子鉴别诊断。结果显示,根据IS711基因特定PCR扩增片段长多态性,可进行布氏杆菌种间的快速鉴别；而omp2编码基因PCR扩增片段PstⅠ、KpnⅠ、NcoⅠ和Eco47Ⅲ等4种限制酶片段长多态性,则可成为布氏杆菌菌株间特异的分子鉴别诊断标记,甚至疫苗株M5和野毒株M16之间的分子诊断标记。

关键词：布氏杆菌分子标记,IS711 omp2 限制性酶切片段长多态性(RFLP)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

尼帕病毒F糖蛋白在重组牛痘病毒中的表达及鉴定

引用

病毒学报 2006年第3期22卷 220-224页

作者：胡森王清华王喜军程小文步志高中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001 农业部检疫所国家外来动物疫病诊断中心青岛266032 南京农业大学南京210095

尼帕病毒(NiV)F蛋白在病毒侵入细胞和诱导中和抗体等方面具有重要作用。通过over-lapping PCR合成密码子优化的F蛋白基因构建了表达NiV F蛋白的重组牛痘病毒(WR株)rWR-NiV-F。利用兔抗NiV血清为检测抗体,通过间接免疫荧光(IFA)检测到了... 详细信息

尼帕病毒(NiV)F蛋白在病毒侵入细胞和诱导中和抗体等方面具有重要作用。通过over-lapping PCR合成密码子优化的F蛋白基因构建了表达NiV F蛋白的重组牛痘病毒(WR株)rWR-NiV-F。利用兔抗NiV血清为检测抗体,通过间接免疫荧光(IFA)检测到了F蛋白在重组病毒感染细胞中的表达。SDS-PAGE和Western blot检测证明重组蛋白F0被裂解为F1和F2。以rWR-NiV-F感染瞬时转染共表达NiV受体结合囊膜糖蛋白G的BHK细胞,可诱导细胞膜融合及合包体形成,证明该重组病毒表达F蛋白保持良好的抗原性及生物学活性,为NiV诊断及重组活载体疫苗研究奠定了重要基础。

关键词：副粘病毒科尼帕病毒 F蛋白重组牛痘病毒细胞融合

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：