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2006中国科协年会

作者：高宏雷高玉龙李俊山张宁王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,单层衣壳,无囊膜,呈20面体立体对称,其直径55～65 nm。IBDV的基因组由A、B两个片段的双链RNA组成,基因组中小片段(B)编码VP1,大片段(A)编码两... 详细信息

传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科禽双RNA病毒属,单层衣壳,无囊膜,呈20面体立体对称,其直径55～65 nm。IBDV的基因组由A、B两个片段的双链RNA组成,基因组中小片段(B)编码VP1,大片段(A)编码两个开放阅读框,大阅读框编码病毒蛋白前体NH2—VPX—VP4—VP3—COOH,本文写为VP243,VPX进一步加工为VP2,VPX、VP2和VP3形成病毒衣壳。小阅读框编码非结构蛋白VP5。VP1是病毒RNA聚合酶,VP2和VP3是IB-

关键词：传染性法氏囊病病毒多聚蛋白表达

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鸽源H5N1亚型禽流感病毒NA基因的克隆及序列分析

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吉林农业大学学报 2006年第2期28卷 204-207页

作者：赵丽王伟利周宇刘明钱爱东吉林农业大学动物科技学院长春130118 吉林出入境检验检疫局长春130062 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

用TRIAZOL试剂盒提取鸽源禽流感病毒的RNA,应用自行设计的特异性引物对神经氨酸酶（NA）基因进行RT-PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18-T载体上,并进行鉴定和序列测定.结果表明：鸽源H5N1亚型禽流感病毒NA基因全长1 350 bp,... 详细信息

用TRIAZOL试剂盒提取鸽源禽流感病毒的RNA,应用自行设计的特异性引物对神经氨酸酶（NA）基因进行RT-PCR扩增,得到NA基因的全长DNA片段,克隆到PMD18-T载体上,并进行鉴定和序列测定.结果表明：鸽源H5N1亚型禽流感病毒NA基因全长1 350 bp,编码449个氨基酸.通过序列比较,该毒株与国内同一亚型其他毒株神经氨酸酶的核苷酸同源性为77.6%～98.8%,氨基酸同源性为77.6%～99.1%.

关键词：禽流感病毒神经氨酸酶基因克隆序列分析

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鸡传染性支气管重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LHB株病毒攻击的免疫保护

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广西农业生物科学 2006年第B09期25卷 97-102页

作者：石星明王云峰王玫刘胜旺童光志徐灵龙贺笋中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生... 详细信息

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管管炎病毒异源毒株攻击,考察重组疫苗对异源毒株攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中抗体很快产生,外周血中CD 4+和CD 8+T淋巴细胞与非免疫对照组相比都有显著差异。用LHB株IB病毒攻击后,免疫鸡的病理损伤明显轻于非免疫对照组,并且其排毒时间明显缩短,排毒量明显减少,攻毒后免疫组的发病率为30%(3/10),死亡率为10%(1/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为40%(4/10)。体重分析结果表明,攻毒前后免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗能在动物体内很好表达,对试验动物产生较好的保护作用,同时也减轻了重组疫苗对体重增长的抑制作用。

关键词：传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒 γ干扰素 S1蛋白

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重组伪狂犬病毒(rPRV-GP5)对伪狂犬病最小免疫剂量的测定

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广西农业生物科学 2006年第B09期25卷 211-211,214页

作者：田志军金迪李国新周艳君仇华吉王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪病研究室黑龙江哈尔滨150001

伪狂犬病（Pseudorabies PR）是由伪狂犬病毒（PRV）引起的，可导致多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑髓炎为主要症状的急性传染病。猪是该病毒的中间宿主和传染源，感染后可引起妊娠母猪发生严重的繁殖障碍造成死胎、流产... 详细信息

伪狂犬病（Pseudorabies PR）是由伪狂犬病毒（PRV）引起的，可导致多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑髓炎为主要症状的急性传染病。猪是该病毒的中间宿主和传染源，感染后可引起妊娠母猪发生严重的繁殖障碍造成死胎、流产和木乃伊胎，患病仔猪表现为神经症状和呼吸道病，多以死亡告终。在规模化、集约化、现代化高密度养猪地区，PRV可在猪群问不断传播，是危害我国养猪业的一个重要传染病。用疫苗进行免疫接种是预防、甚至消灭伪狂犬病的根本措施。目前伪狂犬病疫苗在我国应用最多的是Bartha—K61株，该疫苗是20世纪60年代匈牙利Bartha等人将野毒株用鸡胚成纤维细胞反复传代而获得的一个人工致弱疫苗株，该毒株呈现gE-基因缺失表型，其毒力大大减弱，免疫原性很好，是世界上公认的优良疫苗株。我们以Bartha—K61株为载体构建了表达猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）CH—1a株GP5基因的重组伪狂犬病病毒（rPRV—GP5），但GP5基因的插入是否会改变伪狂犬病病毒Bartha—K61株对伪狂犬病的免疫保护效力？为此本研究通过测定重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）对伪狂犬病的最小免疫剂量，评价rPRV—GP5对伪狂犬病的保护效力。24只5～6月龄PRV阴性健康绵羊随机分成6组，每组4只，其中1组为生理盐水对照组，其余5组分别后腿肌注重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）冻干疫苗（病毒含量为5×10^6.0TCID50／mL）5×10^4.0TCID50／只、5×10^3.0TCID50／只、5×10^2.0TCID50／只、5×10^1.0TCID50／只和5TCID50／只，免疫后15d每只绵羊肌注伪狂犬病毒猪源强毒S株1000LD50。结果表明：对照组和5TCID50／只组的全部绵羊攻毒后4～5d均出现典型伪狂犬病症状并死亡，5×10^1.0TCID50／只组4只绵羊中有2只发病并死亡，其余各组全部保护。结论：重组伪狂犬病毒（rPRV—GP5）对绵羊最小免疫剂量为100TCID50／只，GP5基因的插入没有影响伪狂犬弱毒疫苗Bartha—K61株的免疫原性。

关键词：重组伪狂犬病病毒最小剂量保护

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禽流感病毒H9N2亚型HA基因的序列分析

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吉林农业大学学报 2006年第1期28卷 84-87,92页

作者：王伟利周宇赵丽刘明钱爱东吉林出入境检验检疫局长春130062 吉林农业大学动物科技学院长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

试验对1株H9N2亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因进行扩增、克隆，然后对毒株的HA基因进行阳性克隆鉴定。测序结果表明：所扩增的HA基因全长1683bp，编码560个氨基酸；该毒株的裂解位点的氨基酸序列为R-S-S-R，属于低致病力毒株，该毒株有... 详细信息

试验对1株H9N2亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因进行扩增、克隆，然后对毒株的HA基因进行阳性克隆鉴定。测序结果表明：所扩增的HA基因全长1683bp，编码560个氨基酸；该毒株的裂解位点的氨基酸序列为R-S-S-R，属于低致病力毒株，该毒株有7个潜在糖基化位点，受体结合位点的氨基酸分别为YWT-NVLY，左侧壁氨基酸为NGQQC，右侧壁为GTSKA。将该毒株与国内一些参考毒株的HA基因序列进行比较分析，结果表明，核苷酸与氨基酸同源率较高，核苷酸同源率为93．0％～97．3％，氨基酸同源率为95．4％～96．6％，亲源关系比较近；与韩国毒株核苷酸和氨基酸同源率分别为83．3％和87．3％，亲源关系比较远。

关键词：禽流感病毒血凝素基因序列分析

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传染性法氏囊病病毒非结构蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

传染性法氏囊病病毒非结构蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

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2006中国科协年会

作者：张宁高宏雷高玉龙王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、病毒性的传染病,尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞,法氏囊是受影响最大组织。IBD能... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、病毒性的传染病,尤其是B淋巴细胞是主要的靶细胞,法氏囊是受影响最大组织。IBD能引起雏鸡严重的、长期的免疫抑制及多种疫苗的免疫失败,增加病原体感染的易感性,降低幸存鸡的生长率,是目前影响世界养禽业中的一种非常重要的疾病。IBDV是双链RNA病毒,属于双RNA病毒科(Bironviridae)禽双RNA病毒属(Avibincvirus),其基因组由A、B两个节段组成,B节段(约2.8kb)编码VP1蛋白,为RNA依赖的RNA聚合酶。A节段

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP5 克隆表达多克隆抗体

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鸡胚成纤维细胞cDNA文库的构建

鸡胚成纤维细胞cDNA文库的构建

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2006中国科协年会

作者：刘伟高玉龙高宏雷王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、免疫抑制性传染病。该病由Cosgrove于1962年作为一种新的疾病首次报道,到了20世纪80年代末90年代初,病死率大大提高(80%左右)。该病以大面积流... 详细信息

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)引起的一种危害鸡的急性、高度接触性、免疫抑制性传染病。该病由Cosgrove于1962年作为一种新的疾病首次报道,到了20世纪80年代末90年代初,病死率大大提高(80%左右)。该病以大面积流行于欧洲、东南亚、非洲、南美洲等。我国的流行情况也十分复杂,变异株和超强毒株均有报道。鸡传染性法氏囊病毒属双RNA病毒科(Birnaviridaefamily), 无囊膜,基因组由A、B两个双链RNA节段组成。A节段(约3200bp)编码区含有两个开放阅读框,小ORF-2在前,编码对病毒复制费必须的结构蛋白VP5;大ORF-1在后,编码VP2-4-3。

关键词：传染性法氏囊病病毒(IBDV) 鸡胚成纤堆细胞 cDNA文库克隆技术

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鸵鸟新城疫病毒分子流行病学研究

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中国预防兽医学报 2006年第6期28卷 705-711页

作者：尹燕博龚振华司微蒋金书崔尚金高齐瑜山东省莱阳农学院动物科技学院山东青岛266109 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 中国农业大学动物医学院北京100094

应用RT-PCR、基因序列测定和分析以及鸡胚平均死亡时间(MDT)等方法,对1997～2000年间从中国北方分离的10株鸵鸟源新城疫病毒进行了F-糖蛋白基因序列测定、系统进化分析、基因分型和毒力测定。结果显示：10株鸵鸟源新城疫病毒分属Ⅱ、Ⅲ... 详细信息

应用RT-PCR、基因序列测定和分析以及鸡胚平均死亡时间(MDT)等方法,对1997～2000年间从中国北方分离的10株鸵鸟源新城疫病毒进行了F-糖蛋白基因序列测定、系统进化分析、基因分型和毒力测定。结果显示：10株鸵鸟源新城疫病毒分属Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ四个基因型。除1株为中发型毒株,其他均为速发型毒株；分析表明,引起鸵鸟发病的新城疫毒株有多种不同的来源。

关键词：鸵鸟 NDV 毒力测定基因序列基因型

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从湖羊肺脏中分离绵羊肺炎支原体的鉴定

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中国预防兽医学报 2006年第4期28卷 375-379页

作者：李媛陶岳阿依吐拉.肉孜高玉龙尹训南李新萍张孝恩王砚范辛九庆中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室黑龙江哈尔滨150001 新疆石河子畜牧兽医站新疆石河子832000 新疆维吾尔自治区动物防疫监督总站新疆乌鲁木齐830063

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏... 详细信息

从新疆湖羊肺脏病料中分离出一株支原体XJ-3f,用其培养物人工感染80日龄健康绵羊,28d后剖杀,剖检可见肺表面肉粉色实变,显微病理变化为大灶性融合性肺炎。参考国际已知支原体16SrRNA序列,设计一对扩增700bp片段的通用引物,直接提取肺脏组织DNA进行PCR扩增并克隆、测序。将该序列与GenBank中33种支原体序列比较,结果证明该序列与绵羊肺炎支原体(***)标准株Y-98同源性为99.9%,而与山羊支原体山羊亚种(***,Mcc)、丝状支原体山羊亚种(***,Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(***,***)等同源率为81%。以感染羊血清和Y-98与从发病羊肺脏中分离出的三株支原体菌体蛋白进行Westernblot,证明均与感染羊血清有特异性反应,且与Y-98相比无明显差异,故确定分离株为绵羊肺炎支原体(***)。

关键词：绵羊肺炎支原体 16 S rRNA 鉴定

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鹅源H5N1亚型禽流感病毒株HA基因的克隆与序列分析

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中国兽医学报 2006年第4期26卷 385-386,389页

作者：王伟利周宇孟庆锋刘明钱爱东吉林出入境检验检疫局吉林长春130062 吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

本研究对1株鹅源H5N1亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因进行了扩增、克隆及序列测定。结果表明：所扩增的片段长1707bp，包含完整的开放阅读框架，编码568个氨基酸。该毒株裂解位点的氨基酸序列为RRRKKR，具有高致病性的分子特征；该毒株... 详细信息

本研究对1株鹅源H5N1亚型禽流感病毒血凝素（HA）基因进行了扩增、克隆及序列测定。结果表明：所扩增的片段长1707bp，包含完整的开放阅读框架，编码568个氨基酸。该毒株裂解位点的氨基酸序列为RRRKKR，具有高致病性的分子特征；该毒株有6个潜在糖基化位点；受体结合位点的氨基酸分别为YWIHELY，其左侧壁氨基酸为SGVSSA，右侧壁为NGQSGR。该毒株与国内外一些参考毒株的HA基因序列比较，核苷酸同源率为76.8％～98．1％，氨基酸同源率为85．7％～97．4％，属于欧亚种系。

关键词：鹅禽流感病毒血凝素基因序列分析

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