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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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主题

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87 篇 序列分析
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74 篇 禽流感
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56 篇 致病性
54 篇 猪流感病毒
52 篇 dna疫苗
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47 篇 生物学特性
47 篇 抗原表位
46 篇 猪瘟病毒
43 篇 分离鉴定
40 篇 间接elisa
40 篇 鉴定
39 篇 多克隆抗体
36 篇 免疫保护
36 篇 马传染性贫血病毒

机构

498 篇 东北农业大学
435 篇 中国农业科学院哈...
273 篇 中国农业科学院哈...
180 篇 中国农业科学院哈...
112 篇 中国农业科学院哈...
111 篇 黑龙江八一农垦大...
99 篇 中国农业科学院哈...
96 篇 中国农业科学院哈...
91 篇 吉林农业大学
91 篇 中国农业科学院哈...
77 篇 中国农业科学院哈...
73 篇 内蒙古农业大学
67 篇 新疆农业大学
65 篇 甘肃农业大学
54 篇 东北林业大学
53 篇 中国农业科学院哈...
46 篇 中国农业科学院哈...
44 篇 南京农业大学
40 篇 中国农业科学院上...
38 篇 中国农业科学院哈...

作者

306 篇 陈化兰
169 篇 刘长明
169 篇 王笑梅
148 篇 陈洪岩
146 篇 刘思国
142 篇 危艳武
137 篇 童光志
134 篇 刘胜旺
134 篇 高玉龙
125 篇 邓国华
111 篇 祁小乐
109 篇 黄立平
108 篇 高宏雷
104 篇 孔宪刚
104 篇 仇华吉
90 篇 步志高
87 篇 崔尚金
85 篇 姜永萍
84 篇 于康震
84 篇 王云峰

语言

2,227 篇 中文

检索条件"机构=中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物研究室"

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排序：

H5亚型禽流感DNA疫苗的免疫保护持续期研究

H5亚型禽流感DNA疫苗的免疫保护持续期研究

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：姜永萍张平静左青山夏俊刘丽玲陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

对H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5免疫SPF鸡、商品蛋鸡的免疫保护持续期进行了测定。pCAGGoptiHA5以10μg剂量加强免疫3周龄SPF鸡,在免疫后4周、8周、28周以及50周的攻毒试验中,pCAGGoptiHA5免疫鸡均可100%的抵抗高致病性禽流感病毒Gs... 详细信息

对H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5免疫SPF鸡、商品蛋鸡的免疫保护持续期进行了测定。pCAGGoptiHA5以10μg剂量加强免疫3周龄SPF鸡,在免疫后4周、8周、28周以及50周的攻毒试验中,pCAGGoptiHA5免疫鸡均可100%的抵抗高致病性禽流感病毒Gs/GD/1/96(H5N1)的致死性攻击,但在免疫后50周用DK/SHNH/16/04(H5N1)攻击时,其死亡保护率为7/8。DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5 50μg首次免疫5周龄商品蛋鸡,首次免疫后3周以同样剂量和途径两次免疫,在开产前(免疫后16周)进行第三次免疫,在免疫后4周、8周、18周、28周以及50周的攻毒试验中,pCAGGoptiHA5免疫蛋鸡均可100%的抵抗高致病性禽流感病毒的致死性攻击。结果表明,禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5可以诱导长达一年的免疫保护,具有极高的现地应用价值和开发前景。

关键词：禽流感H5亚型 DNA疫苗免疫保护持续期

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H9N2亚型猪流感病毒HA基因的克隆及体外表达

H9N2亚型猪流感病毒HA基因的克隆及体外表达

引用

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会

作者：韩庆功乔传玲杨焕良陈艳辛晓光陈化兰赵玉军中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室暨兽医生物技术国家重点实验室沈阳农业大学畜牧兽医学院

从2004年全国动物流感调查分离到的一株猪流感病毒经亚型鉴定确定为H9N2,命名为 A／Swine／Zhejiang／7／2004(H9N2),利用RT-PCR扩增HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGSk, 转染293T细胞,PAWestern-blot检测所克隆的载体pCAGGHA... 详细信息

从2004年全国动物流感调查分离到的一株猪流感病毒经亚型鉴定确定为H9N2,命名为 A／Swine／Zhejiang／7／2004(H9N2),利用RT-PCR扩增HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGSk, 转染293T细胞,PAWestern-blot检测所克隆的载体pCAGGHA在体外能够瞬时表达具有免疫学活性的HA蛋白,这将为下一步开展DNA疫苗的免疫奠定基础。

关键词：猪流感病毒 HA基因克隆表达

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重组核蛋白检测鸭血清禽流感抗体间接ELISA方法的建立

重组核蛋白检测鸭血清禽流感抗体间接ELISA方法的建立

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：邓国华曲站红熊蕊黎玉梅田国彬陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

本实验利用禽流感重组核蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭血清禽流感抗体的间接ELISA方法,通过对各个工作组份反应条件的优化,确定的最佳工作条件为:包被抗原1:300稀释(蛋白含量为8μg/mL);待检血清1:200稀释;酶标抗体1:7000稀释;封闭时... 详细信息

本实验利用禽流感重组核蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭血清禽流感抗体的间接ELISA方法,通过对各个工作组份反应条件的优化,确定的最佳工作条件为:包被抗原1:300稀释(蛋白含量为8μg/mL);待检血清1:200稀释;酶标抗体1:7000稀释;封闭时间、待检血清和酶标二抗最佳作用时间均为1.5h。通过对907份鸭血清样本(包括141份免疫血清和766份现地血清)进行检测,经符合实验(AGP和HI)验证,间接ELISA方法与AGP的符合率为74.4%,与HI的符合率为95.0%,说明该检测方法具有很高的灵敏性和特异性。

关键词：禽流感重组核蛋白间接ELISA 抗体检测

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H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对金定鸭的免疫保护效力

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对金定鸭的免疫保护效力

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：姜永萍张洪波张平静赵有淑乔传玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对SPF鸡具有良好的免疫保护效果,为探讨其对鸭的免疫保护效果,将pCAGGoptiHA5以i00μg剂量加强免疫4周龄金定鸭,同时设油苗免疫对照组和空白对照组,加强免疫2周后用100LD的HPAIV A/Duck/ShanghaiNan... 详细信息

H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5对SPF鸡具有良好的免疫保护效果,为探讨其对鸭的免疫保护效果,将pCAGGoptiHA5以i00μg剂量加强免疫4周龄金定鸭,同时设油苗免疫对照组和空白对照组,加强免疫2周后用100LD的HPAIV A/Duck/ShanghaiNanhui/16/2004（H5N1）[DK/SHNH/1604（H5N1）]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7、14、21、28天采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化。结果表明,pCAGGoptiHA5免疫鸭后可以诱导较高水平的HI抗体,并可以保护免疫鸭不发生高致病性病毒攻击后的死亡。

关键词：禽流感 pCAGGoptiHA5 鸭 DNA疫苗免疫保护

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H5N1禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及生物活性鉴定

H5N1禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及生物活性鉴定

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：张晓霁刘明张云刘春国中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

经RT—PCR扩增了1株H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因(HA),将其克隆到pFastBacHTA载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体,将其转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行转座,通过蓝白斑筛选获得重组杆状病毒载体,经PCR... 详细信息

经RT—PCR扩增了1株H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因(HA),将其克隆到pFastBacHTA载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体,将其转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行转座,通过蓝白斑筛选获得重组杆状病毒载体,经PCR鉴定得到单一的HA条带。重组杆状病毒载体在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞。通过蛋白质电泳、免疫印迹法、血凝试验和血凝抑制试验分析表明:在sf9昆虫细胞中高效表达了分子量约66Kd的血凝素蛋白,用此蛋白免疫SPF鸡可产生较高效价的抗体,说明该蛋白具有与天然蛋白相似的生物活性。

关键词：禽流感病毒 H5N1 血凝素杆状病毒表达

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H5亚型禽流感DNA疫苗的最小免疫剂量测定

H5亚型禽流感DNA疫苗的最小免疫剂量测定

引用

中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：姜永萍张洪波张平静左青山夏俊陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室

将H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对SPF鸡的最小免疫剂量进行了测定。分别以50μg、10μg、5μg和1μg不同剂量pCAGGoptiHA5一次免疫,50μg和10μg剂量一次免疫可对免疫鸡形成100%的保护(不发病、不致死),5μg和1μg pCAGGoptiHA5一... 详细信息

将H5亚型禽流感DNA疫苗pCAGGoptiHA5对SPF鸡的最小免疫剂量进行了测定。分别以50μg、10μg、5μg和1μg不同剂量pCAGGoptiHA5一次免疫,50μg和10μg剂量一次免疫可对免疫鸡形成100%的保护(不发病、不致死),5μg和1μg pCAGGoptiHA5一次免疫可对免疫鸡形成62.5%(5/8)和87.5(7/8)的死亡保护;分别以50μg、10μg、5μg和1μg不同剂量pCAGGoptiHA5两次免疫后,50μg和10μg剂量两次免疫后可对免疫鸡形成100%完全保护(不发病、不致死、不排毒),5μg和1μg pCAGGoptiHA5两次免疫可对免疫鸡形成100%的保护(不发病、不致死)。结果表明,DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5能使免疫鸡获得保护的最小免疫剂量为1μg,具有很高的开发应用前景。

关键词：禽流感 H5亚型 DNA疫苗最小免疫剂量

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猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定

猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定

引用

2006年全国博士生学术论坛——林业及生态建设领域相关学科

作者：张立娜刘培欣曹殿军闫丽辉贾竞波危艳武东北林业大学野生动物资源学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室东北林业大学野生动物资源学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室传染病研究室

以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板，通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点，酶切后与PCI真核表达载体连接在一起，测序后，经比较，所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99.8％。将重组质粒转染PK细胞，检测所转染的p... 详细信息

以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板，通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点，酶切后与PCI真核表达载体连接在一起，测序后，经比较，所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99.8％。将重组质粒转染PK细胞，检测所转染的pIFN-γ的抗病毒活性。试验结果表明，转染pIFN-γ试验组与正常细胞接毒对照组比较有显著差异，说明所构建的重组质粒转染后具有抗病毒作用。

关键词：猪γ干扰素基因真核表达重组质粒转染抗病毒活性测定 PCR方法

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重组H5N3禽流感疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖条件研究

重组H5N3禽流感疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖条件研究

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：杨涛刘明张云刘春国王洪峰蔡雪辉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室哈尔滨150001

为研究通过反义遗传学技术构建的重组禽流感病毒rH5N3疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖规律,确定最佳增殖条件,将rH5N3疫苗株分别在500mL和10L转瓶培养的MDCK细胞中进行增殖试验,检测不同接毒量以及接毒后不同时间里的血凝价,以确定病毒的... 详细信息

为研究通过反义遗传学技术构建的重组禽流感病毒rH5N3疫苗株在MDCK细胞中大规模增殖规律,确定最佳增殖条件,将rH5N3疫苗株分别在500mL和10L转瓶培养的MDCK细胞中进行增殖试验,检测不同接毒量以及接毒后不同时间里的血凝价,以确定病毒的增殖情况.结果表明,在确定的最佳病毒增殖条件下,该重组疫苗株在500mL转瓶和10L转瓶中可获得大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到1:***5N3疫苗株可以在MDCK细胞中大规模增殖,操作方法简便,成本低廉,该方法为禽流感细胞培养型疫苗的大规模生产奠定了基础.

关键词：禽流感细胞培养 MDCK细胞增殖条件反义遗传学 rH5N3疫苗

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重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救

重组细胞高产型H3N2猪流感病毒株的拯救

引用

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

作者：杨涛刘明刘春国张云王笑梅童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,本研究利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8毒株的PB2基因作为内部基因与猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2... 详细信息

为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,本研究利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8毒株的PB2基因作为内部基因与猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株的HA、NA基因进行重组,成功拯救出了具有高度细胞适应性毒株rH3N2株,该毒株接毒MDCK细胞60h,血凝价可以达到1:512,表明该毒株具有高度适应细胞繁殖特性,为H3N2亚型猪流感病毒细胞培养型疫苗的研制奠定了基础.

关键词：猪流感 H3N2亚型反向遗传技术细胞培养流感疫苗重组细胞

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传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定

引用

中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：邓小芸高玉龙高宏雷祁小乐王笑梅中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段... 详细信息

传染性法氏囊病(Infectous bursal disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的以侵害雏鸡中枢免疫器官-法氏囊为主要特征的传染病.IBDV属双RNA病毒科禽双RNA病毒属,基因组包括大(A)小(B)两个节段,编码五种病毒蛋白:VP1、VP2、VP3、VP4和***1由B节段编码,具有依赖RNA的RNA聚合酶活性.其它四种病毒蛋白由A节段编码,VP4为病毒自身蛋白酶,VP5的功能尚不明确,VP2和VP3是病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳.虽然VP2是IBDV主要的毒力基因,也是构象表位的集中区,但越来越多的证据佐证了VP3也是IBDV重要的毒力基因.VP3基因位于IBDV A节段的2390-3169位,全长780bp.这个内衣壳蛋白有两个相互作用域:与基因组双链RNA的相互作用域在该蛋白的上游,与VP1结合域在该蛋白的C末端,这些相互作用对病毒的组装十分重要.本文对传染性法氏囊病病毒VP3抗原表位的鉴定进行了探讨.

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位

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