检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2003年第6期23卷 533-535页

作者：梁荣曹殿军阎丽辉刘培欣陈杰邓明俊李健强段明星清华大学生物科学与技术系北京100084 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 西北农林科技大学动物科学与动物医学院陕西杨凌712100

从西北地区 1979～ 1999年发生新城疫的鸡群中分离和收集的 15株新城疫病毒 ( NDV) ,经蚀斑纯化 ,共得到 11个克隆毒株 ;对其进行了蚀斑形成能力的测定 ,证明蚀斑形成能力与毒力成正比 ;探讨了温度对蚀斑形成能力的影响 ,证明 NDV蚀斑... 详细信息

从西北地区 1979～ 1999年发生新城疫的鸡群中分离和收集的 15株新城疫病毒 ( NDV) ,经蚀斑纯化 ,共得到 11个克隆毒株 ;对其进行了蚀斑形成能力的测定 ,证明蚀斑形成能力与毒力成正比 ;探讨了温度对蚀斑形成能力的影响 ,证明 NDV蚀斑形成能力在 4 1℃比 37℃强 ,表现为蚀斑出现早、蚀斑大、蚀斑形成单位 ( PFU)高 ,同时在 4 1℃时细胞生长状况良好 ,不易污染 ,故认为在 4 1℃进行 NDV的蚀斑纯化值得推荐。

关键词：新城疫病毒分离株蚀斑纯化蚀斑形成能力温度致病力融合蛋白基因

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我国鸡传染性支气管炎病毒分离株LX4 mRNA1cDNA的分子特征

我国鸡传染性支气管炎病毒分离株LX4 mRNA1cDNA的分子特征

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中国畜牧兽医学会2003年学术年会

作者：刘胜旺刘玉芬孔宪刚中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学动物医院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious BronchitisVirus,IBV)引起的危害包括我国在内世界上大多数国家养鸡业的一类重要传染病。该病毒为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的... 详细信息

鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(Infectious BronchitisVirus,IBV)引起的危害包括我国在内世界上大多数国家养鸡业的一类重要传染病。该病毒为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的代表种。其基因组为单股正链不分节段的RNA,具有感染性,长约27.6kb。IBV在感染细胞内产生6种亚基因组mRNA,这些mRNA具有共同的3′末端,形成套式结构。研究表明,IBV基因易变异的主要原因在于其RNA聚合酶缺少校正功能,而该酶位于IBV基因组mRNA1的独特区内。目前,已报道的具有完整mRNA1基因序列的IBV毒株只有Beau株,通过对该毒株和其它冠状病毒基因组对应序列分析发现,IBV基因组

关键词：鸡传染性支气管炎病毒氨基酸残基分子特征分离株非结构蛋白氨基酸同源性核苷酸 LX4 mRNA1cDNA

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基因芯片的研究进展

基因芯片的研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

基因芯片(gene chip)又称DNA微阵列(DNA microarray),DNA芯片。它是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于支持物上,然后与待测的荧光素或放射性同位素标记的核酸样品按碱基配对原理进行杂交,再通过激光共聚焦荧... 详细信息

基因芯片(gene chip)又称DNA微阵列(DNA microarray),DNA芯片。它是将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地固定于支持物上,然后与待测的荧光素或放射性同位素标记的核酸样品按碱基配对原理进行杂交,再通过激光共聚焦荧光检测系统等对芯片进行扫描,对每一探针上的荧

关键词：寡核苷酸阵列基因芯片基因表达图谱人类基因组杂交信号酿酒酵母

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DNA微阵列与基因表达研究概况

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动物医学进展 2003年第6期24卷 15-18页

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DN... 详细信息

DNA微阵列技术是 90年代兴起的一种对成百上千甚至上万个基因同时进行检测的新技术 ,它具有高通量和并行化的特点 ,广泛应用于基因表达、预测基因功能、检测基因突变和多态性分析、发现新药物和药物靶器官以及疫苗设计等方面。文章对 DNA微阵列的基本原理、DNA微阵列制备技术、杂交信号检测以及数据分析。 c DNA微阵列与细胞周期相关基因表达、细菌基因表达、病毒基因表达、肿瘤基因表达进行了概述。

关键词： DNA微阵列基因表达技术原理杂交信号检测基因功能基因突变多态性分析

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鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备

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农业生物技术学报 2003年第4期11卷 412-416页

作者：萨仁高娃刘胜旺孔宪刚丁忠庆乌尼哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室内蒙古农业大学动物科学与医学学院哈尔滨150030 东北农业大学动物医学院内蒙古农业大学动物科学与医学学院呼和浩特010018

将编码鸡(Gallusgallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)原核表达载体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。SDS-P... 详细信息

将编码鸡(Gallusgallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)原核表达载体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。SDS-PAGE和Westernblot分析显示,表达的鸡IL-2融合蛋白分子量约为19kD。融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-2融合蛋白及其纯化产物免疫家兔,制备兔抗鸡IL-2多克隆抗血清,并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定,表明其与纯化的重组鸡IL-2蛋白具有良好的反应性,而且该反应是特异的。

关键词：鸡IL-2融合蛋白表达抗体制备

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禽流感病毒血凝素与核蛋白在重组禽痘病毒中的共表达

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动物医学进展 2003年第1期24卷 81-83页

作者：乔传玲张建林贾永清邓国华姜永萍王秀荣孟庆文于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院东北农业大学动物医学院黑龙江哈尔滨150030

为克服禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)仅诱导机体产生亚型特异性免疫应答的不足,本研究拟将病毒核蛋白(NP)基因与HA基因在重组禽痘病毒中实现共表达。首先构建转移载体,从测序质粒pUCNP中切下目的基因克隆到载体pSY538早晚期启动子LP2EP2的... 详细信息

为克服禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)仅诱导机体产生亚型特异性免疫应答的不足,本研究拟将病毒核蛋白(NP)基因与HA基因在重组禽痘病毒中实现共表达。首先构建转移载体,从测序质粒pUCNP中切下目的基因克隆到载体pSY538早晚期启动子LP2EP2的下游,再将含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2的NP基因片段亚克隆到已有的AIVHA基因重组禽痘病毒转移载体中,即得到同时含有HA和NP两种基因的重组转移载体pSY(HA+NP)。将转移载体脂质体转染已感染禽痘病毒亲本株S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞。根据报告基因β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的表达,蓝白斑法筛选重组病毒,经数轮蚀斑纯化,PCR鉴定及West-ern-blot分析,结果表明所获得的重组病毒能高效表达AIVHA及NP两种蛋白。此研究为进一步研制更为有效的禽流感基因工程活病毒载体疫苗奠定了基础。

关键词：禽流感病毒血凝素基因核蛋白基因重组禽痘病毒基因共表达基因工程活病毒载体疫苗

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不同免疫途径及剂量接种禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的研究

不同免疫途径及剂量接种禽流感重组禽痘病毒疫苗免疫效力的研究

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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

作者：乔传玲李呈军刘志军李雁冰于康震陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡体产生对H5N1和H7N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)攻击的100％保护力.本实验将不同剂量的重组疫苗分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴箅途径接种种周龄... 详细信息

表达禽流感病毒(AIV)H5 HA和N1 NA基因的重组禽痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡体产生对H5N1和H7N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)攻击的100％保护力.本实验将不同剂量的重组疫苗分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴箅途径接种种周龄SPF鸡.结果此疫苗经翅下刺种、肌肉和皮下注射途径接种,能够诱导产生血凝抑制(HI)抗体;用100LD<,50>的HPAIV A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)毒株攻击后,免疫鸡无一发病和死亡,疫苗的保护率为100％.点眼和滴箅途径免疫时,大剂量接种能够诱导一下的抗体生成,攻毒后的保护率分别为83.3％、66.7％;而小剂量接种,则不能够产生免疫反应,攻毒后疫苗的保护率为0.表明重组禽痘病毒疫苗经翅膀刺种、股份注射和皮下注射才能够诱导机体产生高效的免疫力.

关键词：禽流感重组禽痘病毒疫苗接种途径剂量免疫效力

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鸡痘疫苗对禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力的影响

鸡痘疫苗对禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力的影响

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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

作者：乔传玲李呈军李泽君田国彬陈化兰于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室及兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

禽流感病毒(AIV)HA和NA双基因重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡本产生100％抵抗H5N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)的攻击.而当鸡群已进行鸡痘疫苗免疫或者感染了鸡痘病毒的情况下,此重组疫苗的免疫效力如何?还不为人知,本研究首先对SPF试... 详细信息

禽流感病毒(AIV)HA和NA双基因重组鸡痘病毒rFPV-HA-NA能够诱导鸡本产生100％抵抗H5N1高致病力禽流感病毒(HPAIV)的攻击.而当鸡群已进行鸡痘疫苗免疫或者感染了鸡痘病毒的情况下,此重组疫苗的免疫效力如何?还不为人知,本研究首先对SPF试验鸡接种商品化的鸡痘弱毒疫苗,既而在免疫后的不同间隔时间接种重组疫苗,免疫后检测鸡群的HI抗体水平,同时用100LD<,50>的HPAIV H5N1进行攻击.结果两种疫苗同时接种和间隔在内周(或以上)时,鸡痘疫苗对重组苗的免疫效力不构成影响,对禽流感的保护仍为100％,而两次免疫的间隔时间在职、2、3周时,重组疫苗的免疫保护效力则受到不同程度的影响.

关键词：鸡痘疫苗禽流感重组鸡痘病毒疫苗免疫效力 DNA重组

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基因芯片的研究进展

基因芯片的研究进展

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第十次学术研讨会

作者：刘丽玲王秀荣陈化兰中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)

阐述了基因芯片技术的基本原理,介绍了基因芯片在制备技术、杂交信号检测和数据分析方面的技术进展,并对CDNA芯片在基因表达中的应用进行了探讨.

关键词：基因芯片基因表达 CDNA芯片基因功能

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鸡白细胞介素15基因在大肠杆菌中的高效表达

鸡白细胞介素15基因在大肠杆菌中的高效表达

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中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会

作者：独军政陈怀涛刘胜旺孔宪刚甘肃农业大学动物医学院甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本实验首先应用PCR技术从质粒pUC19ChIL-15中扩增出编码成熟ChIL-15（mChIL-15）的基因,将其克隆到pMD18-T载体上,然后用双酶KpnI/PstI切下mChIL-15基因片段,定向亚克隆到经同样酶切处理的带有6个组氨酸标签的表达载体pPoEXHTa中,构建... 详细信息

本实验首先应用PCR技术从质粒pUC19ChIL-15中扩增出编码成熟ChIL-15（mChIL-15）的基因,将其克隆到pMD18-T载体上,然后用双酶KpnI/PstI切下mChIL-15基因片段,定向亚克隆到经同样酶切处理的带有6个组氨酸标签的表达载体pPoEXHTa中,构建原核表达载体pPChIL-15,对其测序确认读框正确后,转化大肠杆菌DH5a诱导表达并进行纯化。用重组ChIL-15（rChlL-15）免疫豚鼠,制备多克隆抗体。结果表明,rChIL-15融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,其分子量约为18kDa,扫描分析含量在30%左右。用离子亲和树脂对重组蛋白进行了有效的纯化,并成功制备出了豚鼠抗rChIL-15多克隆抗体,这为下阶段的研究提供了重要的实验材料。

关键词：鸡白细胞介素15 原核表达纯化多克隆抗体

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